【文章內(nèi)容簡介】 ：真核生物細胞的大部分DNA并不編碼蛋白質(zhì)，大部分基因含有較長的內(nèi)含子序列，基因或基因簇被大段未知功能的序列所分割。復(fù)性動力學(xué)：這是根據(jù)序列的拷貝數(shù)不同在基因組DNA復(fù)性過程中的復(fù)性數(shù)據(jù)不同的原理，來識別不同種類的重復(fù)序列DNA的一種技術(shù)。單一序列DNA：復(fù)性最慢的DNA組分就是單一序列DNA，一般由單一拷貝基因或重復(fù)僅數(shù)次的基因組成。串聯(lián)基因簇：基因組中串聯(lián)重復(fù)數(shù)百次的某些基因或基因簇區(qū)域構(gòu)成中度重復(fù)DNA區(qū)段。分散重復(fù)DNA：中度重復(fù)DNA中的大部分由數(shù)百堿基對或15000堿基對的DNA序列構(gòu)成，每個序列重復(fù)100000多次，并分散于整個基因組中。衛(wèi)星DNA：多位于著絲粒附近，由大量串聯(lián)重復(fù)短序列組成。遺傳多態(tài)性：基因或染色體基因座上的堿基變化能使該基因座產(chǎn)生多種形式。10. 半保留復(fù)制機制（semiconservation）核心在于DNA雙螺旋中的兩條鏈都攜帶相同的信息，它們的堿基序列是互補的。這樣的復(fù)制中兩條親代鏈分開，分別作為模板指導(dǎo)酶催化的新生互補子鏈的合成，并遵循標準的堿基配對原則，兩條新生雙鏈在細胞分裂時分別進入兩個子細胞。11. 半不連續(xù)復(fù)制機制（semidiscontinuous）由于DNA的兩條鏈是反向平行的且DNA復(fù)制只能由5’3’方向進行，因此每一個復(fù)制叉中前導(dǎo)鏈由5’3’方向合成是連續(xù)的，滯后鏈是以岡崎片段的形式由5’3’方向合成，是不連續(xù)的，最后再由DNA連接酶將各個片段連接起來，這種復(fù)制方式稱為半不連續(xù)復(fù)制。這種機制的存在是因為DNA只能由5’3’方向合成。12. 闡述細菌DNA復(fù)制模式起始：復(fù)制是通過起始的速率來調(diào)控的，以及在富含AT序列處雙鏈的解旋，然后解旋酶DnaB結(jié)合上去為復(fù)制而延伸單鏈區(qū)域，DnaA酶的含量與生長速率相關(guān)。解旋：親本鏈DNA被DNA解旋酶及單鏈結(jié)合蛋白作用而解旋，產(chǎn)生的正超螺旋被拓撲異構(gòu)酶即DNA解旋酶所釋放，旋轉(zhuǎn)酶是抗生素作用的靶目標。延伸：移動著的引發(fā)體在隨后鏈上合成多個引物，DNA聚合酶III全酶的二聚體延伸前導(dǎo)鏈及后隨鏈，α亞基聚合DNA，ε亞基校正新生DNA分子，DNA聚合酶I的5’3’外切核酸酶活性切去后隨鏈上的RNA引物，聚合酶同時用DNA填補上DNA缺口中，然后DNA連接酶將后隨鏈上的岡崎片段連成一體。終止與分離：，相互連鎖的子鏈在DNA拓撲異構(gòu)酶的作用下相分離。真核生物的DNA復(fù)制:起始點與起始：在S期的不同時刻大約有2050個起始點被激活；復(fù)制叉：染色質(zhì)解組裝以復(fù)制DNA使真核生物復(fù)制叉移動減慢，并在后隨鏈上產(chǎn)生小片段；核基質(zhì)：由不溶性蛋白纖維構(gòu)成的蛋白質(zhì)支架在空間上控制復(fù)制；端粒的復(fù)制：13. 闡述真核生物端粒的復(fù)制過程滯后鏈5’端的RNA引物被切除后不能填補上DNA，使另一條鏈的3’端突出于滯后鏈的5’端，因此需要在端粒酶的作用下完成真核生物染色體末端的復(fù)制。端粒酶中含有一段DNA分子，其部分序列與3’端重復(fù)序列互補以該分子為模板，通過反復(fù)延伸與易位反復(fù)地將重復(fù)片段加到突出的3’端上，而互補鏈則像滯后鏈那樣復(fù)制，最后留下3’端出端。14. DNA復(fù)制的忠實性從哪些方面體現(xiàn)出來DNA復(fù)制的高精度依賴于模板鏈和進入核苷酸在DNA聚合酶的作用位點的正確配對。3’5’外切核酸酶對拷入堿基的校正。錯配修復(fù)。15. DNA修復(fù)機制有哪些？光活化作用（photoreactivation） 烷基轉(zhuǎn)移酶（Alkyltransferase）切割修復(fù)（exision repair） 錯配修復(fù)（mismatch repair）遺傳性的修復(fù)缺陷（hereditary repair defects）16. 原核生物轉(zhuǎn)錄過程起始：RNA聚合酶是負責(zé)轉(zhuǎn)錄的酶，它結(jié)合到被稱為啟動子的特定DNA序列上以起始RNA的合成。這些序列位于蛋白質(zhì)偏碼區(qū)的上游（5’端）含有一些短而保守的DNA序列，在不同啟動子中這些序列是相同的，RNA聚合酶結(jié)合到雙鏈DNA的啟動子序列上，引起DNA局部解旋。延伸：RNA聚合酶沿著DNA鏈移動，順次合成RNA鏈，DNA在移動的聚合酶抵達之前解旋，在其經(jīng)過之后又恢復(fù)成雙螺旋。