【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 對(duì)于正確度控制品，標(biāo)準(zhǔn)中特別指出，本標(biāo)準(zhǔn)不適用于： ? 1) 沒有定值、僅用于評(píng)估檢測(cè)程序的精密度，重復(fù)性或重現(xiàn)性的控制物質(zhì)（精密度控制物質(zhì)）。 ? 2) 用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制，附有建議的可接受值區(qū)間的控制物質(zhì)。每個(gè)區(qū)間由各實(shí)驗(yàn)室用某特定測(cè)量程序測(cè)量協(xié)調(diào)一致形成每個(gè)區(qū)間和極值，不具計(jì)量溯源性。 ? 對(duì)于控制品的可追溯性，國內(nèi)前階段有認(rèn)為，ISO17511講到控制品定值可以具有可追溯性，所以，定值的控制品都可以有可追溯性，這是嚴(yán)重的誤導(dǎo)。要注意：按照 ISO要求的定值，要比為校準(zhǔn)品定值還嚴(yán)格。一些實(shí)驗(yàn)室對(duì)控制品的檢測(cè)結(jié)果簡(jiǎn)單的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，無法屬于“正確度控制品”的定值手段。 ? 識(shí)別控制品是否屬于“正確度控制品”，大致上可以按以下的步驟予以甄別： ? 1）控制品是否是制備檢測(cè)系統(tǒng)制造商出品的？ ? 2）控制品說明書上是否指出：該定值按照ISO17511的規(guī)定進(jìn)行定值？而且，定值只有一個(gè)值，以及有不確定度。不是一般控制品定值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差、或定值范圍。 ? 3）控制品是否專用于制造商檢測(cè)系統(tǒng)，沒有其它定值數(shù)據(jù)？ 實(shí)現(xiàn)病人樣品結(jié)果的溯源性中，臨床實(shí)驗(yàn)室的責(zé)任是什么？ ? 臨床實(shí)驗(yàn)室的責(zé)任實(shí)驗(yàn)室獲得可靠結(jié)果，不僅需要具有可追溯性的檢測(cè)系統(tǒng)；還應(yīng)重視完成檢驗(yàn)的所有過程。在分析前、分析中、和分析后可能出現(xiàn)的任何變異和誤差，都要認(rèn)真實(shí)現(xiàn)質(zhì)量管理。沒有這些，再好的檢測(cè)系統(tǒng)，病人樣品無法獲得具有可追溯性的結(jié)果。 ? 建立參考實(shí)驗(yàn)室是一個(gè)長期的任務(wù)。需要基礎(chǔ)的積累。國內(nèi)要通過自己建立參考實(shí)驗(yàn)室，確認(rèn)參考方法與參考物質(zhì)，如果沒有國際的認(rèn)可，還是難以實(shí)現(xiàn)國際量值溯源性。國際上由各國有關(guān)學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)、政府的計(jì)量研究院所、制造商的合作，形成了國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)溯源性合作委員會(huì)。 167。 62 ISO 18153:2023 ? ISO 18153:2023是關(guān)于《體外診斷醫(yī)療器械 ——生物源性樣品中量的測(cè)量 ——校準(zhǔn)品和控制品中酶催化濃度定值的計(jì)量學(xué)溯源性》的標(biāo)準(zhǔn)，是體外診斷試劑的一個(gè)基礎(chǔ)性標(biāo)準(zhǔn)。由 SAC/TC 136全國醫(yī)用臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室和體外診斷系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口。 ? 在體外診斷醫(yī)療器械指令 98/79/EC中，要求校準(zhǔn)品與控制品的定值具有計(jì)量學(xué)溯源性，能夠溯源到上一級(jí)參考測(cè)量物質(zhì)和參考測(cè)量程序。按照這一概念，關(guān)于“溯源性”的標(biāo)準(zhǔn) ISO 17511對(duì)測(cè)量程序和校準(zhǔn)物質(zhì)的溯源等級(jí)進(jìn)行了具體描述。這一標(biāo)準(zhǔn)中的總則同樣適用于催化活性的定量。應(yīng)當(dāng)盡可能使計(jì)量溯源到 SI單位，即校準(zhǔn)等級(jí)中的最高級(jí)。 ? 該標(biāo)準(zhǔn)對(duì)酶催化活性濃度（以下稱為“催化濃度”）的測(cè)量中校準(zhǔn)品和測(cè)量程序的等級(jí)進(jìn)行了描述。酶學(xué)測(cè)量中， SI單位定義為 “摩爾每秒立方米（ mol/s?m3）”，國際計(jì)量大會(huì)將其命名為“卡特每立方米katal/m3”，是溯源等級(jí)的最高級(jí)，然后是一級(jí)參考測(cè)量程序，其它低級(jí)測(cè)量程序、校準(zhǔn)品以及控制品應(yīng)盡可能溯源至該程序。 ? 測(cè)量血液或其他生物體液中酶的催化濃度有助于疾病的診斷。測(cè)量底物轉(zhuǎn)化的催化速率分析原理，具有速度快、檢測(cè)限低、分析特異性高和成本低等優(yōu)點(diǎn)。只有在同一條件下測(cè)量得到的催化濃度值才具有可比性。因此，對(duì)一個(gè)酶被測(cè)量進(jìn)行說明時(shí)，不僅應(yīng)有量的類（例如催化濃度）、酶和系統(tǒng)的名稱，而且還應(yīng)包括特定的測(cè)量程序，特別是測(cè)量反應(yīng)中的指示成份。在溯源等級(jí)的頂點(diǎn)，測(cè)量程序應(yīng)是國際認(rèn)可的，例如“肌酸激酶（ CK）的 IFCC參考測(cè)量程序，以 NADH轉(zhuǎn)化速率測(cè)量CK”。 因此，一級(jí)參考測(cè)量程序是被測(cè)量的定義不可分割的部分，必須在所有細(xì)節(jié)處嚴(yán)格遵守，應(yīng)包括如下內(nèi)容： ? 底物的種類（由酶的特異性決定）及其濃度 、 催化劑及其濃度 、 催化反應(yīng)的方向 、指示成份 、 緩沖系統(tǒng)及其 pH、 溫度 、 預(yù)溫時(shí)間 、 反應(yīng)啟動(dòng)物質(zhì) 、 延遲時(shí)間 、 反應(yīng)時(shí)間 。 ? 酶被測(cè)量定義對(duì) 程序的依賴 以及造成測(cè)量結(jié)果的缺陷眾所周知： 在室間質(zhì)量評(píng)估（EQA）以及評(píng)估方法的可轉(zhuǎn)移性出現(xiàn)的問題；生物參考區(qū)間的多樣性使酶結(jié)果的臨床應(yīng)用產(chǎn)生錯(cuò)誤的危險(xiǎn)。 （ 常規(guī)酶測(cè)量的標(biāo)準(zhǔn)化對(duì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)非常重要，通過消除現(xiàn)有生物參考區(qū)間的差異，改善結(jié)果的臨床應(yīng)用和可比性。 ） ? 可以考慮兩種方式： ? a) 常規(guī)只應(yīng)用每個(gè)酶推薦的或標(biāo)準(zhǔn)化測(cè)量程序。 ? b) 使用經(jīng)選定參考測(cè)量程序定值的可互換的酶校準(zhǔn)品，對(duì)一個(gè)或多個(gè)常規(guī)測(cè)量程序進(jìn)行校準(zhǔn)。 ? 方法（ a）“推薦程序”已經(jīng)持續(xù)追求了 20多年。在提高酶測(cè)量質(zhì)量水平和可比性以及廢除不好的分析程序方面取得了一定的成就。