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天然產物提取液中蛋白質和脂肪等雜質的去除試驗畢業(yè)論文(編輯修改稿)

2025-07-16 21:29 本頁面
 

【文章內容簡介】 、冷凍干燥等技術。采用了高新技術,就是提高設備的裝備水平,這是提高天然色素的收率,提高產量,保證優(yōu)質的基礎。(3)實現(xiàn)產品的標準化、系列化、實用化,開拓國內外市場。近年來,我國天然色素產業(yè)的管理水平和規(guī)范化方面雖然有長足的進步,但還應當進一步加強。我國各天然色素生產企業(yè)一般規(guī)模都偏小,產品單一,在小量、低質量、高損耗中徘徊,經濟效益不明顯,抗風險能力差。多數(shù)工廠所生產的是原料型的天然色素,一般不能直接使用,因而價格低,經濟效益不高。就某一個天然色素而言,一個企業(yè)也沒有完全做到標準化、系列化,缺欠實用技術的開發(fā)。歐洲、美國、日本等國天然色素產業(yè)的發(fā)展早于我國,這些國家在管理水平、規(guī)范化、標準化、系列化、實用化等方面日臻完善。我們應當奮進直追,迎頭趕上。在天然色素的發(fā)展方面,應當進一步加強天然色素實用技術的研究、開發(fā),這個課題并不亞于天然色素本身的研究、開發(fā)和生產,是我國天然色素打開國內外市場的關鍵。(4)進行原料的綜合利用在原料上應當走綜合利用,變廢為寶的道路。一個原料多出好幾個產品,物盡其用,提高經濟效益。許多天然色素生產的原料是野生植物、農作物副產品或廢棄物。目前許多天然紅色素,如紅高粱、酸棗色、葡萄皮紅等,都是從農產品的廢棄物中提取的。用高粱殼生產高粱紅;用葡萄皮渣生產葡萄色素等,原料低廉。又例如生產辣椒紅色素的工廠,用辣椒作為原料。辣椒的種子可以提取辣椒堿及辣椒油,殘渣含高蛋白;辣椒種皮可以提取辣椒紅色素、辣椒堿,殘渣再配上面醬、油、鮮味劑,可精制辣醬。一個姜黃原料可以生產出姜黃油、姜黃素、姜黃油樹脂、姜黃粉、乳化姜黃色素等多種產品,這對于農產品的深加工以及廢棄物的處理,不失為一個好方法。這種綜合利用的開發(fā),可以大大提高經濟效益。(5)立足國內市場、開拓國際市場我國天然色素產品應當立足于國內巨大的市場,開拓國際市場。我國是一個占世界人口四分之一的、具有13億人口的大國,因此,這樣多的人口,要進入一日三餐的加工食品時代,需要的食用天然色素是很大的。一些外國的有識之士也十分重視這個市場。只要我們能把自己的天然色素做到標準化、系列化、實用化,一定能培養(yǎng)出中國這個大市場,這已經為火腿腸使用紅曲紅和餅干噴涂辣椒紅的中國市場所證明。當今國際經濟一體化要求我們將中國的天然色素打人世界其它國家,特別是西方發(fā)達國家,它除了要開拓中國天然色素的國際市場外,還有一個東方飲食文化的交流和交融的重要意義[12]。 天然產物提取液的精制方法隨著科技的發(fā)展和生活水平的提高,天然產物以其健康、安全的特點,將越來越受人們的歡迎,但天然產物大多不能直接使用,而只需要其中的某些物質,因此需要對天然產物進行提取分離,提取后所得提取液大多數(shù)是混合物,需利用體系中各組分物性的差別,使用不同的方法使混合物得到分離提純。 蛋白質分離純化方法(1)根據(jù)分子大小不同進行分離純化蛋白質是一種大分子物質,并且不同蛋白質的分子大小不同,因此可以利用一些較簡單的方法使蛋白質和小分子物質分開,并使蛋白質混合物也得到分離。根據(jù)蛋白質分子大小不同進行分離的方法主要有透析、超濾、離心和凝膠過濾等。透析和超濾是分離蛋白質時常用的方法。透析是將待分離的混合物放入半透膜制成的透析袋中,再浸入透析液進行分離。超濾是利用離心力或壓力強行使水和其它小分子通過半透膜,而蛋白質被截留在半透膜上的過程。這兩種方法都可以將蛋白質大分子與以無機鹽為主的小分子分開。它們經常和鹽析、鹽溶方法聯(lián)合使用,在進行鹽析或鹽溶后可以利用這兩種方法除去引入的無機鹽。由于超濾過程中,濾膜表面容易被吸附的蛋白質堵塞,以致超濾速度減慢,截流物質的分子量也越來越小。所以在使用超濾方法時要選擇合適的濾膜,也可以選擇切向流過濾得到更理想的效果。離心也是經常和其它方法聯(lián)合使用的一種分離蛋白質的方法。當?shù)鞍踪|和雜質的溶解度不同時可以利用離心的方法將它們分開。例如,在從大米渣中提取蛋白質的實驗中,加入纖維素酶和淀粉酶進行預處理后,再用離心的方法將有用物質與分解掉的雜質進行初步分離[13]。