終止：RNA聚合酶識別終止子，導(dǎo)致不再有新的核苷酸插入，該序列通常是發(fā)夾結(jié)構(gòu)。17. Sigma(σ)factor(σ因子)的功能σ因子是原核生物RNA聚合酶全酶的一個亞基，是聚合酶的別構(gòu)效應(yīng)物，幫助聚合酶專一性識別并結(jié)合模板鏈上的啟動子，起始基因轉(zhuǎn)錄。作用：與σ因子的結(jié)合使RNA聚合酶由核心酶轉(zhuǎn)變?yōu)槿?，σ因子在啟動子識別中起關(guān)鍵作用，但對轉(zhuǎn)錄延伸并不需要。σ因子是通過將核心酶對非特異序列的親和力降低10000倍，同時增加其對啟動子的親和力來幫助啟動子識別的。1啟動子識別 2熱休克 3 枯草桿菌的孢子形成 噬菌體σ因子18. 乳酸操縱子（）的結(jié)構(gòu)the structure of Lac operon.結(jié)構(gòu)：含LacZ、LacY、LacA三個結(jié)構(gòu)基因，LacZ編碼β半乳糖苷酶，LacY編碼半乳糖苷透性酶，LacA編碼硫代半乳糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶，三個結(jié)構(gòu)基因緊臨，由同一個轉(zhuǎn)錄單元LacZYA編碼，在它們上游有一個啟動子Plac；在Plac與LacZ之間有一個調(diào)控原件Olac，位于Plac5’端的5至21之間，可與乳糖阻抑物結(jié)合，當二者結(jié)合時，轉(zhuǎn)錄被抑制；在Plac上游有一個獨立的調(diào)節(jié)基因LacI，它可編碼出乳糖阻抑物；誘導(dǎo)物與阻遏物結(jié)合，改變其構(gòu)象，使之不能與調(diào)控元件結(jié)合，從而激發(fā)LacmRNA的合成。19. How are the LacZYA genes regulated ？調(diào)控： 當缺少誘導(dǎo)物時，乳糖阻抑物結(jié)合在OLac上，聚合酶結(jié)合在PLac上，阻抑物的結(jié)合增加了聚合酶與PLac的親和力，但同時阻礙了LacZYA轉(zhuǎn)錄的進行，只有很低的轉(zhuǎn)錄水平。 當乳糖存在時，細胞本身所含的少量β半乳糖苷酶使其轉(zhuǎn)化為異乳糖作為誘導(dǎo)物，結(jié)合到乳糖阻遏物上引起其構(gòu)象變化，降低其對OLac的親和力從而脫離，聚合酶開始LacZYA的轉(zhuǎn)錄，加入乳糖或合成誘導(dǎo)物如IPTG都可以使轉(zhuǎn)錄進行，若將誘導(dǎo)物清除則會導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄立即終止。 Plac是一個弱啟動子，需特定的激活蛋白即CRP的活化，且CRP要與CAMP結(jié)合形成CRPCAMP復(fù)合體才能結(jié)合到緊鄰的RNAPol上游的Plac上，CRP結(jié)合后引起DNA發(fā)生90度彎曲，增強RNAPol與啟動子結(jié)合，使轉(zhuǎn)錄提高50倍，若葡萄糖存在，會降低CAMP水平，CRP以自身二聚體形態(tài)不能與DNA結(jié)合，若葡萄糖不存在，CAMP水平升高，CRPCAMP與DNA結(jié)合，提高轉(zhuǎn)錄水平。20. The regulation of Trp operon ？結(jié)構(gòu)：含trpE、trpD、trpC、trpB、trpA五個結(jié)構(gòu)基因，編碼一個轉(zhuǎn)錄單元；結(jié)構(gòu)基因上游至trpE的基因依次為啟動子Ptrp、調(diào)控元件Otrp及前導(dǎo)序列trpL，Ptrp為DNAPol結(jié)合位點，Otrp為阻抑物復(fù)合體結(jié)合位點，trpL末端含弱化子序列，弱化子是不依賴于p因子的終止子區(qū)域；在Ptrp的不相鄰的上游序列有trpR基因，Rtrp可編碼出trp阻抑物，阻抑物要與trp結(jié)合才能有與Otrp結(jié)合的活性，其與Otrp結(jié)合后，RNAPol不能與Plac結(jié)合，阻礙轉(zhuǎn)錄發(fā)生。調(diào)控：阻抑物（粗調(diào)作用）: trpR編碼色氨酸阻抑物Atrp存在時與阻抑物結(jié)合形成復(fù)合物，與Otrp結(jié)合起阻抑作用，不含trp時，阻抑物不能結(jié)合到Otrp上，不起阻抑作用。衰減子（細調(diào)作用）：trp高時，核糖體在色氨酸密碼處插入trp，前導(dǎo)肽順利合成，封閉了序列2,3:4弱化了發(fā)夾形成，轉(zhuǎn)錄終止，只有140bp轉(zhuǎn)錄物合成。Trp低時，核糖體停滯在trp密碼處，2:3配對，不形成3：4弱化子發(fā)夾結(jié)構(gòu)，轉(zhuǎn)錄繼續(xù)。21. 三種RNA聚合酶性質(zhì)及功能RNA聚合酶I對α鵝膏蕈堿不敏感轉(zhuǎn)錄大部分rRNA的基因存在于核仁RNA聚合酶II非常敏感轉(zhuǎn)錄所有的編碼基因和一些snRNA核質(zhì)RNA聚合酶III