【文章內(nèi)容簡介】 誘發(fā)血栓形成。感染的上皮細(xì)胞和吞噬了病毒的巨噬細(xì)胞可能出現(xiàn)嗜酸性胞漿內(nèi)包涵體并發(fā)生變性壞 死 。 供 應(yīng) 丘疹的血管出現(xiàn)血 管 炎 ， 血栓和梗死 無疑是而丘疹部出現(xiàn)變性和壞死的病理學(xué)基礎(chǔ)。MORPHOPATHOLOGICAL OBSERVATION OF GOAT POXXU Leren 1, YIN Zhengxing1，ZHOU Bijun 1， YU Tiade1, LE zhenzhong1（ 1 Department of Animal Medicine, Guizhou University, 550025 Guiyang2 Station for Animal Epidemic Prevention of Guizhou Provence,550003, Guiyang）Abstract Lesions of goat pox in Guizhou were observed morphopathologically. Goat pox is characterized by pox lesions on the skin, respiratory tract and gastro intestinal tract. Cutaneous eruption beginning with macules and papules give rise to nodules, followed by coagulation necrosis 11 and sloughing of nodules leaves a scar. On histological examination the early stage skin lesions are congestion, oedema and a massive cellular infiltrate by macrophages, neutrophils and as the lesion progresses, by more macrophages, lymphocytes and plasmas and some large cells so called “goat pox cells”. Intracytoplasmic inclusion bodies are present in infected cells of the dermis and these pox cells. Vasculitis is acpanied by thrombosis and infarction, causing oedema and necrosis. Epidermal changes consist of acanthosis, vacuolar degeneration, parakeratosis，hyperkeratosis and necrosis. Changes in other ans are similar, with a predominant cellular infiltration and vasculitis. But lesions in the upper respiratory tract and upper gastrointestinal tract are usully characterized by ulceration.Key words goat pox。 morphpathology注：基金項(xiàng)目：2022 年貴州省科技廳年度攻關(guān)項(xiàng)目（黔科合農(nóng)社字 20NGY8007 號） 。2022 年貴州省省長專項(xiàng)基金。作者簡介：許樂仁（1944） ，男，山東日照人，教授。研究方向：動(dòng)物病理學(xué)與動(dòng)物細(xì)胞生物學(xué)。Email: x 需圖版和參考文獻(xiàn)可向作者聯(lián)系。山羊痘病變的超微病理學(xué)觀察許樂仁，周碧君，陰正興，何光志，劉忠偉 （貴州大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)系，貴陽, 550025）摘 要 對發(fā) 生在貴州省的山羊痘 病變進(jìn)行了電鏡觀 察。