【正文】 克隆。包括啟動(dòng)子、上游啟動(dòng)子元件、增強(qiáng)子、加尾信號和一些反應(yīng)元件等。方向閱讀，其序列相同。該序列由特殊的RNA發(fā)卡環(huán)組成，發(fā)卡環(huán)之后還有8個(gè)連續(xù)的尿嘧啶堿基，mRNA的合成通常就在此處停止。這些片段稱岡崎片段。tRNA負(fù)載（tRNA charging）: The amino acid is joind to the tRNA by aminoacyltRNA synthetases to bae charged tRNA. This process is called tRNA charging.操縱子（Operon）：是原核生物基因表達(dá)的單位，它包括被協(xié)同調(diào)節(jié)的基因和被調(diào)節(jié)基因的產(chǎn)物所識別的調(diào)控原件, 在細(xì)菌中，為一個(gè)代謝途經(jīng)所需要的幾種酶的結(jié)構(gòu)基因，可沿DNA直線排列在一起，并受一個(gè)共同的啟動(dòng)基因和操縱基因的控制，把這樣的啟動(dòng)基因、操縱基因和結(jié)構(gòu)基因可以看做一個(gè)單位，稱為操縱子。cDNA組成特點(diǎn)是其中不含有內(nèi)含子和其他調(diào)控序列。名詞解釋基因gene：能夠表達(dá)和產(chǎn)生蛋白質(zhì)和RNA的DNA序列，是決定遺傳性狀的功能單位基因組genome：細(xì)胞或生物體的一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總和基因組文庫（genomic library）:由基因組DNA所制成的基因文庫基因文庫（Gene library）是來自某生物的不同DNA序列的總集這些序列都已被克隆進(jìn)了載體以便于純化貯存與分析。Sd序列（ShineDalgarno sequence）：原核生物mRNA起始密碼子上游813個(gè)核苷酸處的保守序列，可與核糖體小亞基中的16srRNA的339。啟動(dòng)子（Promoter）： DNA上的一個(gè)特定位點(diǎn)，RNA聚合酶在此和DNA結(jié)合，并由此開始轉(zhuǎn)錄過程。在DNA不連續(xù)復(fù)制過程中，沿著后隨鏈的模板鏈合成的新DNA片段，其長度在真核與原核生物當(dāng)中存在差別，真核生物岡崎片段長度約為100～200核苷酸殘基，而原核生物的為1000～2000核苷酸殘基。一個(gè)不依賴ρ因子的終止子區(qū)域，能夠?qū)е律彼酭NA合成提前終止的一段序列。RNA加工（RNA processing）：對初生轉(zhuǎn)錄物進(jìn)行加工的總稱。反式作用元件：是指真核細(xì)胞內(nèi)含有的大量可以通過直接或間接結(jié)合順式作用元件而調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄活性的蛋白質(zhì)因子。限制性內(nèi)切酶（restriction endonuclease）:一種在特殊核甘酸序列處水解雙鏈DNA的內(nèi)切酶。CpG甲基化：哺乳動(dòng)物中一種可能傳遞信號使得表達(dá)基因位點(diǎn)處的染色體保持適當(dāng)?shù)陌b水平的重要化學(xué)修飾是序列5’CG3’中對胞嘧啶C5的甲基化即通常所稱的CpG甲基化。DNA復(fù)性(renaturation) 變性DNA在適當(dāng)條件下又可以使兩條彼此分離開的鏈重新締合為雙螺旋結(jié)構(gòu)。著絲粒(centromere)染色體中將兩條姐妹染色單體結(jié)合起來的區(qū)域。是染色體的末端部分，這一特殊結(jié)構(gòu)區(qū)域?qū)τ诰€型染色體的結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定起重要作用。復(fù)制子(replicon) 是DNA復(fù)制是從一個(gè)DNA復(fù)制起點(diǎn)開始，最終由這個(gè)起點(diǎn)起始的復(fù)制叉完成的片段。在復(fù)制的起始位點(diǎn)具有原點(diǎn)，在復(fù)制的終止位點(diǎn)具有終點(diǎn)。編碼鏈(coding strand) 雙鏈DNA中，不能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄的那一條DNA鏈，該鏈的核苷酸序列與轉(zhuǎn)錄生成的RNA的序列一致（在RNA中是以U取代了DNA中的T），又稱有義鏈（sense strand）。轉(zhuǎn)錄單元(transcription unit) 轉(zhuǎn)錄單元是一段以啟動(dòng)子開始至終止子結(jié)束的DNA序列。核酶（Ribozyme）是具有催化功能的RNA分子,是生物催化劑。可以作為基因表達(dá)和病毒復(fù)制的抑制劑。RNA具有催化切割tRNA的能力, 蛋白質(zhì)則起間接的作用,可能是維持RNA結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。