【文章內容簡介】 測試順序中。當一個分析批中未知樣品數(shù)目較多時，應增加各濃度質控樣品數(shù)，使質控樣品數(shù)大于未知樣品總數(shù)的5%。質控樣品測定結果的偏差一般應小于15%，低濃度點偏差一般應小于20%，最多允許1/3的質控樣品結果超過上述限度，但不能出現(xiàn)在同一濃度質控樣品中。如質控樣品測定結果不符合上述要求，則該分析批樣品測試結果作廢。 濃度高于定量上限的樣品，應采用相應的空白介質稀釋后重新測定。對于濃度低于定量下限的樣品，在進行藥代動力學分析時，在達到Cmax以前取樣的樣品應以零值計算，在達到Cmax以后取樣的樣品應以無法定 量（Not detectable, ND）計算，以減小零值對AUC計算的影響。分析方法的有效性應通過實驗證明。在臨床報告中，應提供完成這些實驗工作的相關的詳細資料。建立一般性和特殊性標準操作規(guī)程、保存完整的實驗記錄是分析方法有效性的基本要素。生物分析方法建立中產生的數(shù)據和質控樣品測試結果應全部記錄并妥善保存，并提供足夠的可供評價的方法學建立和樣品分析的數(shù)據。至少應當提供的數(shù)據包括： 方法建立的數(shù)據分析方法的詳細描述；儀器設備、分析條件；該方法所用對照品（被 測藥物、代謝物、內標物）的純度和來源；描述測定特異性、準確度、精密度、回收率、定量限、標準曲線的實驗并給出獲得的主要數(shù)據列表；列出批內批間精密度和準確度的詳細結果；描述穩(wěn)定性考察及相關數(shù)據；根據具體情況提供代表性的色譜圖或質譜圖并加以說明。 樣品分析的數(shù)據樣品處理和保存的情況；分析樣品時標準曲線列表；用于計算結果的回歸方程；各分析批質控樣品測定結果綜合列表并計算批內和批間精密度、準確度；各分析批包括的未知樣品濃度計算結果。提供100%受試者樣品測試的色譜圖復印件，包括相應分析批的標準曲線和質控樣品的色譜圖復印件。注明缺失樣品的原因，重復測試的結果。對舍棄任何分析數(shù)據和選擇所報告的數(shù)據說明理由。 其他相關信息項目編號、分析方法編號、分析方法類型、分析方法確證進行簡化的理由、以及相應的項目計劃編號、標題等。（二）實驗設計與操作1. 交叉設計交叉設計是目前應用最多最廣的方法，因為多數(shù)藥物吸收和清除在個體之間均存在很大變異，個體間的變異系數(shù)遠遠大于個體內變異系數(shù)，因此生物等效性研究一般要求按自身交叉對照的方法設計。把受試對象隨機分為幾組，按一定順序處理，一組受試者先服用受試制劑，后服用參比制劑；另一組受試者先服用參比制劑，后服用受試制劑。兩順序間應有足夠長的間隔時間，為清洗期（Washout Period）。這樣，對每位受試者都連續(xù)接受兩次或更多次的處理，相當于自身對照，可以將制劑因素對藥物吸收的影響與其他因素區(qū)分開來，減少了不同試驗周期和個體間差異對試驗結果的影響。根據試驗制劑數(shù)量不同一般采用22交叉、33交叉等設計。如果是兩種制劑比較，雙處理、雙周期，兩序列的交叉設計是較好的選擇。如試驗包括3個制劑（受試制劑2個和參比制劑1個）時，宜采用3制劑3周期二重33拉丁方試驗設計。各周期間也應有足夠的清洗期。設定清洗期是為了消除兩制劑的互相干擾，避免上個周期內的處理影響到隨后一周期的處理中。清洗期一般不應短于7個消除半衰期。但有些藥物或其活性代謝物半衰期很長時則難以按此方法設計實施，在此情況下可能需要考慮按平行組設計進行，但樣本量可能要增加。 