【文章內(nèi)容簡介】 的消毒與滅菌、感染性廢物的處置等課程。重點還應(yīng)包括：A. 吸入危險（氣溶膠產(chǎn)物），如何使用接種環(huán)、劃線接種瓊脂平板、移液、制作涂片、打開培養(yǎng)物、采血/血清標(biāo)本、離心等。B. 食入危險，如處理標(biāo)本、涂片以及培養(yǎng)物。C. 在使用注射器和針頭時刺傷皮膚的危險。D. 處理血液以及其它有潛在病理學(xué)危險的材料E. 感染性材料的清除污染和處理。當(dāng)有關(guān)部門新頒發(fā)、修訂生物安全相關(guān)法律、法規(guī)、規(guī)范、標(biāo)準(zhǔn)等，實驗室生物安全手冊進行修改后應(yīng)組織開展相關(guān)內(nèi)容的培訓(xùn)和考核。建立并保存生物安全工作人員的培訓(xùn)、考核檔案。醫(yī)學(xué)監(jiān)督程序由生物安全辦公室管理。程序的目的是對員工作定期的健康評估，關(guān)注對特殊的生物因子員工可能的處理（方式）有關(guān)的因素或條件。對特殊的員工醫(yī)學(xué)監(jiān)督程序可以做一些預(yù)防測定，包括免疫、定期身體檢查和采集血清樣本。許多傳染病并非明顯疾病條件引起?？深A(yù)先收集新進員工、傳染病實驗室員工的血清作為本底血清。實驗室應(yīng)定期對實驗人員開展與其從事實驗活動相關(guān)的健康體檢，建立人員健康檔案。實驗室工作人員應(yīng)在身體狀況良好的情況下進入實驗區(qū)工作，若出現(xiàn)疾病、過勞狀態(tài)或其他意外狀況，則不應(yīng)進入實驗區(qū)或立即退出實驗區(qū)。醫(yī)學(xué)監(jiān)督程序的目的是：u 推薦下列的合適的醫(yī)學(xué)預(yù)防（措施）u 做員工的定期評價以決定假如與工作相關(guān)的醫(yī)學(xué)條件是普遍的，這樣的話，采取確定的測定以減輕他們的（影響）對一個特定的員工醫(yī)學(xué)監(jiān)督的范圍將是非常不同和依賴于：216。 課題本身存在的潛在因素216。 那些直接或潛在暴露生物因子的員工與現(xiàn)在或以前健康狀況有關(guān)的某些附加因素醫(yī)學(xué)監(jiān)督將可提供員工可能導(dǎo)致的潛在暴露。面對職業(yè)暴露于結(jié)核桿菌的員工在科室生物安全辦公室登記。職業(yè)安全和健康管理從下列范圍鑒定潛在暴露：u 可能處理肺結(jié)核菌的實驗室有風(fēng)險新員工在雇用時必須用肺結(jié)核皮膚試驗（PPD）測試TB暴露以建立其基礎(chǔ)值。有風(fēng)險全體員工必須每年做PPD試驗。暴露于活性TB案例中的員工必須報告在暴露時初始TB試驗基線和以后暴露3個月測試的事件和經(jīng)歷。 目的 規(guī)范實驗室人員的健康監(jiān)護工作，預(yù)防、控制實驗室感染。適用于檢驗科實驗室所有工作人員?！　z驗科負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)實驗室人員健康監(jiān)護工作的組織實施。，體檢指標(biāo)除常規(guī)項目外還應(yīng)包括與準(zhǔn)備從事工作有關(guān)的特異性抗原、抗體檢測。不符合崗位健康要求不得從事相關(guān)工作。 實驗室技術(shù)人員要在身體狀況良好的情況下從事相關(guān)工作，發(fā)生發(fā)熱、呼吸道感染、開放性損傷、懷孕等或因工作造成疲勞狀態(tài)免疫耐受及使用免疫抑制劑等情況時，需由實驗室負(fù)責(zé)人同意從事相關(guān)工作，但不宜再從事高致病性病原微生物的相關(guān)工作。 