【文章內(nèi)容簡介】 這種由雜交瘤細胞的單一克隆所產(chǎn)生的抗體即是單克隆抗體。二、 體外診斷試劑的分類： 臨床血液、體液檢驗類試劑： 臨床化學類試劑 臨床免疫學試劑 微生物學試劑 其他試劑：包括細胞組織學、遺傳性疾病、人類基因檢測、腫瘤標記物、免疫組化與變態(tài)反應原類及生物芯片等備注：*（盒）*（HBsAg）試劑（盒）*（HCV）抗體試劑（盒）*（1＋2型）抗體試劑（盒） 人類免疫缺陷病毒抗原/抗體診斷試劑（盒）*（盒）放免試劑(盒)：（參見意見稿）以上五個品種和放免試劑，預期用途為血源篩查使用，按藥品受理和審評。三、 常見的臨床檢測方法：常見臨床檢測方法包括化學發(fā)光和熒光免疫、放射免疫、電化學、電泳、色譜和質譜、血氣分析、流式分析、染色技術、以及聚合酶鏈免疫（PCR）、基因分析等。以下主要介紹現(xiàn)在臨床常用的生化、免疫試劑使用的幾種檢測方法。（一）光譜分析技術：是基于物質與輻射能作用時，測量由物質內(nèi)部發(fā)生量子化的能級之間的躍遷而產(chǎn)生的發(fā)射、吸收或散射輻射的波長和強度進行分析的方法。其按作用對象不同可分為原子光譜法（測量微量元素）和分子光譜法（分光光度計），按獲得方式不同分為吸收光譜法和發(fā)射光譜法。吸收光譜技術：吸光光度法是根據(jù)溶液中物質對光選擇性吸收而進行分析的方法。實踐證明，無論物質有無顏色，當一定波長的光通過該物質的溶液時，根據(jù)物質對光的吸收程度（吸光度），求出該物質的含量，這種方法稱為吸光光度法。吸光光度法可分為比色法和分光光度法兩大類。比色法又可分為目視比色法和光電比色法。分光光度法與光電比色法的原理類似，都是通過光電池或光電管測量溶液透光度的強度進行分析的方法。兩者主要的區(qū)別在于獲得單色光的方式不同。光電比色法使用濾光片所獲得的是一般光譜帶，分光光度法使用棱鏡或光柵得到波長范圍較窄的單色光，根據(jù)光源的不同，分光光度法又可分為可見光分光光度法、紫外光分光光度法和紅外光分光光度法三種。①比色法是以生成有色化合物的顯色反應為基礎，通過比較或測量有色物質溶液顏色深度來確定待測組分含量的方法。選擇適當?shù)娘@色反應和控制好適宜的反應條件，是比色分析的關鍵。常用的比色法有兩種：目視比色法和光電比色法。當利用比色法測定溶液中某種化學成分時，通常需加入某種顯色劑，使其產(chǎn)生有色化合物，而且其顏色的深淺與待測化學成分的含量成正比，據(jù)此測定待測物的濃度。顯色試劑有：A、 無機顯色劑：KSCN（測Fe、Mo、W等）、鉬酸胺（測P、As等）、過氧化氫：測Ti、V等B、 有機顯色劑：螯合劑（磺基水楊酸、二苯硫腙、結晶紫等）、絡合物、雜多酸、有色溶液對光線有選擇性的吸收作用，不同物質由于其分子結構不同，對不同波長線的吸收能力也不同，因此，每種物質都具有其特異的吸收光譜。有些無色溶液，光雖對可見光無吸收作光光度技術吸收用，但所含物質可以吸收特定波長的紫外線或紅外線。②分光光度法紫外可見分光光度技術（UVVis）是根據(jù)物質的吸收光譜及光的吸收定律（郎伯—比耳定律），對物質進行定性、定量分析的一種方法。其具體是通常是把溶液的厚度固定不變，通過光密度值表現(xiàn)溶質的濃度。若用待測物的純品配制不同的濃度，測出其光密度，繪出濃度對光密度的工作曲線，便可以此查得未知樣品的濃度，還可依據(jù)下列公式對未知樣品的濃度通過計算得出。紫外可見分光光度計：可見光區(qū)：400750nm；紫外光區(qū)：200400nm；遠紫外區(qū)：10200nm（真空紫外區(qū)）。光源一般使用在可見光區(qū)用鎢燈，其輻射波長為3202500nm；紫外區(qū)一般用氫、氘燈作為光源，而自動生化儀多用鹵鎢燈。應用情況：臨床上可用無機化學、有機化學和生物化學（酶法）反應在紫外或可見光區(qū)顯色而測定（幾乎所有的無機離子和有機物都可直接或間接用可見光及紫外光分光光度法進行定量測定和純度分析 ），具體可用于：A、 無機化學反應：如氯、鈣、鎂、磷、鐵離子的檢測；B、 有機化學反應：血清總蛋白、血清清蛋白、葡萄糖、膽固醇、肌酐等的檢測；C、 生物化學反應：葡萄糖、膽固醇、尿素氮、總膽汗酸等的酶法檢測。使用分光分度計的常用檢測方法：1. 單組分定量方法；2. 多組分定量方法；3. 雙波長法（等吸收點法）發(fā)射光譜技術:是指通過測量物質的發(fā)射光譜的波長和強度進行定性和定量分析的方法。 