然而， 使用推薦程序進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化的途徑已經(jīng)達(dá)到了極限。 ? 其不足之處在于：在眾多推薦程序選擇時(shí)缺乏一致意見，在常規(guī)使用時(shí)對(duì)推薦程序有意或無意的改動(dòng)，無意對(duì)推薦程序進(jìn)行分析和技術(shù)上的改進(jìn)，推薦程序?qū)ψ詣?dòng)化要求相當(dāng)不適合。常規(guī)酶測(cè)量程序的改變，不管是否為推薦程序，都不可避免會(huì)導(dǎo)致生物參考范圍的改變，臨床醫(yī)生必然不易接受。 ? 改進(jìn)酶測(cè)量設(shè)計(jì)和分析性能將會(huì)、也應(yīng)該永無止境。然而，這一程序需要遵循科學(xué)、發(fā)展的道理，應(yīng)具有可操作性。試圖通過對(duì)標(biāo)準(zhǔn)化測(cè)量程序的進(jìn)一步發(fā)展和改進(jìn)，使其成為“通用”方法的做法既不切實(shí)際也不符合需要。 方法（ b）“參考測(cè)量程序和校準(zhǔn)物質(zhì)” 未得到足夠重視，存在的主要問題有： ? 缺乏具有相應(yīng)基質(zhì)的穩(wěn)定酶參考物質(zhì)作為校準(zhǔn)品。 ? 候選酶校準(zhǔn)品與人樣品中的酶存在差異，包括同工酶的差異。 ? 酶校準(zhǔn)品和含有分析物酶的患者樣品，在校準(zhǔn)（參考）程序和被校準(zhǔn)（常規(guī)）程序之間缺乏穩(wěn)定的程序間比值（即缺乏互換性） 。 ? 由這些問題，對(duì)建議進(jìn)行校準(zhǔn)的較高等級(jí)的酶參考物質(zhì)和測(cè)量程序二者，提出了系列要求。校準(zhǔn)品應(yīng)穩(wěn)定、內(nèi)含的分析物酶在其基質(zhì)中的催化特性應(yīng)和常規(guī)樣品中分析物酶的催化特性接近。測(cè)量程序自身對(duì)目標(biāo)酶的催化活力具有相同的特異性。對(duì)于目標(biāo)酶的催化活性，測(cè)量程序應(yīng)具有相同的特異性。 ? 對(duì)于每個(gè)臨床上重要的酶，可通過選擇參考測(cè)量程序和證實(shí)有關(guān)系列程序，實(shí)現(xiàn)常規(guī)酶測(cè)量結(jié)果的可比性。只要使用該系列的任何程序得到結(jié)果都可以在計(jì)量上溯源至選定的參考測(cè)量程序。 ? 該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用于確立或驗(yàn)證酶催化濃度測(cè)量真實(shí)度的校準(zhǔn)品和控制品定值的計(jì)量學(xué)溯源性的確認(rèn)方法。該標(biāo)準(zhǔn)適用于由制造商提供的作為體外診斷醫(yī)療器械的一部分或者與其組合使用的校準(zhǔn)品和控制品。但并不是所有的標(biāo)準(zhǔn)均適用該標(biāo)準(zhǔn)，以下是一些不適用的標(biāo)準(zhǔn)： ? 參考測(cè)量程序設(shè)計(jì)或選擇的要求； ? 包含酶的質(zhì)量或酶的免疫活性的量； ? 非定值、僅用于評(píng)價(jià)測(cè)量程序精密度，即重復(fù)性或重現(xiàn)性的控制物質(zhì)（精密度控制物質(zhì)）； ? 用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制的控制品，此類控制品提供了可接受的數(shù)值區(qū)間，每個(gè)區(qū)間都是由不同實(shí)驗(yàn)室根據(jù)一個(gè)規(guī)定測(cè)量程序得出的，而且該數(shù)值區(qū)間不具有計(jì)量學(xué)溯源性； ? 常規(guī)結(jié)果向產(chǎn)品校準(zhǔn)品的計(jì)量學(xué)溯源性，及其與醫(yī)學(xué)判斷限的關(guān)系； ? 與名義和順序標(biāo)度相關(guān)的特性。 