在感染的皮膚和肺上皮細(xì)胞的胞 漿 內(nèi) 發(fā) 現(xiàn) 有 大 量 不 同 成熟階 段 的 典 型 的 山羊痘 病 毒 顆 粒 。病 毒 顆 粒 也 可 見 于巨噬細(xì)胞, 成纖維細(xì)胞， 血管內(nèi)皮細(xì)胞的胞 漿 內(nèi) ，甚至少量在 血 管 腔 內(nèi)。受感染的 細(xì)胞除可見胞 漿 內(nèi) 散 在 的 病 毒 顆 粒 或 形 成 病毒包涵體外，通?？梢娂?xì)胞水腫 ，線 粒 體 腫 脹 ，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高 爾 基 氏 復(fù) 合 體 擴(kuò)張。一個(gè)有趣的發(fā)現(xiàn)是，有髓神經(jīng)纖維也被病 毒 和 被 感染的巨噬細(xì)胞所波及，并可見 節(jié)段性脫髓鞘以及軸索和神經(jīng)膜細(xì)胞的變性。在山羊痘痘疹材料感 染 雞 胚 絨毛尿囊膜痘斑的上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞中也可見成熟和不成熟的的病 毒 顆 粒 。關(guān)鍵詞 山羊痘；超微病理學(xué) 12 山羊痘（goat pox）是由山羊痘病毒（goat poxvirus，GPV）引起的一種高度接觸性的地方流行性傳染病。其特征是在皮膚、呼吸道及消化道粘膜出現(xiàn)痘疹。本病的流行已有很長的歷史，現(xiàn)主要分布在北非和中非、印度次大陸和西南亞 [1]。與我國鄰近的不少國家和我國的一些地區(qū)均有本病的發(fā)生 [2]。最近貴州省的少數(shù)地區(qū)也發(fā)生了山羊痘的流行 [3]。根據(jù)典型的流行病學(xué)、臨床及病理學(xué)特征，病原學(xué)和血清學(xué)檢測，山羊痘的診斷并不困難。國內(nèi)外文獻(xiàn)雖然不少有關(guān)山羊痘病理形態(tài)學(xué)的描述 [14]，但有關(guān)本病的超微病理學(xué)研究卻比較少。本文對發(fā)生在貴州省的山羊痘病變進(jìn)行了比較詳細(xì)的透射電鏡觀察。1 材料與方法 貴州省山羊痘的流行與診斷貴州省八個(gè)縣市的一些山羊飼養(yǎng)場相繼發(fā)生一種以全身皮膚、呼吸道及消化道粘膜出現(xiàn)痘疹的傳染病。病羊發(fā)熱，眼、鼻粘 液 膿 性 分泌物顯著增多。發(fā)病率和死亡率很高 [3]。組織學(xué)檢查可見皮膚和粘膜的痘疹病灶上皮組織明顯增生，細(xì)胞呈空泡變性及凝固性壞死，并可見嗜酸性胞漿內(nèi)包涵體。病變部組織有血管炎改變并巨噬細(xì)胞和中性白細(xì)胞等炎癥細(xì)胞浸潤。肺上皮細(xì)胞化生為立方狀細(xì)胞而似腺瘤樣改變 [4]。感 染 雞 胚 絨毛尿囊膜的接種部位上出現(xiàn)灰白色大小不等的痘斑，絨毛尿囊膜顯著增厚，胚體嚴(yán)重出血。接種 BHK21 單層細(xì)胞出現(xiàn)明顯的細(xì)胞病變且這種現(xiàn)象可被山羊痘參考血清所抑制。血清學(xué)檢測結(jié)果表明，病羊痘疹材料中山羊痘抗原陽性率為 %，血清樣品中山羊痘抗體陽性率為 %[3]。結(jié)合本病典型的流行病學(xué)及臨床表現(xiàn)，確診為山羊痘。 透射電鏡技術(shù)從 4 只病羊皮膚，口鼻粘膜，肺臟和瘤胃病變部多點(diǎn)采集材料，組織塊修切至 1 mm3大小。并從接種感 染 山羊痘痘疹材料的 雞 胚 絨毛尿囊膜采集出現(xiàn)的灰白色的痘斑。材料先后經(jīng) 3%戊二醛和 1%鋨酸固定，丙酮系列脫水，環(huán)氧樹脂 618 包埋，瑞士產(chǎn) LKB5 型超薄切片機(jī)切片，硝酸鉛和醋酸鉛染色，日本產(chǎn) JEOL 2022EX 透射電鏡觀察。2 結(jié)果 13 病 毒 的 形 態(tài) 特 征在 所 檢 查 材料的 多 種 細(xì) 胞 中 ， 特 別 是 在 痘疹皮膚的上皮細(xì)胞的胞 漿 內(nèi) 發(fā) 現(xiàn) 有 大量 不 同 繁 殖 階 段 的 典 型 的 山羊 痘 病 毒 顆 粒 。 初 期 的 病 毒 顆 粒 呈卵 圓 形 ， 長 徑 大 約 為250350nm,外 膜完整或不完整，呈 C 形狀或花瓣?duì)?；中?