【正文】 發(fā)改變導致DNA損傷：如互變異構移位、脫氨基、堿基丟失。 1）真核生物基因組遠大于原核生物基因組，結構復雜，基因數(shù)龐大，有多個復制起點； 2）由染色體DNA和線粒體DNA組成； 3）非編碼序列多于編碼序列，編碼序列僅占3％左右； 4）存在大量重復序列； 5）結構基因多為斷裂基因，有內含子和外顯子組成； 6）轉錄產(chǎn)物為單順反子； 7）存在多基因家族和假基因； 8）體細胞為雙倍體，而精子和卵子為單倍體。 70. 基因治療：一般是指將限定的遺傳物質轉入患者特定的靶細胞，以最終達到預防或改變特殊疾病狀態(tài)為目的的治療方法。 68. 粘粒（cosmid）：是由大部分質粒序列包括復制原點、抗性標記等和噬菌體的cos粘端序列構建而成，可攜帶較長的DNA插入片段（40～50kb）。受體可分為膜受體和細胞內受體，其作用特點是：高度特異性，高親和力，可飽和性，可逆性，放大效應 66. G蛋白：即鳥苷酸結合蛋白，是由α、β、γ三個亞基構成的異源三聚體，另一類G蛋白為小分子單體G蛋白。 64. 信息分子：攜帶生物信號，在細胞之間進行傳遞的小分子化學物質。 60. DNA芯片技術：在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接將大量DNA探針以顯微打印的方式有序地固化于支持物表面，然后與標記的樣品雜交，通過對雜交信號的檢測分析，即可得出樣品的遺傳信息（基因序列及表達的信息）的技術，常用計算機硅芯片作為固相支持物。 57. 基因診斷：以DNA和RNA為診斷材料，利用現(xiàn)代分子生物學和分子遺傳學的技術和方法，直接監(jiān)測基因結構及其表達水平是否正常，從而對疾病作出診斷的方法。 54. 核酶：是一種可以催化RNA切割和RNA剪接反應的由RNA組成的酶。 52. 蛋白磷酸酶：具有催化已經(jīng)磷酸化蛋白發(fā)生去磷酸化反應的一類酶分子，與蛋白激酶相對應存在，共同構成磷酸化與去磷酸化這一重要的蛋白質活性的開關系統(tǒng)。 48. 亮氨酸拉鏈（leucine zipper）：有些反式作用因子結合DNA結構域中有一段約30個氨基酸組成的核心序列，每個6個氨基酸殘基有規(guī)律的出現(xiàn)1個亮氨酸殘基，能夠形成兩性α螺旋，一端為富含堿性氨基酸的親水的堿性區(qū)域，一端為成行亮氨酸構成的疏水區(qū)（亮氨酸拉鏈區(qū)），兩個具有亮氨酸拉鏈區(qū)的單體以疏水力相互作用就形成了亮氨酸拉鏈。） 46. 順式作用元件（cisacting element）：是指那些與結構基因串聯(lián)在一起，與結構基因表達調控相關，能夠被基因調控蛋白特異識別和結合的DNA序列。 44. 端粒（telomere）：是位于真核生物染色體末端的，由DNA和蛋白質組成的一膨出結構。 41. 感染：以噬菌體、粘粒和真核細胞病毒為載體的重組DNA分子，在體外包裝成具有感染能力的病毒或噬菌體顆粒，進而感染適當細胞并在其內擴增的過程。CDKI分為CIP/KIP家族和INK家族。 36. 周期蛋白依賴性蛋白激酶（CDK）：是一類可以與周期蛋白結合，并將周期蛋白作為其調節(jié)亞單位，進而表現(xiàn)出蛋白激酶活性的蛋白質。 33. 抑癌基因：存在于正常細胞內的一大類抑制細胞生長并具有潛在抑癌作用的基因。在正常細胞內未激活的癌基因叫原癌基因，當其受到某些條件激活時，結構和表達發(fā)生異常，能使細胞發(fā)生惡性轉化。 30. 癌基因：是細胞內控制細胞生長的基因，具有潛在的誘導細胞惡性轉化的特性。該序列能與核糖體30s小亞基中16s rRNA 3’端 2 分子生物學考試寶典（私房版） 富含…UCCU…序列互補，是核糖體特異識別和結合的部位。其兩端側翼序列是兩個反向重復序列（IS）。 22. 衰減子（attenuator）：位于一些操縱子中第一個結構基因之前的一段能夠減弱轉錄作用的DNA序列。 19. 操縱元件：是一段能夠被不同基因表達調控蛋白識別和結合的DNA序列，是決定基因表達效率的關鍵元件。 