檢驗科負(fù)責(zé)人在批準(zhǔn)外來學(xué)習(xí)、工作人員進入實驗室前應(yīng)了解其健康狀況，必要是可先行安排進行臨時性體檢，檔案保留。 實驗室人員免疫預(yù)防在某些情況下，做特殊研究的人員要用合適的疫苗免疫，諸如狂犬病，風(fēng)疹和麻疹。疫苗建議B型肝炎疫苗推薦給使用人類血液，體液或組織工作的人員其他疫苗由員工健康醫(yī)生決定。在一些案例中定期收集適當(dāng)?shù)纳鲜鲅鍢颖緶y定疫苗引起的抗體。，免疫接種時，應(yīng)考慮適應(yīng)癥、禁忌癥、過敏反映等情況并記入健康監(jiān)護檔案。 檢驗科應(yīng)制定年度免疫接種計劃，報主管領(lǐng)導(dǎo)批準(zhǔn)后由檢驗科組織實施。免疫接種情況應(yīng)記入健康監(jiān)護檔案。 檢驗科實驗室可根據(jù)工作開展情況對各類人員進行必要的臨時性免疫接種和預(yù)防性服藥，并記入健康監(jiān)護檔案。 對體檢結(jié)果異常的人員應(yīng)隨時進行必要的免疫接種或采取其他預(yù)防手段，并記入健康監(jiān)護檔案。，并記入健康監(jiān)護檔案。 發(fā)生事故后的人員管理 發(fā)生實驗室意外事件或一般生物安全事故后由醫(yī)務(wù)科/檢驗科確定相關(guān)人員救治、免疫接種和醫(yī)學(xué)觀察方案，發(fā)現(xiàn)異常，由醫(yī)務(wù)科/人事科/檢驗科決定人員臨時性或永久性調(diào)離崗位。臨時調(diào)離崗位的人員在重新上崗前必須進行體檢，體檢結(jié)果達到崗位健康要求后由醫(yī)務(wù)科/檢驗科批準(zhǔn)其上崗。 發(fā)生重大生物安全事故后由醫(yī)務(wù)科/檢驗科制定并上報相關(guān)人員救治、免疫接種和醫(yī)學(xué)觀察方案，同時采取有效措施盡量控制人員感染范圍，主管領(lǐng)導(dǎo)對方案進行審批。醫(yī)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)異常，由醫(yī)務(wù)科/人事科/檢驗科決定人員臨時性或永久性調(diào)離崗位，臨時調(diào)離崗位的人員在重新上崗前必須進行體檢，體檢結(jié)果達到崗位健康要求后由醫(yī)務(wù)科/檢驗科批準(zhǔn)其上崗。 一般認(rèn)為在懷孕期間暴露于某些傳染因子例如母親被因子感染可能會影響胎兒。懷孕的或?qū)言械膵D女要告知生物安全辦公室。員工要與生物安全委員會及生物安全辦公室討論關(guān)于實驗操作與懷孕的風(fēng)險問題。生物安全辦公室是懷孕婦女詢問任何問題或涉及到有關(guān)她們工作環(huán)境風(fēng)險的機構(gòu)，同時辦公室又扮演著懷孕員工和她們各自的部門負(fù)責(zé)人之間的聯(lián)絡(luò)員角色。生殖生物學(xué)危害包括但并不僅僅限于下列：u 巨細(xì)胞病毒（CMV）u B型肝炎病毒（HBV）u E型肝炎病毒u 人類免疫缺陷病毒（HIV）u 人類細(xì)小病毒B19u 風(fēng)疹（德國麻疹）u 淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒u 水痘帶狀皰疹病毒（雞疹）只要需要，生物安全辦公室與各專業(yè)科室一起去評價實驗室工作程序以確保最小的暴露。