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正文內(nèi)容

分子醫(yī)學(xué)及分子醫(yī)學(xué)技術(shù)(編輯修改稿)

2025-06-24 01:30 本頁(yè)面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 同的基因。 “年齡 1基因 ”( age 1) 、 “daf2”等受損會(huì)延長(zhǎng)壽命的基因。人類(lèi)的 DNA中原來(lái)就有負(fù)責(zé)化解活性氧毒性的基因,我們也可以采取活化該基因的辦法,以防止老化。 熱量限制可以延長(zhǎng)包括哺乳動(dòng)物在內(nèi)的許多物種動(dòng)物的生命周期。限制熱量攝入而延長(zhǎng)生命的現(xiàn)象與一種叫作 SIR2基因 有關(guān)。 “我還活著 ”基因 一旦發(fā)生改變,就會(huì)使果蠅壽命延長(zhǎng)一倍。 人體內(nèi)也存在這種基因,它是通過(guò)改變新陳代謝來(lái)發(fā)揮作用的。 DNA纏繞成的染色體末端,有稱(chēng)做 端粒( telomere) 的區(qū)域??刂浦?xì)胞的分裂次數(shù),端粒隨著細(xì)胞分裂每次變短,短到某個(gè)程度,細(xì)胞將不再分裂。人的一生中,細(xì)胞大約能分裂 50~ 60次。因此端粒是控制生理壽命的生物鐘,而端粒長(zhǎng)短就成為表示細(xì)胞“年齡 ”的指標(biāo)。如果加入一種 “端粒酶 ”阻止它縮短,就可使細(xì)胞保持年輕,人就像吃了 “唐僧肉 ”一樣實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)生不老的夢(mèng)想。 分子醫(yī)學(xué)與傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)最根本的區(qū)別在于前者可 在基因水平上對(duì)疾病進(jìn)行操作 。 對(duì)遺傳物質(zhì)的操作可能引發(fā)的后果一開(kāi)始就是科學(xué)界和公眾關(guān)注的問(wèn)題 。 早在 70年代初 ,基因重組技術(shù)剛開(kāi)始出現(xiàn)的時(shí)候 , 以美國(guó)著名分子生物學(xué)家伯格 ( Berg) 為首的 11名科學(xué)家共同呼吁禁止開(kāi)展基因工程的研究 , 并得到了美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院的贊同 。 分子醫(yī)學(xué)的社會(huì)、倫理問(wèn)題 科學(xué)家們對(duì)自己的研究工作可能產(chǎn)生的嚴(yán)重后果公開(kāi)喚起公眾的注意,這在科學(xué)史上還是第一次,說(shuō)明科學(xué)家對(duì)遺傳物質(zhì)的操作所取的態(tài)度是極其謹(jǐn)慎的。 在那以后,利用基因工程技術(shù)在大腸桿茵中生產(chǎn)預(yù)定的蛋白質(zhì)分子被證明是無(wú)害可行的,因而在 80年代以來(lái)得到了迅速的發(fā)展,但將基因操作直接應(yīng)用于人類(lèi)疾病的治療則與一般的基因工程不可同日而語(yǔ)。 分子醫(yī)學(xué)常用技術(shù) 基因獲取 基因檢測(cè) 基因重組 基因表達(dá) 基因標(biāo)記 基因探測(cè) 基因轉(zhuǎn)移 基因信息 獲取目標(biāo)基因常常是基因操作的首要步驟。常規(guī)方法有 PCR法,基因文庫(kù)或 cDNA文庫(kù)法以及化學(xué)合成法。 應(yīng)根據(jù)具體的研究目的和實(shí)驗(yàn)條件選用合適的方法。 化學(xué)合成法 較短的基因( 6080bp) 用途: PCR引物 測(cè)序引物 定點(diǎn)突變 核酸雜交探針 基因文庫(kù) 限制性?xún)?nèi)切酶 ?? 克隆、轉(zhuǎn)化、培養(yǎng)、鑒定 基因組 DNA 基因文庫(kù) 引物 引物 3’ 5’ 5’ 5’ PCR技術(shù) 基因組 引物設(shè)計(jì): ( 1) 序列應(yīng)位于高度保守區(qū),與非擴(kuò)增區(qū)無(wú)同源序列。 ( 2)引物長(zhǎng)度以 1540 bp為宜。 ( 3) 堿基盡可能隨機(jī)分布。 ( 4)引物內(nèi)部避免形成二級(jí)結(jié)構(gòu)。 ( 5)兩引物間避免有互補(bǔ)序列。 ( 6)引物 3’端為關(guān)鍵堿基; 5’端無(wú)嚴(yán)格限制 PCR技術(shù)的基本過(guò)程 模板 DNA dNTP 引物 Buffer 預(yù)變性 模板 DNA dNTP 引物 Buffer TaqDNA聚合酶 循環(huán)儀 94oC5? 94℃ 55 ℃ 72 ℃ 加樣孔 電泳圖譜 PCR PTPCR DNA Marker 對(duì)一個(gè)基因或一段 DNA片段進(jìn)行檢測(cè)鑒定是分子醫(yī)學(xué)技術(shù)中最常用到的手段 。 包括 電泳檢測(cè) 、 序列分析 、 分光光度分析 等方法 。 DNA分子的電泳檢測(cè) 電泳條帶 加樣孔 凝膠濃度與 DNA片段大小 電壓、電流與分辨率 電泳緩沖液、上樣緩沖液 電泳的時(shí)間與環(huán)境溫度 凝膠板的制備 法國(guó) VL凝膠成像系統(tǒng) 核酸定量和純度分析 共軛雙鍵:對(duì) 260nm波長(zhǎng)紫外光有較強(qiáng)吸收 。 消光系數(shù) 波長(zhǎng) 220 240 260 280 300 BECKMAN DU 800 核酸蛋白檢測(cè)儀 DNA序列檢測(cè) 基因重組技術(shù)作為分子醫(yī)學(xué)中最重要 、最基本的技術(shù)之一 , 是許多分子醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)施的基礎(chǔ) , 在基因診斷 、 治療和預(yù)防中具有舉足輕重的意義 。 現(xiàn)代基因工程的創(chuàng)始人 P伯格 (美國(guó) ,1926-)在 1960年以敏銳的科學(xué)預(yù)見(jiàn)力提出一個(gè)大膽的設(shè)想:是否可以創(chuàng)造出一種人工方法,把外界的遺傳基因引入動(dòng)物體內(nèi),以達(dá)到改變遺傳性狀和治療某些疾病的需要呢? 197
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