熒光分析法：某些物質被紫外光照射后，物質分子吸收了輻射而成為激發(fā)態(tài)分子，若在返回到基態(tài)時伴隨著光子的輻射，則發(fā)射出比入射光波長更長的熒光，測量熒光的強度進行分析的方法稱為熒光分析法。常用于無機物和有機物（糖類、胺類、DNA、酶與維生素等）的元素測定。常用的儀器有：化學發(fā)光免疫分析儀ECLTAIIA、化學發(fā)光免疫分析儀GloRunner等常見熒光試劑：四氯熒光素（測定Ag）、桑色素（AL）、熒光素+AgNO3（CL）、溴化乙啶（核酸）、乙二胺（腎上腺素）、曙紅y（蛋白質）等。散射光譜技術：光散射是電磁波經(jīng)過一個樣品時作用于微粒的結果。其分析法主要測定光線通過溶液混懸顆粒后的光吸收或光散射程度的一類定量方法。主要用于免疫檢測系統(tǒng)中，常稱為免疫濁度法。其測定方式可分為：透射濁度法、散射光濁度法（終點、散射）、粒子強化免疫濁度測定法（乳膠法或稱凝集反應）。①應用：主要用于各種蛋白質、載脂蛋白、半抗原及微生物等的檢測。②分類及原理：散射光譜技術分為：散射光濁度法、透射濁度法；（按形成復合物的速度測定可發(fā)為終點濁度法、速率濁度法）A、散射光濁度法（有終點法與速率法之分）：在596角的方向上測量散射光強度和被測溶液中微粒關系的方法。當復合物較小時“（3X10nm）時，透射與散射相當。當復合物大于入射光波的1/20,形成不對稱的前向散射，此時散射光的量代表復合物的量。速率散射濁度法，是在某單位時間內(nèi)形成大于3X10nm以上的復合物的量。當儀器測定到某一時間內(nèi)形成的速度下降時，即出現(xiàn)速率峰，忘該峰值的高低，即代表抗原的量。B、透射濁度法：在0度亦即在直射角度上測定透射光強度和被測溶液中微粒濃度關系的方法。（大多為終點法）測量方式是測定因反射、散射或吸收后的衰減，讀數(shù)以吸收光單位（A）表示，這種A值反映了透射光和入射光的比率。一般在測定過程中形成復合物慢的反應可加入促聚劑，如4%聚乙二醇。比濁一般復合物大于19s方可比濁。測定的復合物一般為35100nm間。透射濁度法因結果準確，所用儀器多為全自動，且能與其他光度（如酶測定）測定結合。其在許多自動化儀器上皆有測試程序，大多為終點法。③儀器和試劑（包括質控品、校準品）透射濁度分析儀：A、分光光度儀 B、自動生化分析儀 散射濁度分析儀：A、離心式濁度分析儀 B、氮氦激光分析儀 速率法濁度分析儀：④產(chǎn)品過程及控制要求：A、 因是用于散射光比濁的試劑，應在樣品制備過程中，防止能產(chǎn)生散射光的物質，如灰塵等。B、 內(nèi)部質控時需注意，應用合適的校正材料制備劑量反應曲線。其曲線形狀取決于抗血清和促聚劑的濃度選擇，也與所用免疫濁度法類型、校正方法及校正材料的質量有關。制備和選取合適的質控材料，進行室內(nèi)質控是必要的。C、 濁度的中心問題是抗體的質量，關注抗體的原料采購及控制情況。（二）干化學分析法：是指建立在某些特殊固相支持物上的檢測分析技術，通常將測定某些項目所需的全部或部分試劑固定在具有一定結構的載體上，通過滴加液態(tài)樣品溶解載體上的試劑，并與樣品中的待測成分發(fā)生反應，在支持物的局部區(qū)域產(chǎn)生信號變化，再通過檢測以獲取等測物的濃度。干化學分析方法具有速度快、檢測靈敏度和準確度較高的特點，并可采用儀器進行檢測。結構可分為：雙層膜法、多層膜法（如膠體金、尿試紙等）等。 應用：尿試紙、血糖、生化、免疫（如早早孕試紙）檢測項目等； 檢測方法：①免疫膠體金分析技術：A、 應用：尿糖試紙、血糖、生化檢測項目：B、 組成：多為五層膜；C、 原理：是將抗原或抗體先固定于固體支持物如硝酸纖維素上，在與樣品（尿液或血液）中的特異性的抗體或抗原結合后，再與膠體金標記的第二抗體結合，在固定有抗原或抗體的特定區(qū)域顯色，從而實現(xiàn)對被測抗體或抗原進行特異性檢測，屬于定性或半定量分析。D、 分類：常有免疫層析和斑點免疫金滲濾分析法干化學分析儀：干式尿液分析儀、干式血糖分析儀、干式血氨分析儀（日本IREADER?）、自動干式電解質分析儀（東亞SYSMEX FDC800、上海瑞麥HDP99新型干式電解質分析儀）、干式生化分析儀（強生、京都、羅氏公司：京都：SPOTCHEM?SP4430全自動干式急診生化分析儀，其檢測項目達22