經(jīng)過與員工及醫(yī)生討論后，制定員工的限制和推薦的基線。以條件為例證明特殊預(yù)防ＨＩＶ感染、免疫抑制條件和抑制免疫系統(tǒng)的藥物治療。因此，假如你正處于上述任何條件，你必須將有關(guān)情況告知你的醫(yī)生和辦公室。6．個人防護裝備（PPE）個人防護裝備是減少操作人員暴露于氣溶膠、飛濺物以及意外接觸等危險的一個屏障。實驗室應(yīng)具備足夠的符合不同級別的個人防護裝備，供實驗人員選擇和使用。 實驗服、隔離衣 進入實驗區(qū)域必須穿實驗服，反復(fù)使用的實驗服必須是耐用的。每隔適當(dāng)?shù)臅r間應(yīng)更換實驗服以確保清潔，當(dāng)實驗服或隔離衣已被危險材料污染時應(yīng)立即更換，放在指定的位置，告知保潔人員先消毒再清洗。 手套手套應(yīng)符合舒服、合適、耐磨、耐撕的要求。在進行實驗室一般性工作，以及在處理感染性物質(zhì)、血液和體液標(biāo)本時，應(yīng)戴手套，并保證：168。 所戴手套無漏損；168。 戴好手套后應(yīng)完全遮蓋手及腕部；168。 在撕破、損壞或受污染時應(yīng)立即更換手套；168。 在完成工作后應(yīng)摘除手套并徹底洗手。用過的一次性手套應(yīng)丟棄在生物垃圾袋內(nèi)；168。 手套不得戴離實驗室區(qū)域。 口罩、帽子 在無菌室從事無菌實驗時應(yīng)戴口罩、帽子。在從事可能出現(xiàn)飛濺的工作時應(yīng)戴口罩、帽子。用過的口罩、帽子應(yīng)丟棄在生物垃圾袋內(nèi)，口罩、帽子不得戴離實驗室區(qū)域。7．實驗室設(shè)備 實驗室所用設(shè)施、設(shè)備和材料應(yīng)符合國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)定要求。一級病原微生物實驗室和二級病原微生物實驗室的設(shè)施設(shè)備要求。 生物安全柜有生物安全柜的科室要有一個生物安全柜的操作規(guī)程。合適地使用生物安全柜能提供一個清潔的工作環(huán)境。生物安全柜能提供給人員、物品和環(huán)境的保護。生物安全柜隔離來自被限制的生物危害材料區(qū)域人員的生物危害。生物安全柜藉由經(jīng)過高效率微粒子空氣濾過器(HEPA)過濾空氣中煙霧狀生物危害性材料。吸入的空氣在進入生物安全柜工作區(qū)域之前經(jīng)一個 HEPA 濾過器過濾。排氣也通過 HEPA濾過器過濾。氣溶膠在生物安全柜的工作區(qū)域中產(chǎn)生被包含在生物安全柜里面。二級生物安全柜操作程序:l 如果使用,把紫外燈關(guān)掉；打開熒光燈和排風(fēng)機。l 用75%的乙醇或適當(dāng)?shù)南緞┫舅械膬?nèi)部表面。l 將物品按程序放入生物安全柜內(nèi)的位置。不要阻塞進氣孔。等候 23 分鐘對工作區(qū)域清潔。l 在工作區(qū)域之內(nèi)，物品之間保持適當(dāng)?shù)拈g距。l 工作應(yīng)該從干凈的到污染的地方進行。l 工作完畢后,讓柜內(nèi)的物品在移出之前運行 23 分鐘。l 用75%乙醇或適當(dāng)?shù)南緞┎潦盟械墓ぷ鞅砻?。需要注意的是：A. 生物安全柜運行正常時才能使用。B. 生物安全柜在使用中打開的玻璃觀察擋板不能超過規(guī)定高度。C. 安全柜內(nèi)應(yīng)盡量少放器材或標(biāo)本，不能影響后部壓力排風(fēng)系統(tǒng)的氣流循環(huán)。