【文章內(nèi)容簡介】 貼瓶開始后，前 30瓶應(yīng)仔細(xì)檢查瓶貼質(zhì)量，包括瓶貼位置，批號等打印是否正確、清晰，粘貼是否牢固、平整等。 合格后，每 50瓶抽 1瓶進(jìn)行檢查。 合并包裝 生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點 生產(chǎn)工序 生產(chǎn)要點 質(zhì)量控制點 合并包裝 1 包裝盒的 壓印 生產(chǎn)日期、批號打印的準(zhǔn)確 性、清晰度 2 合并 合并組分的齊全性 印刷類包裝品的物料平衡 成品檢定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) ? 物理檢查 ? 試劑空白 ? 陰性對照 ? 陽性對照 ? 陰性參考品符合率 ? 陽性參考品符合率 ? 最低檢出量 ? 精密性 ? 穩(wěn)定性實驗 成品入 庫 入庫 ? 控制點：產(chǎn)品放行報告；入庫數(shù) ? 要求： 憑由質(zhì)量管理部經(jīng)理簽署的成品出廠合格報告，成品檢定書辦理入庫手續(xù)，入庫數(shù)應(yīng)與成品出廠合格報告中所報數(shù)量一致。 P2生物安全實驗室管理 ? 人員衛(wèi)生 進(jìn)入 P2實驗室必須加穿潔凈防護(hù)服，帶一次性乳膠手套和一次性口罩。只允許工作人員進(jìn)入，禁止非工作人員進(jìn)入實驗室。 ? 生物安全柜 實驗室的操作嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行操作，對存在感染性或潛在感染性的操作須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。做好相應(yīng)的消毒、使用記錄。 ? 消毒及滅菌 所有直接或間接接觸病原微生物的儀器、設(shè)備、器具，均需進(jìn)行消毒處理，能高壓的選擇 121℃ 高壓滅菌 30分鐘處理，不能高壓的選擇1%次氯酸鈉消毒。實驗中產(chǎn)生的具有感染性或潛在感染性的穿透性利器廢物置入黃色塑料利器盒中，其他非利器廢物置入黃色醫(yī)療廢物塑料袋中。 ? 實驗室應(yīng)指定專人負(fù)責(zé)感染性或存在潛在感染性材料的保藏，做好標(biāo)識，建立臺帳。 二 .金標(biāo)產(chǎn)品 【產(chǎn)品名稱】 ? 人類免疫缺陷病毒 (HIV1/2)抗體診斷試劑盒 (膠體金法 ) 【包裝規(guī)格】 ? 50人份 /盒 【預(yù)期用途】 ? 本試劑盒適用于對人血清 /血漿或全血中的 (HIV1/2)抗體的快速檢測。 金標(biāo)產(chǎn)品檢驗原理 本品采用膠體金免疫層析技術(shù)，在玻璃纖維膜上預(yù)包被金標(biāo)記 HIVgp160和 gp36抗原等，在硝酸纖維膜檢測線和質(zhì)控線上分別包被HIVgp4 gp36混合抗原和抗體等，當(dāng)檢測進(jìn)行時，樣品中 HIV抗體可與金標(biāo)記 HIV抗原結(jié)合形成復(fù)合物，由于層析作用復(fù)合物沿試紙條向前移動。 若樣品中含有可被檢測的 HIV抗體，則與檢測線預(yù)包被的 HIV抗原結(jié)合形成“金標(biāo)記 HIV抗原 — HIV抗體 — HIV包被抗原”復(fù)合物而凝聚顯色；若樣品中沒有 HIV抗體或 HIV抗體的含量低于檢測限時，則不形成復(fù)合物而不顯色。 示 意 圖 陰性 加樣區(qū) 加樣區(qū) 陽性 無效 檢測線 質(zhì)控線 主要組成成份 ? HIV(1/2)抗體膠體金試紙條 /板 50 Tests ? 樣品稀釋液（磷酸鹽緩沖液） 1瓶 ? 