定義 ? 物質(zhì)的互換性：由一組旨在測(cè)量同一量的測(cè)量程序?qū)δ骋晃镔|(zhì)分別進(jìn)行測(cè)量時(shí)，各測(cè)量結(jié)果間可以產(chǎn)生相同的數(shù)字關(guān)系的能力；以及由同一測(cè)量程序測(cè)量含有該量的其它相關(guān)類型的物質(zhì)時(shí)，可以獲得期望的關(guān)系的能力 ? 計(jì)量學(xué)溯源性 ： 通過一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈，使測(cè)量結(jié)果或測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)的值能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn)，通常是與國家標(biāo)準(zhǔn)或國際標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系起來的特性。 ? 注 1．每一個(gè)比較都是通過（參考）測(cè)定程序得到的，這些測(cè)量程序在校準(zhǔn)互換方案中有限定。 ? 注 2．溯源性有幾種。故在本文中用了 “計(jì)量學(xué)溯源性 ”這一術(shù)語。 計(jì)量學(xué)溯源性鏈與校準(zhǔn)溯源等級(jí) ? ISO17511對(duì)生物源性樣品中量的測(cè)量結(jié)果的計(jì)量學(xué)溯源性及其校準(zhǔn)的命名和基本原理進(jìn)行了說明，它們也可以用于被測(cè)物是酶、被測(cè)量是衍生量的類“催化活性”（或者進(jìn)一步的衍生量的類如“催化濃度”或“催化內(nèi)容”）的情況。 ? 一級(jí)校準(zhǔn)品用一級(jí)參考測(cè)量程序定值，一級(jí)參考物質(zhì)再用于校準(zhǔn)下一級(jí)測(cè)量程序，以此類推，直到終用戶測(cè)定常規(guī)樣品得到的結(jié)果。 保證互換方案可用的先決條件 ? 在溯源等級(jí)圖中的下一級(jí)測(cè)量程序測(cè)量的是同一個(gè)量。因此，應(yīng)表明，校準(zhǔn)溯源等級(jí)中一級(jí)測(cè)量程序的二級(jí)程序測(cè)量的是相同的被測(cè)量。例如：特定同工酶的催化濃度或者在給定系統(tǒng)中具有同樣相關(guān)程度的異構(gòu)體。 ? 注 1：既然量的類“催化活性”定義為在特定反應(yīng)體系（特定是指：底物濃度、輔助因子、分析部分的體積分?jǐn)?shù)、溫度）中，特定底物被轉(zhuǎn)化的速率；高級(jí)到低級(jí)的所有測(cè)量程序的測(cè)量條件應(yīng)盡量相似。應(yīng)避免任何使校準(zhǔn)品或控制品定值不確定度增加的反應(yīng)條件變化。 ? 注 2：有些酶的催化特性較緩和，允許對(duì)底物的性質(zhì)加以改變，但是如果在低一級(jí)的測(cè)量程序中選定的底物與參考測(cè)量程序中的底物不同，則需要另外的實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明在修改程序中測(cè)量的是相同的量。 ? 原則上，如果制造商校準(zhǔn)品的定值需要溯源到 SI，則需要提供一級(jí)參考測(cè)量程序和制造商校準(zhǔn)品。 ? 注 1：為降低不確定度，應(yīng)盡可能多的去除校準(zhǔn)溯源中的連續(xù)級(jí)別對(duì)（校準(zhǔn)品和程序）。 ? 一級(jí)參考測(cè)量程序，在給定校準(zhǔn)等級(jí)中應(yīng)優(yōu)于其它水平、處于第一級(jí)操作水平的測(cè)量程序。描述的內(nèi)容有反應(yīng)條件、定義被測(cè)量、特別是酶的組分等。 ? 