化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)ppt課件-資料下載頁
2025-01-14 09:28本頁面
【正文】 亦同時(shí)使清洗及分離更 簡易、快捷。 第四節(jié) 電化學(xué)發(fā)光免疫測定技術(shù) （ ECLI） 一、原理 是一種在電極表面由電化學(xué)引發(fā)的特 異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，實(shí)際上包括了電化學(xué)和化 學(xué)發(fā)光二個(gè)過程。 ECL是電啟動發(fā)光反應(yīng)，而 CL 是通過化合物混合啟動發(fā)光反應(yīng)。用化學(xué)發(fā)光 劑三聯(lián)吡啶釕 [Ru(bpy)3]2+標(biāo)記 Ab，通過 AgAb 反應(yīng)和磁珠分離技術(shù)，根據(jù)三聯(lián)吡啶釕在電極 上發(fā)出的光強(qiáng)度對待測的 Ag或 Ab進(jìn)行定量 /定性。 二、技術(shù)類型 常用磁顆粒分離技術(shù) 同酶發(fā)光免疫測定技術(shù) 同時(shí)加入一個(gè)反應(yīng)杯中孵育反應(yīng) 技術(shù)要點(diǎn) （ SA）包被磁珠加入反應(yīng)杯中，再次 孵育，使生物素（ B）通過與親和素（ A）的結(jié)合， 將磁珠、 Ab連接為一體，形成雙 Ab夾心法。 [Ru(bpy)3]2+AbAgAbBSA磁珠 復(fù)合體吸入流動測量室，磁珠被工作電極下面的磁鐵 吸附于電極表面。同時(shí)，游離的 Ab也被吸出測量室。 TPA，電極加電壓，啟動 ECL反應(yīng)過程。 該過程在電極表面周而復(fù)始地進(jìn)行，產(chǎn)生許多光子， 光電倍增管檢測光強(qiáng)度，其與 [Ru(bpy)3]2+的濃度呈 線性關(guān)系 ,故可測出待測 Ag的含量。 原理圖 返回 抗體包被 樣本 Ru(byp)2+ TPA緩沖 的磁珠 抗原 標(biāo)記抗體 液洗滌 3 方法評價(jià) ① 標(biāo)記物的再循環(huán)利用，使發(fā)光時(shí)間更長、強(qiáng) 度更高、易于測定； ②敏感度高，可達(dá) pg／ ml或 pmol水平； ③線性范圍寬＞ 104； ④反應(yīng)時(shí)間短， 20min以內(nèi)可完成測定； ⑤試劑穩(wěn)定性好， 2～ 5℃ 可保持一年以上。 五、臨床應(yīng)用 /垂體激素 返回
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