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分子生物學檢驗技術教學大綱-wenkub

2023-04-19 23:13:29 本頁面
 

【正文】 的基本方法(如酵母雙雜交、凝膠滯后電泳等)了解 蛋白質的數(shù)據(jù)庫;蛋白質的醫(yī)學應用[教學時數(shù)] 3學時[講授內容] 蛋白質組的概念和特點蛋白質組的研究范疇蛋白質和蛋白質的相互作用的研究方法(酵母雙雜交、噬菌體展示、生物傳感芯片質譜、蛋白質定點誘變)蛋白質和核酸相互作用的研究方法(凝膠滯后試驗、濾膜結合法、甲基化干擾實驗、DnaseI足紋分析等)蛋白質質點的分離和鑒定(二維電泳、質譜技術等)蛋白質的結構分析蛋白質的數(shù)據(jù)庫 [復習思考題]概念蛋白質組、凝膠滯后實驗簡答題1. 蛋白質和核酸相互作用的研究方法有哪些?2. 二維電泳的基本原理是什么?3. 酵母雙雜交系統(tǒng)的原理第五章 核酸的分離和純化[目的要求] 掌握 基因組DNA的分離方法和原理;質粒DNA分離方法和原理;核酸的濃度和純度鑒定熟悉 核酸分離的基本原則;RNA抽提;mRNA的分離和純化了解 CsClEB法的原理 核酸的回收和保存[教學時數(shù)] 3學時[講授內容] 核酸抽提的原則核酸的分離、純化、濃縮、洗滌核酸的保存、濃度和純度鑒定(紫外分光光度法、熒光光度法)基因組DNA分離的原理,各試劑的主要用途DNA的回收(DEAE纖維素膜插片電泳法;電泳洗脫法;低熔點瓊脂糖凝膠回收法)質粒DNA的提取和純化(堿裂解法、煮沸法)質粒DNA的純化和回收RNA的抽提和mRNA的分離[復習思考題]問答題1. 酚氯仿法抽提基因組DNA的原理2. 質粒制備的主要方法是什么?并闡明其基本原理3. 如何鑒定核酸的濃度和純度第六章 DNA重組概述[目的要求] 掌握 基因重組的主要工具酶和它們的作用;DNA重組的主要載體和它們各自的優(yōu)點熟悉 克隆和DNA重組的概念、基因重組的基本步驟了解 基因重組的發(fā)展歷史;重組DNA技術意義[教學時敷] 3學時[講授內容] 分子生物學簡史、DNA重組技術構建和大腸桿菌轉化體系的建立。堿性磷酸酶。 了解 基因序列分析的雙脫氧鏈終止法的測序原理。其他方法。 熟悉 常用的質粒載體。[教學時數(shù)] 3學時[講授內容] 基因克隆的載體 質粒載體 (概念、要求和種類)。融合蛋白的概念以及表達融合蛋白的優(yōu)點,真核細胞表達元件,哺乳動物基因轉移的遺傳選擇性標記。表達產物的分離與純化。重組體在真核細胞中表達的策略 哺乳動物細胞表達的優(yōu)點及載體種類、真核細胞表達元件,哺乳動物基因轉移的遺傳選擇性標記、表位標記、we
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