D. 安全柜內(nèi)不能使用明火，否則燃燒產(chǎn)生的熱量會干擾氣流并可能損壞過濾器。允許使用微型電加熱器。E. 所有工作必須在工作臺面的中后部進行，并能夠通過玻璃觀察擋板看到。F. 盡量減少操作者身后的人員活動。G. 操作者不應(yīng)反復(fù)移出或伸進手臂以免干擾氣流。H. 不要使實驗記錄本、移液器以及其它物品阻擋空氣格柵，因為這將干擾氣體流動，引起物品的潛在污染和操作者的暴露。I. 在安全柜內(nèi)的工作開始前和結(jié)束后，安全柜的風(fēng)機應(yīng)至少運行2～3分鐘。J. 在生物安全柜內(nèi)操作時，不能進行文字工作。許多生物安全柜裝備有殺菌的紫外線燈。照射時間、距離、灰塵或碎片的出現(xiàn)和紫外燈強度影響紫外燈的殺菌效果。紫外燈的可見蘭紫色光不指示有殺菌的效應(yīng)。紫外燈需要定期地清潔排除灰塵。紫外燈可能損害眼睛、皮膚和實驗室設(shè)備。紫外燈應(yīng)該在有人進入前被關(guān)閉。禁止使用到期的紫外燈。 離心沉淀程序所有的離心沉淀將使用放入密封的離心轉(zhuǎn)子中的離心機保護桶或密封的離心管。如果使用的是無效的小離心機安全杯，則應(yīng)該在生物安全柜中操作離心機。操作離心機的每個人應(yīng)該熟悉相應(yīng)的操作程序。在操作記錄簿上詳細(xì)記錄離心機和轉(zhuǎn)子使用情況以決定技術(shù)維修的需要。下列是被推薦的離心沉淀法程序:l 在使用離心管和瓶之前檢查它們有否壓力標(biāo)記。l 在生物安全柜里面輕輕裝滿所有的離心機管和瓶。在放入安全杯或轉(zhuǎn)子前用消毒劑擦拭離心管。l 離心管決不要裝得太多,當(dāng)離心管裝得太滿可能發(fā)生泄漏。最大為離心管的3/4。l 離心前離心管的蓋子處于蓋著狀態(tài)。l 所有的管子放入保護桶或密封轉(zhuǎn)子中。檢驗保護桶的“O”型密封圈和保護桶或轉(zhuǎn)子的內(nèi)部。l 在放入轉(zhuǎn)子或保護桶之前用消毒劑擦拭管子或瓶子的外面。l 不要超過安全的轉(zhuǎn)子速度。l 如果一個異常的情況發(fā)生(噪音或振動) 立即停止離心機。l 離心完畢后在打開離心機之前等候五分鐘。這將會使氣溶膠沉淀下來以防止事故的發(fā)生。l 在每次使用后清潔和防護輸送器或轉(zhuǎn)子和離心機內(nèi)部。 注射器和針頭注射器和皮下注射器的針頭是一種危險的器械。為了減少偶爾的意外注射、氣溶膠的產(chǎn)生或溢出，當(dāng)有替代的方法可以利用的時候，應(yīng)避免使用注射器。例如，在注射器上為口腔或鼻腔的注射使用鈍針或套管。當(dāng)使用腸外注射的時候，推薦下列使用皮下注射器針頭和注射器的注意點：l 在生物安全柜里使用注射器和針頭時，最好和避免拿注射器的手作快速和不必要的移動。l 檢查針頭是否有倒鉤和堵塞。這些檢查應(yīng)該在使用和消毒前完成。只使用針頭鎖閉為了確信針頭被安全鎖定放入桶內(nèi)。無論什么時候只要有可能就用塑料的可任意處理的注射器替換玻璃制的注射器。l 只要可能就使用更安全的針。l 使用操作針和注射器的時候戴乳膠手套。l 裝滿注射器時盡量減少注射器內(nèi)泡沫和氣泡的產(chǎn)生。l 排除掉注射器內(nèi)多余的氣體、液體和泡沫，垂直打入濕的含合適的消毒劑的脫脂棉花內(nèi)或打入含有消毒棉花的小瓶內(nèi)。l 不要為了混勻而用注射器將有傳染性物質(zhì)的液體強力地注射進開口的小瓶里。如果注射器的針頭在試管里液面下則用注射器混合僅僅是用來補液。