核糖體結(jié)合位點(diǎn)(ribosome binding site)是原核生物mRNA起始密碼子上游的一段序列它能夠與16SrRNA的3’端附近的互補(bǔ)序列配對，對核糖體進(jìn)行定位以便起始蛋白質(zhì)的合成。蛋白質(zhì)修飾(protein modification)新生多肽的最常見的加工是被切割及化學(xué)修飾。多蛋白(polyproteins)單一翻譯產(chǎn)物被切割形成兩個(gè)或多個(gè)獨(dú)立蛋白，則被稱為多蛋白，許多病毒產(chǎn)生多蛋白。蛋白激酶protein kinase：是指能夠?qū)⒘姿峒瘓F(tuán)從磷酸供體分子轉(zhuǎn)移到底物蛋白的氨基酸受體上的一大類酶。當(dāng)一個(gè)新基因被識別，其DNA序列被解讀問答填空1. describe the principle of is to be used to amolify a sequence of DNA using a pair of primers each plementary to one end of the DNA target : the target DNA is separated into two strands by haeting to 95’ annealing: the temperature is reduced to around 55’C to allow the primers to : the temperature is increased to 72’C for optimal polymerization step which uses up dNTPs and reuired Mg2+.2. 簡述藍(lán)白斑篩選機(jī)制某些質(zhì)粒帶有大腸桿菌的半乳糖苷酶基因片段，在半乳糖苷酶基因的基因區(qū)外又另外引入了一段含多種單一限制酶位點(diǎn)的DNA序列。3. 簡述質(zhì)粒的特性。復(fù)性動(dòng)力學(xué)：這是根據(jù)序列的拷貝數(shù)不同在基因組DNA復(fù)性過程中的復(fù)性數(shù)據(jù)不同的原理，來識別不同種類的重復(fù)序列DNA的一種技術(shù)。衛(wèi)星DNA：多位于著絲粒附近，由大量串聯(lián)重復(fù)短序列組成。11. 半不連續(xù)復(fù)制機(jī)制（semidiscontinuous）由于DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械那褼NA復(fù)制只能由5’3’方向進(jìn)行，因此每一個(gè)復(fù)制叉中前導(dǎo)鏈由5’3’方向合成是連續(xù)的，滯后鏈?zhǔn)且詫槠蔚男问接?’3’方向合成，是不連續(xù)的，最后再由DNA連接酶將各個(gè)片段連接起來，這種復(fù)制方式稱為半不連續(xù)復(fù)制。延伸：移動(dòng)著的引發(fā)體在隨后鏈上合成多個(gè)引物，DNA聚合酶III全酶的二聚體延伸前導(dǎo)鏈及后隨鏈，α亞基聚合DNA，ε亞基校正新生DNA分子，DNA聚合酶I的5’3’外切核酸酶活性切去后隨鏈上的RNA引物，聚合酶同時(shí)用DNA填補(bǔ)上DNA缺口中，然后DNA連接酶將后隨鏈上的岡崎片段連成一體。14. DNA復(fù)制的忠實(shí)性從哪些方面體現(xiàn)出來DNA復(fù)制的高精度依賴于模板鏈和進(jìn)入核苷酸在DNA聚合酶的作用位點(diǎn)的正確配對。這些序列位于蛋白質(zhì)偏碼區(qū)的上游（5’端）含有一些短而保守的DNA序列，在不同啟動(dòng)子中這些序列是相同的，RNA聚合酶結(jié)合到雙鏈DNA的啟動(dòng)子序列上，引起DNA局部解旋。作用：與σ因子的結(jié)合使RNA聚合酶由核心酶轉(zhuǎn)變?yōu)槿福乙蜃釉趩?dòng)子識別中起關(guān)鍵作用，但對轉(zhuǎn)錄延伸并不需要。 當(dāng)乳糖存在時(shí)，細(xì)胞本身所含的少量β半乳糖苷酶使其轉(zhuǎn)化為異乳糖作為誘導(dǎo)物，結(jié)合到乳糖阻遏物上引起其構(gòu)象變化，降低其對OLac的親和力從而脫離，聚合酶開始LacZYA的轉(zhuǎn)錄，加入乳糖或合成誘導(dǎo)物如IPTG都可以使轉(zhuǎn)錄進(jìn)行，若將誘導(dǎo)物清除則會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄立即終止。衰減子（細(xì)調(diào)作用）：trp高時(shí)，核糖體在色氨酸密碼處插入trp，前導(dǎo)肽順利合成，封閉了序列2,3:4弱化了發(fā)夾形成，轉(zhuǎn)錄終止，只有140bp轉(zhuǎn)錄物合成。5’與3’形成不帶環(huán)的氨基酸接受臂，接受活化氨基酸。與核糖體的結(jié)合有關(guān)。33. 原核生物和真核生物翻譯水平的調(diào)控34. 真核與原核生物的復(fù)制相同點(diǎn)與差異之處？ ①相同點(diǎn)：◆復(fù)制起始點(diǎn)都含有若干短的重復(fù)序列的獨(dú)特DNA片段；◆這些短的重復(fù)序列北多種結(jié)合蛋白所識別，這些蛋白質(zhì)在ori位點(diǎn)上的復(fù)合物對復(fù)制機(jī)構(gòu)的裝配起著關(guān)鍵的作用