【文章內(nèi)容簡介】 ealth food 1 范圍本方法規(guī)定了保健食品中肌醇含量的測定方法。本方法適用于肌醇作為功效成分添加于片劑、膠囊、飲料等試樣類型中含量的測定。本方法的最低檢出量為2mg/kg?！?0mg/mL。2 原理 將固體試樣提取液或液體試樣稀釋液濃縮至干，經(jīng)硅烷化處理，以正己烷提取，氣相色譜氫火焰檢測器定性定量檢測。3 試劑 無水乙醇 分析純。 正己烷 分析純。 無水硫酸鈉 分析純。 三甲基氯硅烷 分析純。 六甲基二硅氨烷 分析純。 二甲基甲酰胺 分析純。 肌醇標(biāo)準(zhǔn)溶液將肌醇標(biāo)準(zhǔn)品（純度99%）在100177。5℃干燥4h，溶于乙醇溶液（3→10）。 硅烷化試劑 將三甲基氯硅烷、六甲基二硅氨烷、二甲基甲酰胺以1：2：8的體積比混合制成，臨用時(shí)現(xiàn)配。4 儀器和設(shè)備 氣相色譜儀 ：附氫火焰檢測器（FID） 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。 超聲波清洗器。5 分析步驟 試樣預(yù)處理 取20粒片劑或膠囊試樣研磨或混勻，稱取一定量（）于試管中，加入乙醇溶液（3→10）,，超聲提取10min, / min下離心5min,上清液待用。液體試樣如濃度過高可用乙醇溶液（3→10）。 ，加入5mL無水乙醇，于60℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮至剩有少量液體，之后再每次加入5mL無水乙醇直至濃縮瓶中液體完全除去。 ，使用超聲波振超至瓶中內(nèi)容物完全分散。在70℃水浴中加熱10min。冷卻后加入10mL水， ，混搖后放置10min， / min下離心5min，取出正己烷層，加入少量無水硫酸鈉，輕輕混搖后放置，取上清液進(jìn)樣。 ，可得肌醇標(biāo)準(zhǔn)衍生溶液。 氣相色譜參考條件 檢測器: FID 色譜柱 BP5 25m 氣體流速 載氣（N2） 50mL/min 尾吹氣（N2） 50mL/min 氫氣 40mL/min 空氣 500mL/min 分流比 1：50 柱溫：190℃ 進(jìn)樣口溫度：245℃ 衰減：4 紙速：2 色譜分析：量取1μL標(biāo)準(zhǔn)及試樣衍生液注入色譜儀中，以保留時(shí)間定性，以試樣峰高或峰面積與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。 色譜圖 在上述色譜條件下。 標(biāo)準(zhǔn)色譜圖 試樣色譜圖 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 、、在給定的儀器條件下進(jìn)行氣相色譜分析，以峰面積對濃度作校正曲線。 分析結(jié)果表示 計(jì)算公式 h1 C V 100 X = ────────── h2m式中： X－試樣中肌醇的含量，mg/100g（mL）； h1－試樣峰高或峰面積； C －標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，mg/mL； V－試樣定容體積，mL； h2－標(biāo)準(zhǔn)溶液峰高或峰面積； m－試樣量，g或mL。 結(jié)果表示 檢測結(jié)果保留三位有效數(shù)字。6 技術(shù)參數(shù)準(zhǔn)確度 %～%之間允許差 平行樣測定相對誤差163。177。10%。8. 保健食品中肉堿的測定Determination of carnite in health food 1．范圍本方法規(guī)定了片劑、膠囊保健食品中肉堿的測定方法。本方法適用于以肉堿為主要原料的片劑、膠囊中肉堿的測定。本方法最佳線性范圍：—。2. 原理 ，反相色譜分離，與標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間比較定性，以峰面積外標(biāo)法定量。3. 試劑除特殊說明，所用試劑均為分析純。實(shí)驗(yàn)用水為去離子水或同等純度的蒸餾水。3．1 磷酸氫二鉀3．2 辛烷磺酸鈉3．3 3．4 肉堿標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取干燥至恒重的肉堿標(biāo)準(zhǔn)品(含量98%)。4. 儀器4．1 HPLC系統(tǒng)，配有紫外檢測器和色譜工作站；4．2 超聲波提取器；4．3 。5. 分析步驟5．