分子生物學(xué)要點-wenkub
2023-04-22 03:17:21 本頁面
【正文】 結(jié)構(gòu)；④絕大部分為單拷貝；⑤可表達基因約50%，大于真核生物小于病毒；⑥基因一般是連續(xù)的，無內(nèi)含子；⑦重復(fù)序列很少。4周期蛋白:是一類呈細胞周期特異性或時相性表達、累積與分解的蛋白質(zhì)，它與周期素依賴性激酶共同影響細胞周期的運行。4 SD序列:轉(zhuǎn)錄出的mRNA要進入核糖體上進行翻譯，需要一段富含嘌呤的核苷酸序列與大腸桿菌16S rRNA3，末端富含嘧啶的序列互補，是核糖體的識別位點。4SSCP:單鏈構(gòu)象多態(tài)性檢測是一種基于DNA構(gòu)象差別來檢測點突變的方法。3反義RNA:堿基序列正好與有意義的mRNA互補的RNA稱為反義RNA。3基因診斷:以DNA或RNA為診斷材料，通過檢查基因的存在、結(jié)構(gòu)缺陷或表達異常，對人體的狀態(tài)和疾病作出診斷的方法和過程。3細胞癌基因:存在于正常的細胞基因組中，與病毒癌基因有同源序列，具有促進正常細胞生長、增殖、分化和發(fā)育等生理功能。3移碼突變:在編碼序列中，單個堿基、數(shù)個堿基的缺失或插入以及片段的缺失或插入等均可以使突變位點之后的三聯(lián)體密碼閱讀框發(fā)生改變，不能編碼原來的蛋白質(zhì)的突變。由于常用計算機硅芯片作為固相支持物，所以稱為DNA芯片。2原位PCR:以組織固定處理細胞內(nèi)的DNA或RNA作為靶序列，進行PCR反應(yīng)的過程。2DNA復(fù)性:當(dāng)促使變性的因素解除后，兩條DNA鏈又可以通過堿基互補配對結(jié)合形成DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)。1感染:以噬菌體、粘性質(zhì)粒和真核細胞病毒為載體的重組DNA分子，在體外經(jīng)過包裝成具有感染能力的病毒或噬菌體顆粒，才能感染適當(dāng)?shù)募毎?，并在細胞?nèi)擴增。1 蛋白磷酸酶:是具有催化已經(jīng)磷酸化的蛋白質(zhì)分子發(fā)生去磷酸化反應(yīng)的一類酶分子，與蛋白激酶相對應(yīng)存在，共同構(gòu)成了磷酸化和去磷酸化這一重要的蛋白質(zhì)活性的開關(guān)系統(tǒng)。其中由細胞分泌的調(diào)節(jié)靶細胞生命活動的化學(xué)物質(zhì)稱為細胞間信息分子；而在細胞內(nèi)傳遞信息調(diào)控信號的化學(xué)物質(zhì)稱為細胞內(nèi)信息分子。增強子:位于真核基因中遠離轉(zhuǎn)錄起始點，能明顯增強啟動子轉(zhuǎn)錄效率的特殊DNA序列。 順式作用元件:是指那些與結(jié)構(gòu)基因表達調(diào)控相關(guān)、能夠被基因調(diào)控蛋白特異性識別和結(jié)合的特異DNA序列?；蚪M:細胞或生物體的一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總和。端粒:以線性染色體形式存在的真核基因組DNA末端都有一種特殊的結(jié)構(gòu)叫端粒。包括啟動子、上游啟動子元件、增強子、加尾信號和一些反應(yīng)元件等。它可位于被增強的轉(zhuǎn)錄基因的上游或下游，也可相距靶基因較遠。1 受體:是存在于靶細胞膜上或細胞內(nèi)能特異識別生物活性分子并與之結(jié)合，進而發(fā)生生物學(xué)效應(yīng)的的特殊蛋白質(zhì)。1 基因工程:有目的的通過分子克隆技術(shù)，人為的操作改造基因，改變生物遺傳性狀的系列過程。1 轉(zhuǎn)導(dǎo):指以噬菌體為載體，在細菌之間轉(zhuǎn)移DNA的過程，有時也指在真核細胞之間通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)移和獲得細胞DNA的過程。2 退火:指將溫度降至引物的TM值左右或以下，引物與DNA摸板互補區(qū)域結(jié)合形成雜交鏈。2 定量PCR:基因表達涉及的轉(zhuǎn)錄水平的研究常需要對mRNA進行定量測定，對此采用的PCR技術(shù)就叫定量PCR。2錯義突變DNA分子中堿基對的取代，使得mRNA的某一密碼子發(fā)生變化，由它所編碼的氨基酸就變成另一種的氨基酸，使得多肽鏈中的氨基酸順序也相應(yīng)的發(fā)生改變的突變。