分子生物學(xué)在獸醫(yī)中的應(yīng)用(編輯修改稿)
2025-02-14 00:50 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 用分子生物學(xué)技術(shù)分離中藥有效成分進(jìn)行中藥現(xiàn)代化的研究。 ? 1994年， Wilkins和 Williams首先提出了蛋白質(zhì)組?；瘜W(xué)蛋白質(zhì)組學(xué)是利用化學(xué)小分子直接從功能角度切入蛋白質(zhì)組的研究，通過化學(xué)小分子處理前后的差異蛋白質(zhì)組展示，研究蛋白質(zhì)的翻譯后修飾過程。這種研究模式為中藥對(duì)機(jī)體的作用機(jī)制提供了研究平臺(tái)。 ? 分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用于中藥藥理的研究開始于中藥單體的研究，集中于人參三醇皂苷、云芝多糖等中藥單體對(duì)細(xì)胞內(nèi)相關(guān)因子及受體 mRNA轉(zhuǎn)錄、基因表達(dá)上有調(diào)控作用。對(duì)于中藥復(fù)方的研究尚處于起步階段。我國學(xué)者曾對(duì)人參、黃芪、青蒿、淫羊藿、銀耳、靈芝等藥物對(duì)體內(nèi)重要的細(xì)胞因子 (IL— l、 IL一 IL一 IL一 TNF等 )的基因表達(dá)調(diào)控機(jī)體的免疫反應(yīng)做了探討。曹穎英等 [26 J應(yīng)用斑點(diǎn)雜交法研究表明，淫羊藿苷 (ICA)可促進(jìn)刀豆蛋白 (ConA)誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞 IL一 3 mRNA、 IL一6 mRNA的表達(dá)，其促進(jìn)作用具有一定的劑量依賴性，且它對(duì) IL一 6 mRNA表達(dá)的促進(jìn)作用優(yōu)于 IL一3 mRNA，初步闡明了 ICA促進(jìn)某些細(xì)胞因子產(chǎn)生的分子機(jī)制。王平等研究了加味溫膽湯對(duì)日本快速老化模型鼠肝細(xì)胞核活性基因的影響，結(jié)果表明，加味溫膽湯具有提高 SAM— P／ 10鼠肝細(xì)胞核活性基因水平、增強(qiáng)其轉(zhuǎn)錄活性的作用。 ? 用細(xì)胞培養(yǎng)的方法研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)方補(bǔ)益劑 (四君子湯、四物湯、八珍湯、十全大補(bǔ)湯 )對(duì)細(xì)胞生長均有顯著促進(jìn)作用，而且不同補(bǔ)益劑對(duì)同種細(xì)胞的促生長作用明顯不同，同種補(bǔ)益劑對(duì)不同細(xì)胞或同種細(xì)胞的不同生長時(shí)期作用也不完全相同。賀雙騰等運(yùn)用 No． hem雜交檢測到，加入補(bǔ)腎醒腦解毒復(fù)方中藥煎液后，感染神經(jīng)元 NGF和 BDNF表達(dá)較正常海馬神經(jīng)元明顯提高并且能持續(xù)增加，維持潛伏感染神經(jīng)元存活達(dá) lO周以上。凌云彪等 [30 J利用核素?fù)饺嗽囼?yàn)、流式細(xì)胞術(shù)觀察到，通過兩種不同途徑制備的中藥復(fù)方“肝纖方”可以抑制大鼠肝星狀細(xì)胞 (HSC)的增殖及其膠原合成。 ? 隨著中醫(yī)藥防治腫瘤研究的廣泛與深入，療效高、副作用小、多靶位、多環(huán)節(jié)抗腫瘤中藥的研制，將是未來腫瘤防治的希望。日本學(xué)者對(duì)小柴胡湯的研究發(fā)現(xiàn)，柴胡湯水溶液能誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞 KIM一 1和膽管細(xì)胞 KMC— l凋亡。而不影響正常細(xì)胞。另有日本學(xué)者報(bào)道，黃芪苷元能有效抑制撲拓異構(gòu)酶一 2的活性和 3種肝癌細(xì)胞系的增殖，并能誘導(dǎo) KIM一 1細(xì)胞發(fā)生凋亡，誘導(dǎo) HuH一 HLF細(xì)胞壞死。孫饒鴻等采用流式細(xì)胞技術(shù)發(fā)現(xiàn)消瘤飲 (根據(jù)益氣解毒抗癌的原則組成的治療腫瘤中藥方劑 )具有明顯的抑瘤作用，可促使 b娃基因表達(dá)，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。 分子生物學(xué)技術(shù)與中藥鏊定 ? 我國中藥材資源豐富，種類繁多，過去一直采用形態(tài)學(xué)分類法來鑒定中藥材。這種建立在宏觀監(jiān)測水平上的方法往往不完善，尤其是動(dòng)物藥及破碎中藥的鑒定，這也是中藥質(zhì)控的難點(diǎn)，而蛋白質(zhì)電泳法和核酸分析法作為新的分子生物學(xué)技術(shù)正在中藥鑒定中廣泛應(yīng)用。 ? 任冰如等用 RAPD技術(shù) (隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性 DNA)對(duì)南、北蒼術(shù)不同居群間的親緣關(guān)系做了鑒定，從 DNA水平上證實(shí)了南、北蒼術(shù)親緣關(guān)系很近，差異很小，從而證實(shí)了北蒼術(shù)是南蒼術(shù)的變種，而非不同種。羅志勇等 m’ 運(yùn)用 AFLP技術(shù) (擴(kuò)增片斷長度多態(tài)性法 )成功構(gòu)建出多態(tài)性豐富和重復(fù)性好的人參、西洋參指紋圖譜，并運(yùn)用計(jì)算機(jī)軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行二維圖象處理，計(jì)算出不同樣品間相似度指數(shù)，并從相似度指數(shù)發(fā)現(xiàn)西洋參與引種到我國吉林的西洋參的 DNA發(fā)生一定的變異，但變異程度小于人參與西洋參間的差異。國外學(xué)者運(yùn)用各種分子標(biāo)記法對(duì)淫羊藿屬、黃芪屬、貝母屬、栝樓屬、蒼術(shù)屬、沙參屬、紫蘇屬、天南星屬等藥用植物進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究。此外， DNA分子標(biāo)記方法還可用于中成藥質(zhì)量分析，如臺(tái)北醫(yī)學(xué)院利用 RAPD標(biāo)記技術(shù)成功檢出玉屏風(fēng)散中的白術(shù)、黃芪和防風(fēng) 3味藥材，臺(tái)灣藥物食品檢測局利用 PCR技術(shù)成功鑒別出四物湯中當(dāng)歸和中降湯中大和當(dāng)歸成分。 分子生物學(xué)技術(shù)與中藥品質(zhì)改良
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