1 試樣預(yù)處理：（含肉堿約40毫克）；，于50mL容量瓶中，超聲提取10min，混勻，過濾，棄初濾液數(shù)毫升，收集濾液，為試樣處理液。供HPLC分析。5．2 試樣分析5．2．1 色譜條件：Shim—pakCLC ODS 柱；200mm,10um；5．2．2 流動(dòng)相：() 磷酸氫二鉀溶液。 10%乙腈；。5．2．3 流速：；5．2．4 檢測器：紫外檢測器；檢測波長： 210nm；5．3 標(biāo)準(zhǔn)曲線：,,（）于5mL比色管中；，分別進(jìn)樣20uL進(jìn)行色譜分析。用標(biāo)準(zhǔn)濃度—峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。5．4 試樣測定：取20uL試樣處理液（）注入色譜儀中，以保留時(shí)間定性，面積定量。5. 5 色譜圖 5. 6分析結(jié)果表述5．6．1 計(jì)算 CV X= m式中： X— 為試樣中肉堿的含量，mg/g；m—為試樣質(zhì)量，g；C—為試樣處理液中肉堿的濃度，mg/mL； V—為試樣處理液體積，mL。 結(jié)果表示結(jié)果保留三位有效數(shù)字。 6 . 技術(shù)參數(shù)%。回收率：~%9. 保健食品中α亞麻酸、γ亞麻酸的測定Determination of α、βlinolenic acids in health food 1. 范圍 本方法規(guī)定了保健食品中α及γ亞麻酸的測定方法。本方法適用于油脂保健食品中α及γ亞麻酸含量的測定。本標(biāo)準(zhǔn)還適用于油脂保健食品中C16～C22不飽和脂肪酸含量的測定。本方法最低檢出量：、。本方法最佳線性范圍：0～2. 原理 將油脂試樣（或試樣提取的脂肪），經(jīng)氫氧化鉀皂化，在三氟化硼存在下甲醇酯化，然后用氣相色譜儀分析，采用外標(biāo)法定量。3. 試劑 所用試劑除注明外均為分析純 正己烷：℃。 氫氧化鉀甲醇溶液：C(KOH)。稱取28g KOH容于1000mL純水。 三氟化硼甲醇溶液（1＋4）：取40%三氟化硼乙醚溶液1份，加甲醇4份，混勻即可。 α亞麻酸甲酯 % γ亞麻酸甲酯 % 標(biāo)準(zhǔn)儲備液 ，分別用正己烷溶解，并定容于25mL容量瓶中，混均。 標(biāo)準(zhǔn)使用液 ，混均。4. 儀器與設(shè)備 氣相色譜儀，附氫火焰（FID）檢測器。 數(shù)據(jù)處理機(jī)，或積分儀。 分析天平：1/10000。 分析天平：1/1000。 加熱式磁力攪拌器。 標(biāo)準(zhǔn)磨口燒瓶(50mL)和直形冷凝管。5. 分析步驟 試樣制備 脂肪的提取 按GB/T 。 皂化（或脂肪）和磁力攪拌子一并放入50mL磨口燒瓶中（見圖1），上部連接回流冷凝管，并固定于磁力攪拌器上，由冷凝管上口向溶液中導(dǎo)入氮?dú)猓皇狗磻?yīng)瓶中始終充滿氮?dú)?。開啟磁力攪拌器，并加熱使反應(yīng)液保持65177。5℃，攪拌回流約15min。 甲脂化從冷凝管上部加入4mL三氟化硼甲醇溶液，攪拌(65177。5℃)，回流約2min，冷至室溫，從冷凝管上部加入5mL正己烷繼續(xù)攪拌5min，移去冷凝管，加入5mL飽和氯化鈉水溶液，搖動(dòng)數(shù)分鐘，轉(zhuǎn)移至25mL分液漏斗中分離水與有機(jī)相，再加3mL正己烷洗水相，分離，棄水相，合并有機(jī)相并定容至10mL()。供測定用。 氣相色譜參考條件 色譜柱：FFAP（改性聚乙二醇20M，30m . ）。 柱箱溫度：215℃。 進(jìn)樣口溫度：250℃ 。 檢測器溫度：260℃。 氮?dú)猓?0mL/min，30∶1分流；氫氣：45mL/min；空氣：500mL/min。 定性分析 在上述儀器條件下，注入氣相色譜儀，以保留時(shí)間來確定α及γ亞麻酸甲酯。 定量分析試樣中α或γ亞麻酸甲酯色譜峰面積或峰高與標(biāo)準(zhǔn)的比較定量。6. 分析結(jié)果試樣中α或γ亞麻酸測定結(jié)果按（1）式計(jì)算 計(jì)算 （1）式中：χ――α或γ亞麻酸含量，%； A1――試樣中α或γ亞麻酸甲酯色譜峰面積或峰高；A2――標(biāo)準(zhǔn)使用液色譜峰面積或峰高；ρ ――標(biāo)準(zhǔn)使用液濃度, mg/mL；ν――正己烷定容體積, mL；m――試樣質(zhì)量, g；0. 952――亞麻酸換算系數(shù)。 脂肪試樣再換算原保健食品試樣中γ亞麻酸和α亞麻酸的量。 