3癌基因:是細胞內(nèi)控制細胞生長的基因，具有潛在的誘導(dǎo)細胞惡性轉(zhuǎn)化的特性。在正常細胞內(nèi)未激活的細胞癌基因叫原癌基因，當(dāng)其受到某些條件激活時，結(jié)構(gòu)和表達發(fā)生異常，能使細胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。3 RFLP:即限制性片段長度多態(tài)性，個體之間DNA的核苷酸序列存在差異，稱為DNA多態(tài)性?？梢宰鳛橐环N調(diào)控特定基因表達的手段。相同長度的單鏈DNA，如果堿基序列不同，形成的構(gòu)象就不同，這樣就形成了單鏈構(gòu)象多態(tài)性。4反義核酸技術(shù):是通過合成一種短鏈且與DNA或RNA互補的，以DNA或RNA為目標抑制翻譯的反義分子，干擾目的基因的轉(zhuǎn)錄、剪接、轉(zhuǎn)運、翻譯等過程的技術(shù)。4CAP:是大腸桿菌分解代謝物基因活化蛋白，這種蛋白可將葡萄糖饑餓信號傳遞個許多操縱子，使細菌在缺乏葡萄糖時可以利用其他碳源。真核基因組的特點:① 真核生物基因組遠大于原核生物基因組，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，基因數(shù)龐大，具有多個復(fù)制起點；②基因組DNA與蛋白質(zhì)結(jié)合成染色體，儲存于細胞核內(nèi)；③真核基因為單順 反子，而細菌和病毒的結(jié)構(gòu)基因多為多順反子；④基因組中非編碼區(qū)多于編碼區(qū)；⑤真核基因多為不連續(xù)的斷裂基因，由外顯子和內(nèi)含子鑲嵌而成；⑥存在大量的重 復(fù)序列；⑦功能相關(guān)的基因構(gòu)成各種基因家族；⑧存在可移動的遺傳因素；⑨體細胞為雙倍體，而精子和卵子為單倍體。 CAP的正性調(diào)節(jié):在啟動子上游有CAP結(jié)合位點，當(dāng)大腸桿菌從以葡萄糖為碳源的環(huán)境轉(zhuǎn)變?yōu)橐匀樘菫樘荚吹沫h(huán)境時，cAMP濃度升高，與CAP結(jié)合，使 CAP發(fā)生變構(gòu)，CAP結(jié)合于乳糖操縱子啟動序列附近的CAP結(jié)合位點，激活RNA聚合酶活性，促進結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄，調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合于操縱子后促進結(jié)構(gòu)基因的 轉(zhuǎn)錄，對乳糖操縱子實行正調(diào)控，加速合成分解乳糖的三種酶。轉(zhuǎn) 錄起始復(fù)合物的形成過程為:TFⅡD結(jié)合TATA盒；RNA聚合酶識別并結(jié)合TFⅡDDNA復(fù)合物形成一個閉合的復(fù)合物；其他轉(zhuǎn)錄因子與RNA聚合酶結(jié) 合形成一個開放復(fù)合物。⑵反式作用因子與順式作用元件的結(jié)合:反式作用因子被激活后，即可識別并結(jié)合上游啟動子元件和增強子中的保守性序列，對基因轉(zhuǎn)錄起調(diào)節(jié)作用。Grb2是作為接頭蛋白結(jié)合到受體上。Raf是MAPK級聯(lián)反應(yīng)的第一個分子，由此啟動了MAPK的三級激活過程。途徑: v受體活化G蛋白 v受體活化G蛋白vIP3 使鈣通道打開，細胞內(nèi)Ca2+升高 （九）、分子克隆中常用的工具酶及良好載體的條件？答:（1）、常用的工具酶限制性核酸內(nèi)切酶:是細菌產(chǎn)生的一類能識別和切割雙鏈DNA分子內(nèi)特定的堿基順序的核酸水解酶。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶:將脫氧核糖核酸加到DNA的3末端。 （2）、良好載體的條件如果在 多克隆位點上插入外源DNA片段，將使lac Z基因滅活，不能生成半乳糖苷酶，結(jié)果菌落出現(xiàn)白色。在DNA聚合酶作用下通過三磷酸基團摻入到延伸 的DNA鏈中，但由于沒有3’羥基，不能同后續(xù)的dNTP形成磷酸二酯鍵，因此，正在延伸的DNA鏈不能繼續(xù)延伸。雜交的雙方是待測核酸和已
化學(xué)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1