測(cè)量結(jié)果應(yīng)直接用催化濃度表示，如導(dǎo)出 SI單位卡特每升或摩爾每秒升，或是其相應(yīng)的倍數(shù)或約數(shù)。 ? 測(cè)量的每一步應(yīng)清楚定義，才可能對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度進(jìn)行估計(jì)。 不確定度 ? 注 1：不確定度估計(jì)要求清楚描述測(cè)量的每一個(gè)步驟，實(shí)驗(yàn)在控制下，不是自動(dòng)化的測(cè)量程序。 ? 注 2：一級(jí)參考測(cè)量程序應(yīng)由國際公認(rèn)組織推薦，如國際臨床化學(xué)和檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)會(huì)（ IFCC）。如果沒有國際認(rèn)可的一級(jí)參考測(cè)量程序，應(yīng)當(dāng)鼓勵(lì)國家計(jì)量機(jī)構(gòu)或科學(xué)組織建立這樣的程序，以尋求國際認(rèn)可。 ? 注 3： IFCC目前正在更新其參考測(cè)量程序，允許用攝氏溫度 370C，代替 300C。已經(jīng)發(fā)布了在新的 370C下測(cè)量 ALT，AST， CK， rGT和 LDH的參考測(cè)量程序。附錄 A列出了一級(jí)參考測(cè)量程序清單。 ? 一級(jí)校準(zhǔn)品應(yīng)具有由一級(jí)參考測(cè)量程序所賦的值和測(cè)量不確定度，通過正式的實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，包括互換性的評(píng)估。 ? 注 1：一級(jí)校準(zhǔn)物質(zhì)的制備和驗(yàn)證應(yīng)由國際組織負(fù)責(zé)。 ? 注 2：舉例來說， BCR有證參考物質(zhì)是一級(jí)校準(zhǔn)物質(zhì)，由歐盟“測(cè)量和測(cè)試機(jī)構(gòu)”建立?；蛘哂蓺W盟的“參考物質(zhì)和測(cè)量研究院（ IRMM）”與 IFCC合作建立。 ? 二級(jí)參考測(cè)量程序應(yīng)是由一個(gè)或多個(gè)一級(jí)校準(zhǔn)品校準(zhǔn)的測(cè)量系統(tǒng)。其反應(yīng)條件應(yīng)保證被測(cè)量與一級(jí)參考測(cè)量系統(tǒng)相同。應(yīng)遵循關(guān)于說明以及值和不確定度的計(jì)算原則。其反應(yīng)條件應(yīng)使被測(cè)量和一級(jí)參考測(cè)量系統(tǒng)的是相同的。應(yīng)使用給出的敘述原則以及值和不確定度的計(jì)算。 ? 注 1：為操作方便，二級(jí)參考測(cè)量程序應(yīng)比一級(jí)參考測(cè)量程序更適合機(jī)械操作。 ? 注 2：二級(jí)參考測(cè)量程序應(yīng)由參考實(shí)驗(yàn)室或制造商進(jìn)行說明和實(shí)施。 ? 二級(jí)校準(zhǔn)品應(yīng)由二級(jí)參考測(cè)量程序定值。 ? 注 1： 二級(jí)校準(zhǔn)品可以有證書。 ? 注 2： 可在參考測(cè)量實(shí)驗(yàn)室或制造商實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行定值。 ? 注 3：二級(jí)校準(zhǔn)品可以是具有基質(zhì)的材料；這些基質(zhì)相似于最終用戶常規(guī)測(cè)量程序測(cè)量的人樣品。 ? 制造商選定測(cè)量程序應(yīng)指定一個(gè)測(cè)量系統(tǒng)，如果可能，該系統(tǒng)應(yīng)經(jīng)一個(gè)或多個(gè)一級(jí)或二級(jí)校準(zhǔn)品校準(zhǔn)。 ? 注：制造商選定測(cè)量程序可以是二級(jí)參考測(cè)量程序。 ? 制造商工作校準(zhǔn)品應(yīng)由二級(jí)參考測(cè)量程序定值并確