化學發(fā)光免疫技術ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-10 09:28 本頁面
【文章內容簡介】 +2NC H 3C OORONC H 3C OOO ? 是指通過在電極表面進行電化學反應而發(fā)出 光的物質。 特點： ①反應在電極進行； ②電子供體為：三丙胺（ TPA） ③化學發(fā)光劑：三聯(lián)毗啶釕 返回 三聯(lián)毗啶釕 分子結構圖 NNNN NNR uOONOO第二節(jié) 發(fā)光酶免疫測定 （ CLEIA） 一、原理 屬于酶免疫測定的一種。只是最后一 步酶反應所用底物為發(fā)光劑，通過發(fā)光反應 發(fā)出的光在特定的儀器上進行測定。 二、技術類型 根據酶促反應底物不同可分為： 根據免疫學反應模式分 ： 熒光酶免疫測定技術反應原理圖 EEEEE 洗滌 棄上清 EE堿性磷酸酶 標記抗體抗體包被塑料微珠樣本抗原 4 M U激發(fā)熒光E 是利用理想的酶熒光底物，生成的產物穩(wěn)定并有 強的熒光強度，通過測定熒光強度進行定量。 化學發(fā)光酶免疫測定技術反應原理圖 EEEEE 洗滌 棄上清 E堿性磷酸酶 標記抗體抗體包被塑料微珠樣本抗原 AMPPDEA M P P D 發(fā)光 是利用酶對發(fā)光底物催化作用而直接發(fā)光， 通過光強度的測定而直接進行定量。 電化學發(fā)光原理圖 ? 這一過程可在電極表面周而復始地進行 ? 產生許多光子，使光信號增強 返回 激發(fā)態(tài) 不穩(wěn)定 TPA+TPARu( b p y )3+Ru(bpy)Ru(bpy)2+光子( 6 2 0 n m )●333●*基態(tài) 電極 將已包被了抗體的乳膠微 粒和待測標本加入反應杯中，經溫育一定時間 后 ,再加入 AP標記抗體，溫育 ,形成固相包被抗 體 抗原 酶標抗體復合物 技術要點 將復合物轉移到玻璃纖維上，用緩 沖液洗滌，沒結合的抗原被洗脫，酶標抗體 抗 原 膠乳微
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