的 病 毒 顆 粒 形 狀 和 大 小 與初 期 病 毒 相 似 ， 只 是 在 中 央 或 偏 中 央 部 位 可 見 致 密 的 類 核 體 ； 而 成熟的病毒顆 粒 致密 ， 多 呈 卵 圓 形 ， 大 小 約 為 （ 150180 nm） （ 220280 nm） ， 病 毒 顆 粒 中 央 可 見 兩面 凹 陷 呈 啞 鈴 形 的 核 酸 芯 髓 和 兩 個(gè) 側(cè) 小 體 。 鱗 狀 上皮組織的變化皮膚和瘤胃的鱗 狀 上皮細(xì)胞明顯水腫，胞 漿 稀 疏 。 線 粒 體 腫 脹 變 圓 ， 基 質(zhì) 電 子密 度 降 低 ， 嵴 變 短 或 斷 裂 變 成 小泡， 有 的 線 粒 體 明顯腫 脹 形成泡狀 物 。 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，可見小管泡狀增生。高 爾 基 氏 復(fù) 合 體 擴(kuò)張，甚至破裂解體。胞 漿 內(nèi) 有 大 量 散 在 的 多為 卵 圓 形 的 成熟病 毒 顆 粒 。 有 的 細(xì) 胞 中 可 見 到 病毒包涵體形成，包涵體內(nèi)的病 毒 漿中 有 大 量 成熟的和部分不成熟的病 毒 顆 粒 積 聚 。 個(gè) 別 細(xì) 胞 的 胞 漿 內(nèi) 可 見 角質(zhì)絲。皮下組織可見巨噬細(xì)胞和中性白細(xì)胞浸潤。巨噬細(xì)胞的線 粒 體 腫 脹 ， 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，胞漿 內(nèi)可見數(shù)量不等的病毒 顆 粒 ， 病 毒 顆 粒 也 見 于 溶 酶 體 內(nèi) 。 有時(shí)可見細(xì)胞的裂解和細(xì)菌的并發(fā)感染。 肺上皮細(xì)胞的變化肺上皮細(xì)胞水腫，胞 漿 稀 疏 , 線 粒 體 腫 脹 ， 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張。胞 漿 內(nèi) 散 在 大 量 卵 圓形 的 成熟的或不成熟的病 毒 顆 粒 。 肺上皮細(xì)胞具有 Ⅱ型肺泡細(xì)胞特征性的板層小體（lamella body）樣結(jié)構(gòu)，其 內(nèi)稀 疏 的 無 結(jié)構(gòu)基 質(zhì) 中 有 泡狀 或 管狀 物 及 正 在 形 成 的病毒顆 粒 。 有 的 細(xì) 胞 可 見 核 內(nèi)假包涵體。 毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的變化毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞腫 脹 ， 線 粒 體 腫 脹 ， 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張。胞 漿 內(nèi)可見少量病毒顆 粒 ，偶 爾 也 可 見 少量病毒顆 粒 存 在 于 血 管 腔 內(nèi)。 有髓神經(jīng)纖維的變化有髓神經(jīng)纖維可見軸索變性呈空泡狀，其內(nèi)神經(jīng)微絲和微管等細(xì)胞器結(jié)構(gòu)模糊。髓鞘板層結(jié)構(gòu)模糊，并可見節(jié)段性脫髓鞘(segmental demyelination)現(xiàn)象。神經(jīng)膜細(xì)胞腫 脹 ， 胞 漿 稀 疏 ， 線 粒 體 腫 脹 ， 溶 酶 體 增 多 。 胞 漿 中 有 少 量 病 毒 顆 粒 ， 也可見成熟的病 毒 顆 粒 游 離 于 神經(jīng)膜細(xì)胞外 。 神經(jīng)外膜和神經(jīng)內(nèi)膜之間見有巨噬細(xì)胞浸潤， 14 其內(nèi)見有大 量 病 毒 顆 粒 散 在 。 感 染 雞 胚 絨毛尿囊膜痘斑的變化雞 胚 上皮細(xì)胞明顯水腫，胞 漿 稀 疏 ， 胞 漿 內(nèi) 散 在 卵 圓 形 的 成熟病 毒 顆 粒 。 線 粒體 腫 脹 變 成 圓 形 ， 基 質(zhì) 電 子 密 度 降 低 ， 嵴 變 短 或 斷 裂 變 成 小泡， 有 的 線 粒 體 明顯腫 脹形成泡狀 物 ，甚至退變的膜性結(jié)構(gòu)形成皺紋紙樣結(jié)構(gòu)或髓鞘樣結(jié)構(gòu)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，可見小管泡狀增生。高 爾 基 氏 復(fù) 合 體 的 扁 平 囊、大泡及小泡擴(kuò)張，甚至破裂解體。