使蛋白質在具有密度梯度的介質中離心的方法稱為密度梯度(區(qū)帶)離心。常用的密度梯度有蔗糖梯度、聚蔗糖梯度和其它合成材料的密度梯度。可以根據(jù)所需密度和滲透壓的范圍選擇合適的密度梯度。密度梯度離心曾用于純化蘇云金芽孢桿菌伴孢晶體蛋白,得到的產品純度高但產量偏低。蔣辰等通過比較不同密度梯度介質的分離效果,利用溴化鈉密度梯度得到了高純度的蘇云金芽孢桿菌伴孢晶體蛋白。凝膠過濾也稱凝膠滲透層析,是根據(jù)蛋白質分子大小不同分離蛋白質最有效的方法之一。凝膠過濾的原理是當不同蛋白質流經凝膠層析柱時,比凝膠珠孔徑大的分子不能進入珠內網狀結構,而被排阻在凝膠珠之外,隨著溶劑在凝膠珠之間的空隙向下運動并最先流出柱外;反之,比凝膠珠孔徑小的分子后流出柱外。目前常用的凝膠有交聯(lián)葡聚糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠和瓊脂糖凝膠等。在甘露糖蛋白提純的過程中使用凝膠過濾方法可以得到很好的效果,純度鑒定證明產品為分子量約為32kDa、成分是多糖∶蛋白質(88∶12)、多糖為甘露糖的單一均勻糖蛋白[14]。凝膠過濾在抗凝血蛋白的提取過程中也被用來除去大多數(shù)雜蛋白及小分子的雜質。(2)根據(jù)溶解度不同進行分離純化影響蛋白質溶解度的外部條件有很多,比如溶液的pH值、離子強度、介電常數(shù)和溫度等。但在同一條件下,不同的蛋白質因其分子結構的不同而有不同的溶解度,根據(jù)蛋白質分子結構的特點,適當?shù)馗淖兺獠織l件,就可以選擇性地控制蛋白質混合物中某一成分的溶解度,達到分離純化蛋白質的目的。常用的方法有等電點沉淀和pH值調節(jié)、蛋白質的鹽溶和鹽析、有機溶劑法、雙水相萃取法、反膠團萃取法等。等電點沉淀和pH值調節(jié)是最常用的方法。每種蛋白質都有自己的等電點,而且在等電點時溶解度最低;相反,有些蛋白質在一定pH值時很容易溶解。因而可以通過調節(jié)溶液的pH值來分離純化蛋白質。王洪新等[15]研究茶葉蛋白質提取過程發(fā)現(xiàn),pH值為4時茶葉蛋白提取效果最好,%,%。李殿寶在從葵花脫脂粕中提取蛋白質時將蛋白溶液的pH值調到3~4,使目標蛋白于等電點沉淀出來。等電點沉淀法還應用于葡萄籽中蛋白質的提取。他們利用堿溶法提取葡萄籽蛋白質,得到了最佳的提取工藝為:以的溶液,按1∶5的料液比,在40℃攪拌40 min,%。另外還可以利用堿法提取大米蛋白,其持水性、吸油性和起泡性等均優(yōu)于酶法提取。利用酸法提取得到的鰱魚魚肉蛋白質無腥味、色澤潔白,蛋白質產率高達90%。蛋白質的鹽溶和鹽析是中性鹽顯著影響球狀蛋白質溶解度的現(xiàn)象,其中,增加蛋白質溶解度的現(xiàn)象稱鹽溶,反之為鹽析。應當指出,同樣濃度的二價離子中性鹽,如、對蛋白質溶解度影響的效果,要比一價離子中性鹽如、大得多。在葡萄籽蛋白提取工藝中除了可以利用堿溶法還可以利用鹽溶法來提取蛋白質,其最佳提取工藝是:以10%溶液,按1∶25的料液比,在30℃攪拌提取30min,%。鹽析是提取血液中免疫球蛋白的常用方法,如多聚磷酸鈉絮凝法、硫酸銨鹽析法,其中硫酸銨鹽析法廣泛應用于生產。由于硫酸銨在水中呈酸性,為防止其對蛋白質的破壞,應用氨水調pH值至中性。為防止不同分子之間產生共沉淀現(xiàn)象,%~%。利用鹽溶和鹽析對蛋白質進行提純后,通常要使用透析或者凝膠過濾的方法除去中性鹽。有機溶劑提取法的原理是:與水互溶的有機溶劑(如甲醇、乙醇)能使一些蛋白質在水中的溶解度顯著降低;而且在一定溫度、pH值和離子強度下,引起蛋白質沉淀的有機溶劑的濃度不同,因此,控制有機溶劑的濃度可以分離純化蛋白質。例如,在冰浴中磁力攪拌下,在4℃預冷的培養(yǎng)液中緩慢加入乙醇(25℃),可以使冰核蛋白析出,從而純化冰核蛋白。由于在室溫下,有機溶劑不僅能引起蛋白質的沉淀,而且伴隨著變性。因此,通常要將有機溶劑冷卻,然后在不斷攪拌下加入有機溶劑防止局部濃度過高,蛋白質變性問題就可以很大程度上得到解決。對于一些和脂質結合比較牢固或分子中極性側鏈較多、不溶于水的蛋白質,可以用乙醇、丙酮和丁醇等有機溶劑提取,它們有一定的親水性和較強的親脂性,是理想的提取液。冷乙醇分離法提取免疫球蛋白最早由Co
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