16. 功能基因組學：研究基因組中的所有基因功能的學科，是從基因整體水平上對基因的活動規(guī)律進行探討。 12. 分子克?。涸隗w外對DNA分子按照既定目的和方案進行人工重組，將重組分子導入宿主，使其在宿主中擴增和繁殖，以獲得該DNA分子的大量拷貝。 10. 反向重復序列：是指兩個順序相同的拷貝在DNA鏈上呈反向排列。 8. 微衛(wèi)星DNA：又稱為短串聯(lián)重復（STR），是一類更為簡單的寡核苷酸串聯(lián)重復序列，其重復單位為2～6bp，重復次數(shù)10～60次左右，其總長度通常小于150bp，分布在所有的染色體。 6. 非編碼區(qū)（UTR）：是位于開放閱讀框的5’端上游和3’端下游的沒有編碼功能的核苷酸序列。 2. 基因組：細胞或生物體內一套完整單倍體的遺傳物質的總和。 3. 結構基因：基因中編碼RNA或蛋白質的DNA序列，包括模板鏈和編碼鏈。其主要功能是參與翻譯起始調控，是翻譯的必需序列。微衛(wèi)星DNA因為重復單位的重復次數(shù)不同而具有高度的遺傳多態(tài)性，并且按照孟德爾遺傳規(guī)律，可以作為很好的遺傳標記。兩個反向序列間可以有間隔序列，也可以串聯(lián)在一起（回文結構）。 13. 基因工程：有目的地通過分子克隆技術，利用克隆基因表達、制備特定的蛋白質或多肽產(chǎn)物，或定向改造基因結構的系列過程。研究內容包括：基因組的表達，蛋白質產(chǎn)物的功能，基因組多樣性的研究，基因組功能注釋。 20. 啟動子：是RNA聚合酶特異識別和結合并啟動轉錄的DNA序列。 23. CAP：是大腸桿菌分解代謝物基因活化蛋白?？稍诩毦旧w、質粒和噬菌體基因組之間轉移，是細菌耐藥基因播散的機制。 27. 管家基因：在生物體生命全過程都是必須的，且在一個生物個體幾乎所有細胞都持續(xù)表達的基因。當癌基因結構或表達發(fā)生異常時，其產(chǎn)物可以使細胞無限制增殖，導致腫瘤的發(fā)生。特點：1）存在廣泛；2）高度保守；3）原癌基因是必需基因，產(chǎn)物有重要功能；4）在某些因素作用下可發(fā)生突變，成為癌基因。當這類基因發(fā)生突變、缺失或失活時，可以引起細胞惡性轉化，從而導致腫瘤的發(fā)生。 37. 周期蛋白依賴性蛋白激酶抑制蛋白（CDKI）：是對CDK激酶起負性調控作用的蛋白質。 38. 轉化（transformation）：質粒DNA或以它為載體構建的重組DNA導入細菌的過程。 42. DNA變性：在理化因素作用下DNA分子由穩(wěn)定的雙螺旋結構松解為無規(guī)則線性結構的現(xiàn)象。端粒DNA由短的高度重復序列組成，重復序列在DNA復制過程中正常復制，部分由端粒酶延伸。包括：啟動子、上游啟動元件、增強子、加尾信號和一些反應元件等。 49. 轉基因動物：是指基因組中整合有人工導入的外源基因、外源基因能夠表達并按孟德爾定律遺傳的一類動物。對蛋白質激酶所引起的變化產(chǎn)生衰減信號?？梢宰鳛榛虮磉_和病毒復制的抑制劑。 58. 核酸分子雜交：具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下按堿基互補原則退火形成雙鏈。 61. PCR/單鏈構象多態(tài)性分析（SSCP）：PCR產(chǎn)物變性后，經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳，正?；蚝妥儺惢虻挠捎跇嬒蟮牟煌蚨w移位置不同，借此可分析確定致病基因的存在，常用于點突變的檢測。又稱為第一信使。G蛋白具有結合GDP或GTP的能力，并有催化GTP成GDP的活性，廣泛存在各種組織細胞膜上，在受體和效應蛋白間起傳遞信息的作用。粘?？梢韵袷删w一樣被包裝成λ粒子。 6 分子生物學考試寶典（私房版） 問答題 一、病毒、原核、真核基因組的特點 1）病毒基因組較小，是單倍體； 2）形式多樣：病毒基因組有的是DNA，有的是RNA，但只含一種核酸。 