l 注射器從試管中被裝滿時，注意不要污染注射器的中部，這可能導(dǎo)致傳染性物質(zhì)轉(zhuǎn)移至手指頭。l 在從橡皮塞中拔除注射器和針頭時，用含適當(dāng)?shù)南緞┑拿撝藁ò腿♂橆^。如果有涉及消毒劑污染到敏感的實驗材料，可以使用消毒的脫脂棉，并立即丟棄至生物危害袋內(nèi)。l 將注射器丟入專用的容器內(nèi)。別折彎、別剪、別重復(fù)或以別的方式處理針。如果重復(fù)使用不可避免，使用相同的手法。別將注射器扔進非專用的容器內(nèi)。l 決不要用嘴吸移液管；在吸取傳染性材料的時候總是使用一些移液管輔助器具。所有危險的東西更適宜在生物安全柜里操作。l 傳染性的或有毒的材料不應(yīng)該從移液管中強力地排出。l 傳染性的或有毒的液體要防止因用空氣吹打液體而導(dǎo)致泡沫的產(chǎn)生。l 決不應(yīng)該為了混合而用移液管反復(fù)地吹吸含有傳染性或者有毒物質(zhì)的液體。l 移液管的排出除應(yīng)該與液體或瓊脂水平盡可能地近，并且，只要可能內(nèi)容物應(yīng)該沿著管壁或瓶壁排出，不要從高處排出。l 用于吸取傳染性或者有毒材料移液管尾部應(yīng)該用棉花塞住，甚至在操作AIDS時用安全移液管。l 避免從移液管中偶然落下的傳染性或者有毒的材料到工作面。在拋棄或再次使用前放含濕的消毒劑的毛巾或其他的能吸收的材料到工作面和高壓鍋上。l 污染的移液管應(yīng)該放入類似次氯酸鹽消毒劑的容器內(nèi)。裝移液管的圓筒不要垂直地放置由于其高度，必須放在生物安全柜外的地面上。從生物安全柜中拿出污染的移液管，將它們垂直地放入容器中防止從移液管中的液體滴入到地面上或容器的邊緣而形成氣溶膠，并且，移液管頂部常常超出消毒劑的液面。l 為被使用的移液管在生物安全柜的范圍內(nèi)放置丟棄盤。經(jīng)適當(dāng)時間的浸泡后，多余的消毒劑小心的倒入水池。盤子和移液管一起高壓消毒，用清潔的盤子換上新鮮的消毒劑備用。8．實驗室操作為預(yù)防有關(guān)危害的發(fā)生，我們在這一章節(jié)里講述了一些實驗室技術(shù)和方法的資料。預(yù)防措施是一個進行生物危害控制的重要元素，推薦實驗室每一位工作人員認(rèn)真仔細(xì)閱讀這一章節(jié)。以安全為目的，態(tài)度可以被定義為是知識和經(jīng)驗的積累物，它可以引導(dǎo)一個個體特定的操作。人為因素和態(tài)度可導(dǎo)致一種傾向，即部分個體對環(huán)境、人和物起到一個正面或負(fù)面的影響。實驗室生物安全管理人員應(yīng)明白自身的態(tài)度和人為因素對控制實驗室生物安全影響的重要性。下面列出一些對管理人員有幫助的觀測內(nèi)容：168。在實驗室事故中缺乏事故感知能力是一個重要因素。168。 以反常的速率工作是一個重要的引發(fā)因素。168。故意違反規(guī)章是引發(fā)事故的常見原因，期間存在很多危險因素。168。執(zhí)行常規(guī)操作例如進行稀釋和培養(yǎng)等是實驗室事故發(fā)生時最常見的作業(yè)。168。 疲勞作業(yè)極有可能引發(fā)事故的發(fā)生。168。在有組織、寬敞的實驗室里工作有助于防止事故的發(fā)生。 生物安全168。在實驗期間實驗室門保持關(guān)閉狀態(tài)。168。按照操作規(guī)程使氣溶膠的產(chǎn)生降到最小。168。在生物安全區(qū)域內(nèi)不許吸煙、進食、喝飲料及貯存食物。168。