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高 爾 基 氏 復(fù) 合 體 中可見不成熟的病毒顆 粒 ， 這 些 病 毒 顆 粒 似 乎 可 以 從 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高 爾 基 氏 復(fù) 合 體 突 出 而 直 接 進(jìn) 入 胞 漿 并 形 成 有 囊膜的成熟病 毒 顆 粒 。 有 的 細(xì) 胞 內(nèi)可見較豐富的張力絲束。雞 胚 成纖維細(xì)胞胞 核的核周隙不規(guī)則增寬。線 粒 體 不 同 程度 腫 脹 。 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)不規(guī)則擴(kuò)張，有時(shí)可見小管泡狀增生。胞 漿 稀 疏 ， 胞 漿 內(nèi)有成熟和不成熟的病毒顆 粒 。 細(xì)胞外膠原原纖維間質(zhì)中也可見 成熟的病毒顆 粒 。3 討論山羊痘病毒（goat poxvirus，GPV）在分類上屬痘病毒科（poxviridae ）的羊痘病毒屬（Capripoxvirus） 。是可以在宿主細(xì)胞胞 漿 中增殖的 DNA 病毒。山羊痘病毒在易感山羊群中主要通過呼吸道傳播，也可能通過皮膚粘膜損傷而感染 [5,6]。但無論通過何種途徑侵入機(jī)體，均可引起病毒血癥并在其皮膚和粘膜上皮細(xì)胞繁 殖 從 而引 起 一 系 列 的炎癥過程和特異性的痘疹病變。除皮膚和粘膜上皮細(xì)胞的病變外，病毒也可見于巨噬細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等其他細(xì)胞的胞 漿 中 [7]。有關(guān)山羊痘組織病理學(xué)變化已有不少經(jīng)典的描述 [1,2,7]。最近作者等（2022）也對貴州省發(fā)生的山羊痘進(jìn)行了比較詳細(xì)的病理形態(tài)學(xué)觀察 [4]。本研究對山羊痘病變進(jìn)行的透射電鏡觀察有助于為組織病理學(xué)變化的發(fā)生提供有力的超微病理學(xué)基礎(chǔ)，并有助于認(rèn)識山羊痘病毒感染與山羊痘病變發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性。皮膚、呼吸道及消化道粘膜出現(xiàn)痘疹和病變部上皮組織明顯增生，細(xì)胞呈空泡變性，凝固性壞死及嗜酸性胞漿內(nèi)包涵體的出現(xiàn)是山羊痘最顯著和最有證病意義的病變 [14]。在透射電鏡觀察下，上皮細(xì)胞的明顯水腫而胞 漿 稀 疏 ， 線 粒 體 腫 脹 變 成圓 形 或 形成泡 狀 物 ， 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高 爾 基 氏 復(fù) 合 體 擴(kuò)張甚至破裂解體以及胞 漿 內(nèi) 大 量 山羊痘 病 毒 顆 粒 的 存 在 是光鏡下上皮細(xì)胞空泡變性和壞死性變化的亞微基礎(chǔ)。上皮細(xì)胞中的嗜酸性胞漿內(nèi)包涵體在電鏡觀察下是病 毒 漿 中 含有 大 量 成熟的和部分不成熟的病 毒 顆 粒 積 聚 ， 很 顯 然 包涵體是痘病毒 繁 殖 復(fù) 制 和 積 聚 的 重 要 場 所 ,這 與 Murry 15 (1973)的 報(bào) 告 一 致 [7]。 大 量 病 毒 在 胞漿內(nèi)的繁 殖 與 破 壞 無 疑 是 導(dǎo) 致 和 加 重 細(xì) 胞 變性與壞死的重要因素。山羊痘病毒不但在皮膚粘膜上皮細(xì)胞和肺上皮細(xì)胞大量繁 殖 ， 而 且 也 可 見 于 巨噬細(xì)胞，成纖維細(xì)胞，血管內(nèi)皮細(xì)胞的胞 漿 內(nèi) ，甚至少量在 血 管 腔 內(nèi)。巨噬細(xì)胞在病變部組織中的浸潤顯然是在山羊痘的炎癥反應(yīng)中發(fā)揮其強(qiáng)大吞噬功能。光鏡下體積較大，形態(tài)不規(guī)則的所謂“山羊痘細(xì)胞”(goat pox cell)實(shí)際上主要是吞噬了大量痘 病 毒 顆 粒 后 發(fā) 生 變性而體積增大的巨噬細(xì)胞 [4,7]。至于光鏡下肺上皮細(xì)胞呈 立方狀而似腺瘤樣的改變 [4]，本研究在電鏡下證實(shí)是Ⅱ型肺泡細(xì)胞(typeⅡalveolar