結(jié)果表述 計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。7. 技術(shù)參數(shù)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差：10%.?；厥章剩?～%8. 色譜參考圖 圖1 標(biāo)準(zhǔn)色譜圖 圖2 試樣色譜圖 氣相色譜參考條件 色譜柱：FFAP（改性聚乙二醇20M，30m . ）。柱箱溫度：215℃。進(jìn)樣口溫度：250℃ 。檢測器溫度：260℃。氮?dú)猓?0mL/min，30∶1分流；氫氣：45mL/min；空氣：500mL/min。Determination of immunoglobulin content in health food━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━1 適用范圍本方法規(guī)定了初乳粉中免疫球蛋白IgG的測定。本方法適用于初乳粉中免疫球蛋白IgG的測定。本方法最小檢出量：。本方法最小檢出濃度：，稀釋至25mL，進(jìn)樣量20μL時(shí)。本方法最佳線性范圍：~。2 方法原理根據(jù)高效親和色譜的原理，在磷酸鹽緩沖液條件下免疫球蛋白IgG與配基連接。3 試劑 A液 B液 IgG標(biāo)準(zhǔn)貯備液：稱取IgG標(biāo)準(zhǔn)品（Sigma化學(xué)公司）, ,搖勻。 IgG標(biāo)準(zhǔn)系列溶液：以IgG標(biāo)準(zhǔn)貯備液， , , , , 。臨用時(shí)配制。4 儀器和設(shè)備HPLC儀具紫外檢測器和梯度洗脫裝置。5 分析步驟 試樣處理：（）試樣，,搖勻。 先用5倍柱體積的重蒸水洗柱，再用10倍柱體積的A液平衡柱，進(jìn)樣，按洗脫程序進(jìn)行洗脫。 HPLC參考條件 色譜柱：Pharmacia HITrap Protein G柱，1mL。 波長：280nm 移動(dòng)相： A液B液 進(jìn)行梯度洗脫，見下表。梯度洗脫表：TimeFlow mL/minA%B%Gradient01000※10006010060100610006100066 分析結(jié)果表示 計(jì)算 式中 x：試樣中IgG的含量，g/100g； m：試樣的質(zhì)量，g； C：被測液中IgG的含量，mg/mL；V：試樣定容的體積，mL。 結(jié)果表示：計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。7 技術(shù)參數(shù)允許差:≤5%回收率:~%8 色譜圖 IgG峰IgG峰 Determination of watersoluble crude polysaccharide in health food 1. 范圍本方法規(guī)定了保健食品中以葡聚糖為主要結(jié)構(gòu)分子量在10000以上的水溶性粗多糖的測定方法。本方法適用于保健食品中以葡聚糖為主要結(jié)構(gòu)分子量在10000以上的水溶性粗多糖的測定。本方法最低檢出濃度：。本方法最佳線性范圍：—200ug/mL。2. 原理食品中分子量10000的高分子物質(zhì)在80%乙醇溶液中沉淀，與水溶液中單和低聚糖分離，用堿性二價(jià)銅試劑選擇性的從其它高分子物質(zhì)中沉淀具有葡聚糖結(jié)構(gòu)的水溶性多糖 ，用苯酚硫酸反應(yīng)以碳水化合物形式比色測定其含量，其顏色強(qiáng)度與水溶性粗多糖中葡聚糖的含量成正比，以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)參照物并以此計(jì)算食品中水溶性粗多糖含量。3．試劑本方法所用試劑除特殊注明外，均為分析純；所用水為去離子水或同等純度蒸餾水。(80%):20mL水中加入無水乙醇80mL,混勻。(100g/L):稱取100g氫氧化鈉,加水溶解并稀釋至1L,加入固體無水硫酸鈉至飽和,備用。:,加水溶解并稀釋至1L, 混勻備用。：取銅儲備液50mL，加水50mL。臨用新配。：取水50mL，加入10mL銅試劑溶液，10mL氫氧化鈉溶液，混勻，臨用新配。（10%）：取100mL濃硫酸加入到800mL左右水中，混勻，冷卻后稀釋至1L。 （50g/L）：，加水溶解并稀釋至100mL，混勻。溶液置冰箱中可保存一月。:,加溶解,并定容至50mL,混勻,置冰箱中保存。:,置于100mL容量瓶中,加水至刻度,混勻,置冰 箱中保存。4．儀器5. 分析步驟: