聚合酶鏈式反應技術(編輯修改稿)
2024-12-15 05:24 本頁面
【文章內容簡介】 端 第 15課時 學習探究區(qū) 本課欄目開關 知識 儲備區(qū) 學習 探究區(qū) 自我 檢測區(qū) 活學活用 1 ．在遺傳病及刑偵破案中常需要對樣品 DNA 進行分析， P C R技術能快速擴增 DNA 片段，在幾個小時內復制出上百萬份的 DNA 拷貝，有效地解決了因為樣品中 DNA 含量太低而難以對樣品進行分析研究的難題。據(jù)圖回答相關問題： 第 15課時 學習探究區(qū) 本課欄目開關 知識 儲備區(qū) 學習 探究區(qū) 自我 檢測區(qū) ( 1) 在相應的橫線上寫出引物 Ⅱ ，并在復性這一步驟中將引物 Ⅱ 置于合適的位置。 ( 2) 在相應的橫線上寫出循環(huán)一次后生成的 DNA 分子。 ( 3) 若將作為原料的四種脫氧核苷酸用32P 標記，請分析循環(huán)一次后生成的 DNA 分子的特點是______________________________ ；循環(huán) n 次后生成的DNA 分子中不含放射性的單鏈占總單鏈的比例為________ 。 第 15課時 學習探究區(qū) 本課欄目開關 知識 儲備區(qū) 學習 探究區(qū) 自我 檢測區(qū) 答案 ( 1 ) 5 ′ — G — A — OH ( 3 ) 每個 DNA 分子各有一條鏈含 32 P 標記 1 / 2 n 解析 ( 1 ) D N A 聚合酶不能從頭開始合成 DNA ，只能從3 ′ 端延伸 DNA 鏈，所以引物就提供了 3 ′ 端，子鏈延伸方向 5 ′ → 3 ′ ，引物 Ⅰ 與 b 鏈部分堿基互補，引物 Ⅱ則與 a 鏈部分堿基互補，且連接到 a 鏈的 3 ′ 端，故引物 Ⅱ 的結構為 5 ′ — G — A — OH ，復性結果為： 第 15課時 學習探究區(qū) 本課欄目開關 知識 儲備區(qū) 學習 探究區(qū) 自我 檢測區(qū) HO — A — G — 5 ′ 5 ′ — G — G …… T — C — 3 ′ ( 2) 經過一次循環(huán)后，產生的兩個 DNA 分子分別含有引物 Ⅰ 和引物 Ⅱ 。 ( 3) 由于作為原料的四種脫氧核苷酸被32P 標記，所以新合成的子鏈均含有放射性，一次循環(huán)后的兩個 D N A 各有一條鏈含32P ，若復制 n 次，產生子鏈共 2n 2 ，其中只有親本的兩條母鏈不含32P ，則其所占比例為 2 / ( 2n 2) ＝1/ 2n。 第 15課時 學習探究區(qū) 本課欄目開關 知識 儲備區(qū) 學習 探究區(qū) 自我 檢測區(qū) 探究點二 DNA 片段的 P C R 擴增和產物檢測 DNA 片段的 P C R 擴增可以利用 P C R 熱循環(huán)儀完成，而產物的檢測則利用瓊脂糖凝膠電泳進行。閱讀教材，完善下列內容： 1 ． DNA 片段的 P C R 擴增 準備 移液 混合 離心 第 15課時 學習探究區(qū) 本課欄目開關 知識 儲備區(qū) 學習 探究區(qū) 自我 檢測區(qū) _____ ：將離心管放入 P C R 儀中，設置程序進行反應 ( 1) 加入離心管中的物質應包括： __________ 、 ___ ___ ___ ___ 酶、4 種 __________________ 、 2 種 ______ 、緩沖液。 ( 2) 離心管中要加入少量石蠟油，目的是 ___________________ 。 ( 3) 熱循環(huán)儀的反應程序應設定為： 防止反應溶液的揮發(fā) 反應 模板 DNA TaqDNA聚合 三磷酸脫氧核苷酸 引物 94 94 40 72 第 15課時 學習探究區(qū) 本課欄目開關 知識 儲備區(qū) 學習 探究區(qū) 自我 檢測區(qū) ( 4)
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