而對于某些高變異性藥物（Highly Variable Drug），根據具體情況，除采用增加例數(shù)的辦法外，可采用重復交叉設計，對同一受試者兩次接受同一制劑時可能存在的個體內差異進行測定。 受試者入選條件：受試者的選擇應當盡量使個體間差異減到最小，以便能檢測出制劑間的差異。試驗方案中應明確入選和剔除條件。一般情況應選擇男性健康受試者。特殊作用的藥品，則應根據具體情況選擇適當受試者。選擇健康女性受試者應避免懷孕的可能性。如待測藥物存在已知的不良反應，可能帶來安全性擔憂，也可考慮選擇患者作為受試者。年齡:一般18～40周歲，同一批受試者年齡不宜相差10歲以上。體重：正常受試者的體重一般不應低于50kg。按體質指數(shù)(Body MassIndex , BMI)＝體重（kg）／身高2（m2）計算，一般應在標準體重范圍內。同一批受試者體重（kg）不宜懸殊過大，因為受試者服用的藥物劑量是相同的。受試者應經過全面體檢，身體健康，無心、肝、腎、消化道、神經系統(tǒng)、精神異常及代謝異常等病史；體格檢查示血壓、心率、心電圖、呼吸狀況、肝、腎功能和血象無異常，避免藥物體內過程受到疾病干擾。根據藥物類別和安全性情況，還應在試驗前、試驗期間、試驗后進行特殊項目檢查，如降糖藥應檢查血糖水平。為避免其他藥物干擾，試驗前兩周內及試驗期間禁服任何其他藥物。實驗期間禁煙、酒及含咖啡因的飲料，或某些可能影響代謝的果汁等，以免干擾藥物體內代謝。受試者應無煙、酒嗜好。如有吸煙史，在討論結果時應考慮可能的影響。 如已知藥物存在遺傳多態(tài)性導致代謝差異，應考慮受試者由于慢代謝可能出現(xiàn)的安全性等問題。 受試者例數(shù)受試者例數(shù)應當符合統(tǒng)計學要求，對于目前的統(tǒng)計方法, 18—24例可滿足大多數(shù)藥物對樣本量的要求，但對某些變異性大的藥物可能需要適當增加例數(shù)。一個臨床試驗的例數(shù)多少是由三個基本因素決定的：（1）顯著性水平：即α值的大小，通常取 或 5%；（2）把握度：即1β值的大小，一般定為不小于 80%，其中β是犯第Ⅱ類錯誤的概率，也就是把實際有效誤判為無效的概率；（3）變異性（CV%）和差別（θ）：兩藥等效性檢驗中檢測指標的變異性和差別越大所需例數(shù)越多。在試驗前并不知道θ和CV%，只能根據已有的參比制劑的上述參數(shù)來估算或進行預試驗。另外，當一個生物利用度試驗完成后，可以根據θ、CV%和把握度等參數(shù)來求N值，并與試驗所選擇例數(shù)進行對比，檢驗試驗所采用例數(shù)是否合適。 受試者分組必須采用隨機方法分組，各組間應具有可比性。(Test Product and Reference Product ,T and R )參比制劑的質量直接影響生物等效性試驗結果的可靠性，參比制劑的選擇應遵循總局仿制藥質量一致性評價工作辦公室發(fā)布的相關指導原則的要求。參比制劑和受試制劑含量差別不能超過5%。對于受試制劑，應為符合現(xiàn)行質量標準的中試/生產規(guī)模的產品。應提供該制劑的體外溶出度、穩(wěn)定性、含量或效價測定、批間一致性報告等，供試驗單位參考。個別藥物尚需提供多晶型及光學異構體的資料。參比制劑和受試制劑均應注明研制單位、批號、規(guī)格、保存條件、有效期。試驗結束后受試制劑和參比制劑應保留足夠長時間直到產品一致性評價以備查。進行藥物制劑生物利用度和生物等效性研究時，給藥劑量一般應與臨床單次用藥劑量一致，不得超過臨床推薦的單次最大劑量或已經證明的安全劑量。受試制劑和參比制劑一般應服用相等劑量，需要使用不相等劑量時，