分子醫(yī)學(xué)及分子醫(yī)學(xué)技術(shù)(編輯修改稿)
2025-06-24 01:30 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 同的基因。 “年齡 1基因 ”（ age 1） 、 “daf2”等受損會延長壽命的基因。人類的 DNA中原來就有負(fù)責(zé)化解活性氧毒性的基因，我們也可以采取活化該基因的辦法，以防止老化。 熱量限制可以延長包括哺乳動物在內(nèi)的許多物種動物的生命周期。限制熱量攝入而延長生命的現(xiàn)象與一種叫作 SIR2基因 有關(guān)。 “我還活著 ”基因 一旦發(fā)生改變，就會使果蠅壽命延長一倍。 人體內(nèi)也存在這種基因，它是通過改變新陳代謝來發(fā)揮作用的。 DNA纏繞成的染色體末端，有稱做 端粒（ telomere） 的區(qū)域?？刂浦?xì)胞的分裂次數(shù)，端粒隨著細(xì)胞分裂每次變短，短到某個程度，細(xì)胞將不再分裂。人的一生中，細(xì)胞大約能分裂 50～ 60次。因此端粒是控制生理壽命的生物鐘，而端粒長短就成為表示細(xì)胞“年齡 ”的指標(biāo)。如果加入一種 “端粒酶 ”阻止它縮短，就可使細(xì)胞保持年輕，人就像吃了 “唐僧肉 ”一樣實現(xiàn)長生不老的夢想。 分子醫(yī)學(xué)與傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)最根本的區(qū)別在于前者可 在基因水平上對疾病進(jìn)行操作 。 對遺傳物質(zhì)的操作可能引發(fā)的后果一開始就是科學(xué)界和公眾關(guān)注的問題 。 早在 70年代初 ，基因重組技術(shù)剛開始出現(xiàn)的時候 ， 以美國著名分子生物學(xué)家伯格 （ Berg） 為首的 11名科學(xué)家共同呼吁禁止開展基因工程的研究 ， 并得到了美國國立衛(wèi)生研究院的贊同 。 分子醫(yī)學(xué)的社會、倫理問題 科學(xué)家們對自己的研究工作可能產(chǎn)生的嚴(yán)重后果公開喚起公眾的注意，這在科學(xué)史上還是第一次，說明科學(xué)家對遺傳物質(zhì)的操作所取的態(tài)度是極其謹(jǐn)慎的。 在那以后，利用基因工程技術(shù)在大腸桿茵中生產(chǎn)預(yù)定的蛋白質(zhì)分子被證明是無害可行的，因而在 80年代以來得到了迅速的發(fā)展，但將基因操作直接應(yīng)用于人類疾病的治療則與一般的基因工程不可同日而語。 分子醫(yī)學(xué)常用技術(shù) 基因獲取 基因檢測 基因重組 基因表達(dá) 基因標(biāo)記 基因探測 基因轉(zhuǎn)移 基因信息 獲取目標(biāo)基因常常是基因操作的首要步驟。常規(guī)方法有 PCR法，基因文庫或 cDNA文庫法以及化學(xué)合成法。 應(yīng)根據(jù)具體的研究目的和實驗條件選用合適的方法。 化學(xué)合成法 較短的基因（ 6080bp） 用途： PCR引物 測序引物 定點突變 核酸雜交探針 基因文庫 限制性內(nèi)切酶 ?? 克隆、轉(zhuǎn)化、培養(yǎng)、鑒定 基因組 DNA 基因文庫 引物 引物 3’ 5’ 5’ 5’ PCR技術(shù) 基因組 引物設(shè)計： （ 1) 序列應(yīng)位于高度保守區(qū)，與非擴增區(qū)無同源序列。 （ 2）引物長度以 1540 bp為宜。 （ 3） 堿基盡可能隨機分布。 （ 4）引物內(nèi)部避免形成二級結(jié)構(gòu)。 （ 5）兩引物間避免有互補序列。 （ 6）引物 3’端為關(guān)鍵堿基； 5’端無嚴(yán)格限制 PCR技術(shù)的基本過程 模板 DNA dNTP 引物 Buffer 預(yù)變性 模板 DNA dNTP 引物 Buffer TaqDNA聚合酶 循環(huán)儀 94oC5? 94℃ 55 ℃ 72 ℃ 加樣孔 電泳圖譜 PCR PTPCR DNA Marker 對一個基因或一段 DNA片段進(jìn)行檢測鑒定是分子醫(yī)學(xué)技術(shù)中最常用到的手段 。 包括 電泳檢測 、 序列分析 、 分光光度分析 等方法 。 DNA分子的電泳檢測 電泳條帶 加樣孔 凝膠濃度與 DNA片段大小 電壓、電流與分辨率 電泳緩沖液、上樣緩沖液 電泳的時間與環(huán)境溫度 凝膠板的制備 法國 VL凝膠成像系統(tǒng) 核酸定量和純度分析 共軛雙鍵：對 260nm波長紫外光有較強吸收 。 消光系數(shù) 波長 220 240 260 280 300 BECKMAN DU 800 核酸蛋白檢測儀 DNA序列檢測 基因重組技術(shù)作為分子醫(yī)學(xué)中最重要 、最基本的技術(shù)之一 ， 是許多分子醫(yī)學(xué)實驗實施的基礎(chǔ) ， 在基因診斷 、 治療和預(yù)防中具有舉足輕重的意義 。 現(xiàn)代基因工程的創(chuàng)始人 P伯格 （美國 ,1926－）在 1960年以敏銳的科學(xué)預(yù)見力提出一個大膽的設(shè)想：是否可以創(chuàng)造出一種人工方法，把外界的遺傳基因引入動物體內(nèi)，以達(dá)到改變遺傳性狀和治療某些疾病的需要呢？ 197
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