研究生分子醫(yī)學(xué)實驗技能實驗三(編輯修改稿)
2024-11-12 19:53 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 的攝取能力很低 ， 難以轉(zhuǎn)化成功 。 當細菌處于冰冷 （ 0℃ ） ~ CaCl2低滲溶液中 ，菌體的細胞膨脹成球形 ， 細胞膜的通透性增加 ， 對 DNA的攝取能力增強 ， 轉(zhuǎn)化效率提高 （ 感受態(tài)細菌 ） 。 同時在轉(zhuǎn)化體系中的 DNA形成的抗 DNase的羥基－鈣磷酸復(fù)合物能粘附于細菌表面 ， 經(jīng)過 42℃ 短時間熱休克 （ heat shock） 處理 ， 促進感受態(tài)細胞吸收 DNA復(fù)合物 。 在豐富培養(yǎng)基上生長 1小時后 ， 球狀細胞復(fù)原并分裂增殖 ， 重組子中的基因在轉(zhuǎn)化細菌中得到表達 ， 在 選 擇 性 培 養(yǎng) (selective culture)平板上即可篩選出所需的轉(zhuǎn)化子 。 0℃ 重組體 感受態(tài)細胞 轉(zhuǎn)化與感受態(tài)細胞 轉(zhuǎn)化 (transform)：在分子克隆技術(shù)中，轉(zhuǎn)化特指質(zhì)粒 DNA或以它為載體構(gòu)建的重組子導(dǎo)入細菌的過程。 區(qū)別轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)染 (transfection)與轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction) 重組 DNA分子導(dǎo)入受體細胞的手段 將含有真核生物基因的質(zhì)粒導(dǎo)入細菌內(nèi)進行表達稱為 轉(zhuǎn)化 。 轉(zhuǎn)染 (transfection)指真核細胞由于外源 DNA摻入而獲得新的
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