分子發(fā)光分析法ppt課件(編輯修改稿)
2025-06-02 08:13 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 促進(jìn)了熒光體中的電子自旋 軌道的偶合作用 ， 系間竄越 S1— T1概率大 ） 。 環(huán)境因素對熒光的影響 （ 1） 溶劑的極性 ：電子激發(fā)態(tài)比基態(tài)的極性大 ， 溶劑的極性增強(qiáng) ， 對激發(fā)態(tài)會(huì)產(chǎn)生更大穩(wěn)定作用 ， 使 熒光強(qiáng)度增大 ， 熒光波長紅移 。 溶劑 相對介電常數(shù) 熒光峰 l/nm 熒光效率 乙腈 410 丙酮 405 氯仿 398 四氯化碳 390 巰基喹啉在不同溶劑中的熒光峰和熒光效率 （ 2） 溫度 ： 溫度升高 ， 輻射躍遷的速率常數(shù) Kf基本不變 ， 但非輻射躍遷的速率常數(shù)增大 ， 故 熒光效率降低 。對磷光影響更大 。 （ 3） pH值 ：含酸性或堿性取代基的化合物熒光性質(zhì)受 pH的影響 。 如： N H 2 N H 3++ H+p H = 4 . 8 ~ 3 . 4無熒光 藍(lán)色熒光 再如： 無熒光 藍(lán)色熒光 O 3 SOO 3 SO Hp H = 6 . 4 7 . 4 H+（ 4） 表面活性劑 ：使熒光物質(zhì)處于更有序的膠束微環(huán)境中 ， 對處于激發(fā)單重態(tài)的熒光物質(zhì)分子起保護(hù)作用 ，減小非輻射躍遷幾率 ， 提高熒光效率 。 （ 5） O2的存在 ： O2為順磁性分子 ， 溶液中溶解氧的存在 ， 使激發(fā)單重態(tài)分子向三重態(tài)的系間竄躍速率加大 ， 導(dǎo)致 熒光效率降低 ， 甚至熄滅 。 其它順磁性物質(zhì)也有這種作用 。 磷光強(qiáng)度影響因素 1）隨著溫度的降低分子熱運(yùn)動(dòng)速錄減慢，磷光逐漸增強(qiáng) 2）重原子效應(yīng)可以提高磷光物質(zhì)的磷光強(qiáng)度 3）室溫磷光 當(dāng)向溶液中加入適當(dāng)?shù)谋砻婊钚詣r(shí)，由于形成了表面活性劑膠束，改變了磷光物質(zhì)的微環(huán)境，增強(qiáng)了定向約束力，從而減少了磷光分子與溶劑分子的碰撞概率，增加了三重態(tài)的穩(wěn)定性，導(dǎo)致磷光強(qiáng)度顯著增大，稱此為 膠束增穩(wěn)室溫磷光 。 當(dāng)磷光物質(zhì)吸附于某些固體表面時(shí)，分子的剛性增加，三重態(tài)的碰撞去活化概率大大減小，也可在室溫下產(chǎn)生較強(qiáng)的磷光，由此又產(chǎn)生了 固體表面室溫磷光分析法 。 第一節(jié) 熒光與磷光的基本原理 三、熒光（磷光）強(qiáng)度與溶液濃度的關(guān)系 0t eT,bCIIlgTlgA ?? ???????0t e1T1II1 ??????相應(yīng)的吸光分?jǐn)?shù)為： )e1(III bCε3 0 ????熒光強(qiáng)度（ IF）與相應(yīng)的吸光分?jǐn)?shù)成正比： )1()( 30320f0f eIIII ????? ??按照級(jí)數(shù)展開式： !nx!4x!3x!2x!1x1e n432x ??????????第一節(jié) 熒光與磷光的基本原理 三、熒光（磷光）強(qiáng)度與溶液濃度的關(guān)系 )!4 )(!3 )(!2 )((4320f ?????????????? bCεbCεbCεbCεIIF ?對于 稀溶液 ，當(dāng) ? bc（磷光 ? bc）時(shí)： 0FF ??IF熒光強(qiáng)度 ?F熒光效率 k與儀器靈敏度有關(guān)的參數(shù) I0入射光強(qiáng)度 0PP ??IP磷光強(qiáng)度 ?P磷光 效率 b吸收光程 ?摩爾吸光系數(shù) C熒光物質(zhì)濃度 CKI F ? KCI P ?熒光定量分析依據(jù) 磷光定量分析依據(jù) 第一節(jié) 熒光與磷光的基本原理 三、熒光（磷光）強(qiáng)度與溶液濃度的關(guān)系 注：高濃度時(shí) ， If ＝ KC不成立 If C 原因： （ 1）高次項(xiàng) （ 2）猝滅效應(yīng) 熒光猝滅 ： 熒光分子與溶劑分子或其 它 溶質(zhì)分子相互作用引起熒光強(qiáng)度降低或 消失的現(xiàn)象。 熒光 猝 滅劑 ： 這些溶劑分子或其它溶質(zhì) 分子稱為熒光猝滅劑 。 前面提到的氧分 子及重原子效應(yīng)都是常見的熒光猝滅劑。 熒光自猝滅效應(yīng) ： 由熒光物質(zhì)自身引發(fā)的 熒光強(qiáng)度減弱的現(xiàn)象叫熒光自猝滅效應(yīng) 常見的自猝滅現(xiàn)象有兩種：一是當(dāng)熒光物質(zhì)發(fā)出的熒光通過溶液時(shí)被熒光物質(zhì)的基態(tài)分子所吸收，即 自吸收現(xiàn)象 。另一種是由于激發(fā)態(tài)分子之間的碰撞 ，導(dǎo)致費(fèi)輻射躍遷概率的增大，熒光效率降低。 第一節(jié) 熒光與磷光的基本原理 四、激發(fā)光譜與熒光（磷光）光譜 熒光和磷光均為光致發(fā)光，因此必須選擇合適的激發(fā)光波長，可根據(jù)它們的激發(fā)光譜曲線來確定。 繪制激發(fā)光譜曲線時(shí)，固定測量波長為熒光（或磷光）最大發(fā)射波長，然后改變激發(fā)波長，根據(jù)所測得的熒光（磷光）強(qiáng)度與激發(fā)光波長的關(guān)系，即可繪制 激發(fā)光譜曲線 。 如果 固定激發(fā)光波長為其最大激發(fā)波長，然后測定所發(fā)射的不同的波長的熒光或磷光強(qiáng)度，即可
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