聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(編輯修改稿)
2024-12-15 05:24 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 端 第 15課時(shí) 學(xué)習(xí)探究區(qū) 本課欄目開(kāi)關(guān) 知識(shí) 儲(chǔ)備區(qū) 學(xué)習(xí) 探究區(qū) 自我 檢測(cè)區(qū) 活學(xué)活用 1 ．在遺傳病及刑偵破案中常需要對(duì)樣品 DNA 進(jìn)行分析， P C R技術(shù)能快速擴(kuò)增 DNA 片段，在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬(wàn)份的 DNA 拷貝，有效地解決了因?yàn)闃悠分?DNA 含量太低而難以對(duì)樣品進(jìn)行分析研究的難題。據(jù)圖回答相關(guān)問(wèn)題： 第 15課時(shí) 學(xué)習(xí)探究區(qū) 本課欄目開(kāi)關(guān) 知識(shí) 儲(chǔ)備區(qū) 學(xué)習(xí) 探究區(qū) 自我 檢測(cè)區(qū) ( 1) 在相應(yīng)的橫線(xiàn)上寫(xiě)出引物 Ⅱ ，并在復(fù)性這一步驟中將引物 Ⅱ 置于合適的位置。 ( 2) 在相應(yīng)的橫線(xiàn)上寫(xiě)出循環(huán)一次后生成的 DNA 分子。 ( 3) 若將作為原料的四種脫氧核苷酸用32P 標(biāo)記，請(qǐng)分析循環(huán)一次后生成的 DNA 分子的特點(diǎn)是______________________________ ；循環(huán) n 次后生成的DNA 分子中不含放射性的單鏈占總單鏈的比例為_(kāi)_______ 。 第 15課時(shí) 學(xué)習(xí)探究區(qū) 本課欄目開(kāi)關(guān) 知識(shí) 儲(chǔ)備區(qū) 學(xué)習(xí) 探究區(qū) 自我 檢測(cè)區(qū) 答案 ( 1 ) 5 ′ — G — A — OH ( 3 ) 每個(gè) DNA 分子各有一條鏈含 32 P 標(biāo)記 1 / 2 n 解析 ( 1 ) D N A 聚合酶不能從頭開(kāi)始合成 DNA ，只能從3 ′ 端延伸 DNA 鏈，所以引物就提供了 3 ′ 端，子鏈延伸方向 5 ′ → 3 ′ ，引物 Ⅰ 與 b 鏈部分堿基互補(bǔ)，引物 Ⅱ則與 a 鏈部分堿基互補(bǔ)，且連接到 a 鏈的 3 ′ 端，故引物 Ⅱ 的結(jié)構(gòu)為 5 ′ — G — A — OH ，復(fù)性結(jié)果為： 第 15課時(shí) 學(xué)習(xí)探究區(qū) 本課欄目開(kāi)關(guān) 知識(shí) 儲(chǔ)備區(qū) 學(xué)習(xí) 探究區(qū) 自我 檢測(cè)區(qū) HO — A — G — 5 ′ 5 ′ — G — G …… T — C — 3 ′ ( 2) 經(jīng)過(guò)一次循環(huán)后，產(chǎn)生的兩個(gè) DNA 分子分別含有引物 Ⅰ 和引物 Ⅱ 。 ( 3) 由于作為原料的四種脫氧核苷酸被32P 標(biāo)記，所以新合成的子鏈均含有放射性，一次循環(huán)后的兩個(gè) D N A 各有一條鏈含32P ，若復(fù)制 n 次，產(chǎn)生子鏈共 2n 2 ，其中只有親本的兩條母鏈不含32P ，則其所占比例為 2 / ( 2n 2) ＝1/ 2n。 第 15課時(shí) 學(xué)習(xí)探究區(qū) 本課欄目開(kāi)關(guān) 知識(shí) 儲(chǔ)備區(qū) 學(xué)習(xí) 探究區(qū) 自我 檢測(cè)區(qū) 探究點(diǎn)二 DNA 片段的 P C R 擴(kuò)增和產(chǎn)物檢測(cè) DNA 片段的 P C R 擴(kuò)增可以利用 P C R 熱循環(huán)儀完成，而產(chǎn)物的檢測(cè)則利用瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行。閱讀教材，完善下列內(nèi)容： 1 ． DNA 片段的 P C R 擴(kuò)增 準(zhǔn)備 移液 混合 離心 第 15課時(shí) 學(xué)習(xí)探究區(qū) 本課欄目開(kāi)關(guān) 知識(shí) 儲(chǔ)備區(qū) 學(xué)習(xí) 探究區(qū) 自我 檢測(cè)區(qū) _____ ：將離心管放入 P C R 儀中，設(shè)置程序進(jìn)行反應(yīng) ( 1) 加入離心管中的物質(zhì)應(yīng)包括： __________ 、 ___ ___ ___ ___ 酶、4 種 __________________ 、 2 種 ______ 、緩沖液。 ( 2) 離心管中要加入少量石蠟油，目的是 ___________________ 。 ( 3) 熱循環(huán)儀的反應(yīng)程序應(yīng)設(shè)定為： 防止反應(yīng)溶液的揮發(fā) 反應(yīng) 模板 DNA TaqDNA聚合 三磷酸脫氧核苷酸 引物 94 94 40 72 第 15課時(shí) 學(xué)習(xí)探究區(qū) 本課欄目開(kāi)關(guān) 知識(shí) 儲(chǔ)備區(qū) 學(xué)習(xí) 探究區(qū) 自我 檢測(cè)區(qū) ( 4)
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