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分子醫(yī)學(xué)及分子醫(yī)學(xué)技術(shù)-預(yù)覽頁

2025-06-21 01:30 上一頁面

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【正文】 疾病的基因治療 一個(gè)外科庸醫(yī)正在從一個(gè)癡呆的精神病患者頭上取出“愚人之石”,該畫是 16世紀(jì)博希所畫,以諷刺那個(gè)時(shí)代人們的無知。安德森等人對腺甘脫氨酶缺乏癥( ADA缺乏癥)的基因治療,是世界上第一個(gè)基因治療成功的范例。在以后的 10個(gè)月內(nèi)她又接受了 7次這樣的治療,同時(shí)也接受酶治療。這種具有疫苗作用的裸露 DNA稱之為 “基因疫苗 ”( gene vaccine)。因而,可以看到其實(shí)際應(yīng)用已指日可待了。 “時(shí)鐘基因 ”: 破壞 “時(shí)鐘 1基因 ”( clock 1 gene)可使線蟲的壽命延長 。 熱量限制可以延長包括哺乳動物在內(nèi)的許多物種動物的生命周期。 DNA纏繞成的染色體末端,有稱做 端粒( telomere) 的區(qū)域。如果加入一種 “端粒酶 ”阻止它縮短,就可使細(xì)胞保持年輕,人就像吃了 “唐僧肉 ”一樣實(shí)現(xiàn)長生不老的夢想。 分子醫(yī)學(xué)的社會、倫理問題 科學(xué)家們對自己的研究工作可能產(chǎn)生的嚴(yán)重后果公開喚起公眾的注意,這在科學(xué)史上還是第一次,說明科學(xué)家對遺傳物質(zhì)的操作所取的態(tài)度是極其謹(jǐn)慎的。 應(yīng)根據(jù)具體的研究目的和實(shí)驗(yàn)條件選用合適的方法。 ( 4)引物內(nèi)部避免形成二級結(jié)構(gòu)。 DNA分子的電泳檢測 電泳條帶 加樣孔 凝膠濃度與 DNA片段大小 電壓、電流與分辨率 電泳緩沖液、上樣緩沖液 電泳的時(shí)間與環(huán)境溫度 凝膠板的制備 法國 VL凝膠成像系統(tǒng) 核酸定量和純度分析 共軛雙鍵:對 260nm波長紫外光有較強(qiáng)吸收 。伯格因此獲得了 1980年諾貝爾化學(xué)獎 。博耶 將兩個(gè)不同的質(zhì)粒(一個(gè)是抗四環(huán)素質(zhì)粒,另一個(gè)是抗鏈霉素質(zhì)粒)拼接在一起,組成嵌合質(zhì)粒,并將其導(dǎo)入大腸桿菌,當(dāng)該重組質(zhì)粒進(jìn)入大腸桿菌體內(nèi)后,這些大腸桿菌能抵抗兩種藥物,而且這種大腸桿菌的后代都具有雙重抗藥性。 1977年,吉爾伯特( W可以毫不夸張地說,基因工程對生物、醫(yī)藥和農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域都產(chǎn)生了革命性的影響,它對人們生活影響的深度和廣度早已超出了人們的想象。 從藍(lán)色三葉草中提取制造藍(lán)色色素的基因,然后注入到玫瑰中, 并成功地讓翠雀花素單獨(dú)顯色。 2 目的基因 高效表達(dá) 三個(gè)因素: 強(qiáng)化蛋白質(zhì)的生物合成 抑制蛋白質(zhì)的降解 恢復(fù)蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象 3目的基因表達(dá)產(chǎn)物的檢測 1)蛋白質(zhì)的 PAGE 對照 樣品 Marker 2)表達(dá)蛋白生物學(xué)功能檢測 淀粉酶基因表達(dá) 4目的蛋白的分離純化 分子篩 親和柱 離子交換 抗原抗體 目的蛋白 安瑪西亞快速蛋白純化儀( FPLC) 核酸標(biāo)記: 同位素標(biāo)記 非同位素標(biāo)記 核酸探針: 探針 是一段人工合成的堿基序列,連接上一些可檢測的物質(zhì),根據(jù)堿基互補(bǔ)的原理,利用探針到基因混合物中識別特定基因 核酸雜交: 探測基因所依據(jù)的最基本的理論就是核酸堿基互補(bǔ)原則 ,最常用的方法就是核酸分子雜交,它應(yīng)用一段與目標(biāo)基因堿基互補(bǔ)的核酸作為探針去探測待測樣品 DNA聚合酶 Ⅰ ?32PdNTP DNA 缺口平移 5’CCCCAAOHCCCAACCCCAACCCCAAOHCCCAA3’ 3’GGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTT5’ DNA聚合酶 Ⅰ 5? 3?聚合酶 5? 3?外切酶 5? 5? 5’CCCCAACCC…… 3’GTTGGG…… 末端標(biāo)記物 ?32PdNTP 5’CCCCAACCC…… 3’GGGGTTGGG…… 基因芯片( Genechip) 基因芯片又稱 DNA芯片或 DNA微陣列。 應(yīng)用基因微矩陣芯片研究宮頸癌相關(guān)基因表達(dá) DNA微點(diǎn)陣已廣泛和流行的用于疾病診斷、基因組比較、以及新型癌癥的分類。英國 PPT公司培育了植入人體基因的克隆羊,羊奶中含有能夠治療囊性纖維變性的人體蛋白。 如果能將克隆技術(shù)和轉(zhuǎn)基因技術(shù)結(jié)合起來的話,也許可以在短時(shí)間內(nèi)就得到許多一模一樣的擁有優(yōu)良性狀的轉(zhuǎn)基因動物。解碼結(jié)果包含數(shù)百頁和成千上萬行 4種字母的序列。這個(gè)定義包含兩層意思,即對海量數(shù)據(jù)的收集、整理以及對這些數(shù)據(jù)的應(yīng)用。 由此可以想見,讀取這部巨著所要耗費(fèi)的時(shí)間將是如何的驚人。 美國生物化學(xué)家穆利斯、1993年因創(chuàng)建PCR技術(shù)獲諾貝爾化學(xué)獎。DNA是螺旋狀的,生命科學(xué)的探索之路也是螺旋的
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