說明書 1份 金標(biāo)產(chǎn)品主要生產(chǎn)設(shè)備 點樣儀 切割機(jī) 核酸蛋白儀 電子防潮箱 全自動噴點系統(tǒng) 劃膜機(jī) 多功能薄膜封口機(jī) 干燥箱 金標(biāo)產(chǎn)品生產(chǎn)工藝流程圖 氯化金 膠體金 標(biāo)記抗原 HIVgp36 HIVgp160 金標(biāo)記抗原 金反應(yīng)墊 燒金 標(biāo)金 噴金 干燥 包被抗原 HIVgp36 A抗原 檢測線包被液 抗 HIVgp160單抗 質(zhì)控線包被液 配制 配制 反應(yīng)膜 劃膜 干燥 試紙大板 組裝 試紙條 切割 試紙板 封裝 氯化鈉等 配制 樣品稀釋液 待檢成品 合并 出廠成品 檢定 滴配 滴配 檢定 半成品檢定 半成品檢定 成品檢定 分裝 、 帖簽 物料 質(zhì)控點 工序 關(guān)鍵工序 gp160抗原制備的生產(chǎn)和質(zhì)量控制 生產(chǎn)工序 質(zhì)量控制要點 細(xì)胞培養(yǎng) 取 工程 細(xì)胞株，經(jīng)接種復(fù)蘇后，進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)，收集培養(yǎng)上清液。上清液經(jīng)滅活、過濾、超濾，得濃縮上清液，置 20℃ 保存。 無菌操作，培養(yǎng)溫度，溶氧值， pH值，細(xì)胞密度，細(xì)胞表達(dá)水平。 純化 濃縮 上清液經(jīng)親和層析柱純化，用適宜的緩沖溶液淋洗、洗脫，收集洗脫峰，經(jīng)濃縮即得純化的 gp 160抗原。 層析柱填料的使用次數(shù)，所用緩沖液的 pH值，上樣、淋洗、洗脫速度。 gp160抗原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) ? 物理性狀：為澄清溶液 ? 純度：采用 SDSPAGE ? 分子量 ：免疫活性 ? 穩(wěn)定性 gp36抗原制備的生產(chǎn)和質(zhì)量控制 生產(chǎn)工序 質(zhì)量控制要點 發(fā)酵 用 gp36工程菌發(fā)酵，收集菌體。 工程菌誘導(dǎo)溫度，工程菌誘導(dǎo)時間。 純化 菌體經(jīng)超聲破碎，制得粗制 gp36抗原。粗制 gp36抗原經(jīng)親和層析柱純化，用適宜的緩沖液進(jìn)行透析， 經(jīng)濃縮即得純化的 gp 36抗原。 超聲破碎時間，層析柱填料的使用次數(shù)，所用緩沖液的pH值控制，上樣、淋洗、洗脫速度。 gp36抗原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) ? 純度 ? 分子量 ? 功能性試驗 ? 穩(wěn)定性 gp41抗原制備的生產(chǎn)和質(zhì)量控制 生產(chǎn)工序 質(zhì)量控制要點 發(fā)酵 用工程菌發(fā)酵，收集菌體。 工程菌誘導(dǎo)溫度，工程菌誘導(dǎo)時間。 純化 超聲破碎，制得粗制 gp41抗原。粗制 gp41抗原經(jīng)親和層析、分子篩等純化，收集目的蛋白峰，即得純化的 gp 41抗原。 超聲破碎時間，層析柱填料的使用次數(shù)，所用緩沖液的pH值，上樣、淋洗、洗脫速度。 gp41抗原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) ? 純度：采用 SDSPAGE法檢定應(yīng)符合要求 ? 分子量 ? 功能性試驗 ? 穩(wěn)定性 抗 HIV單抗制備的生產(chǎn)和質(zhì)量控制 生產(chǎn)工序 質(zhì)量控制要點 細(xì)胞復(fù)蘇及傳代培養(yǎng) 單克隆抗體細(xì)胞株，經(jīng)接種復(fù)蘇后，進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)。 無菌操作，培養(yǎng)基的配制，細(xì)胞培養(yǎng)溫度。 腹水制備 福氏不完全佐劑免疫， 710天后 單克隆抗體細(xì)胞懸液注射于 F1代 小鼠 ， 10天后采集小鼠腹水，離心，制得單 抗 HIV腹水。 對數(shù)生長期細(xì)胞接種。 純化 用制備的 抗 HIV 單抗腹水 ，經(jīng)親和 層析柱 純化等即得抗 HIV 單抗 。 層析柱填料的使用次數(shù)，所用緩沖液的 pH值，上樣、平衡、洗脫速度。 單抗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) ? 純度 ? 分子量 ? 功能性檢測 ? 穩(wěn)定性試驗： 37℃ 放置 15天，檢測上述標(biāo)本，可達(dá)到上述功能性檢測標(biāo)準(zhǔn) 。 金反應(yīng)墊制備的生產(chǎn)和質(zhì)量控制要點 生產(chǎn)工序 生產(chǎn)關(guān)鍵點 質(zhì)量控