7 分子生物學考試寶典（私房版） 二、DNA損傷因素及機制 1）形成胸腺嘧啶二聚體，影響雙螺旋結構，使復制和轉錄受阻； 2）引起DNA間交聯(lián)，DNA與蛋白質交聯(lián)，甚至DNA鏈斷裂。 ：如吖啶類化合物的插入，生物氧化的自由基與DNA發(fā)生加成和小自由基反應等。包括同源重組和非同源重組。 1）錯義突變：因為DNA分子中堿基的取代，導致轉錄翻譯后蛋白質氨基酸組成和排列順序發(fā)生改變。如果插入或缺失核苷酸是3的整數(shù)倍，合成多肽鏈就會增加或減少一個或數(shù)個氨基酸。 六、乳糖操縱子的作用機制 乳糖操縱子（lac operon）含Z、Y、A三個結構基因，分別編碼β半乳糖苷酶、透酶、乙酰基轉移酶。 在乳糖存在時，乳糖經(jīng)透酶作用進入細胞，在由β半乳糖苷酶催化生成半乳糖。 七、色氨酸操縱子的作用機制 色氨酸操縱子（trp operon）是一種阻遏型操縱子，含E、D、C、B、A五個結構基因，編碼色氨酸合成相關酶。衰減子位于結構基因E和操縱元件之間的L基因中。由于細菌轉錄翻譯偶聯(lián)，當細胞中有色氨酸時可以形成色氨酰tRNA，核糖體可迅速通過相鄰兩個色氨酸位點，封閉片段2，致使片段4 10 分子生物學考試寶典（私房版） 形成發(fā)夾結構，終止轉錄。具有鋅指結構的反式作用因子都含有幾個相同的鋅指結構，每個指結構的指尖部分可以進入DNA雙螺旋的大溝或小溝。緊靠螺旋區(qū)N端有一段富含堿性氨基酸的序列可與DNA結合。 ：真核生物RNA聚合酶識別的是由通用轉錄因子與DNA形成的蛋白質DNA復合物，只有當一個或多個轉錄因子結合到DNA上，形成有功能的啟動子，才能被RNA聚合酶所識別并結合。 ： 1）反式作用因子活性的調節(jié)：①表達調節(jié)－合成出來就有活性；②共價修飾－磷酸化、去磷酸化、糖基化；③配體結合－許多激素受體是反式作用因子；④蛋白質與蛋白質相互作用－復合物的解離與形成。 十、真核生物轉錄后水平的調控機制 ’端加帽和3’端多聚腺苷酸化：是保持mRNA轉錄過程穩(wěn)定，不被降解的重要因素。 ：高度特異性、高親和力、可飽和性、可逆性、放大效應。主要與細胞增殖、分裂、分化及癌變有關。 同時，α亞基水解GTP為GDP，然后α亞基GDP復合物重新與βγ亞基結合形成無活性的三聚體，完成一次信息傳導。 3）在Mg2+存在下，GTP取代GDP使α亞基暴露與AC結合位點，結合并激活AC。 當生長激素抑制素等與相應受體結合可結合偶聯(lián)αiG蛋白，αi亞基可直接抑制AC活性，同時游離的βγ亞基可與αs亞基結合抑制對AC的活化作用，使AC活性下降。 4）活化的Ras進而活化Raf，Raf是一種MAPKKK,可逐步激活MEK（MAPKK）→ERK1（MAPK），完成MAPK的級聯(lián)活化； 5）活化的ERK1轉位至核內，作用于一些轉錄調控因子，影響基因的表達。 十六、細胞周期的調控 細胞周期的調控主要是多蛋白參與的，針對細胞周期四個主要關卡的調控過程。細胞受到生長因子刺激→在G1中期表達cyclin D，G1晚期期表達cyclin E分別與Cdk4/6 和Cdk2形成復合物→復合物使Rb蛋白磷酸化而釋放轉錄因子E2F靶基因表達，不再依賴生長因子→通過限制點。P53可通過促進細胞周期抑制物p21蛋白的表達，阻止受損細胞通過G1S關卡。 ①G1后期開始表達cyclin B，cyclin B與Cdk1結合，在G2M轉折處，Cdk1被磷酸酶Cdc25C 去磷酸化而活化cyclinBCdk1,導致底物蛋白（組蛋白核纖層蛋白等）的磷酸化，細胞通過G2M關卡。M期的cyclinA/BCdk1可使結合在紡錘體處的APC磷酸化而活化，最終導致連接染色體的蛋白質降解。在G1中期及晚期，Cyclin DCdk4/6和Cyclin ECdk2先后磷酸化RB。 : p53蛋白是核內的轉錄因子，其一個重要的靶基因編碼p21蛋白。P53通過上述兩種途徑使細胞周期停滯，起著穩(wěn)定基因組和抑制突變細胞產(chǎn)生的作用，從而抑制腫瘤的發(fā)生。 （線粒體釋放細胞色素C的3種模式：①Bax和Bak在線粒體