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化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)ppt課件(已改無錯字)

2023-02-14 09:28:22 本頁面
  

【正文】 ??贵w復(fù)合物則被保留在纖維膜上。 加入 4MUP,酶標(biāo)抗體上 AP將 4MUP分解,形成 4MU,它在 360nm激發(fā)光的照 射下,發(fā)出 448nm的熒光,經(jīng)熒光儀記錄,放大, 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線由電腦計算出所測物質(zhì)的含量 : 用抗原或抗體包被磁顆粒 ,與標(biāo) 本中相應(yīng)抗原或抗體和酶標(biāo)的抗體或抗原通過 一定模式的免疫學(xué)反應(yīng)后 ,最終通過磁場將結(jié)合 酶標(biāo)記物 IC和游離酶標(biāo)記物進(jìn)行分離的技術(shù)。 分離技術(shù) : 所用顆粒是無磁性微粒子作為 抗體或抗原的包被載體 , 然后用纖維膜柱子進(jìn) 行酶標(biāo)記物的結(jié)合狀態(tài)和游離狀態(tài)的分離。 : 用聚苯乙稀等材料制成小珠 ,在 小珠上包被抗原或抗體 ,經(jīng)抗原抗體反應(yīng)后 ,將 結(jié)合狀態(tài)和游離狀態(tài)的酶標(biāo)記物進(jìn)行分離 . 第三節(jié) 化學(xué)發(fā)光免疫測定技術(shù) ( CLIA) 一、原理 用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記抗原或抗體 ,與 待測標(biāo)本中相應(yīng) Ab或 Ag、磁顆粒性的 Ag或 Ab反 應(yīng),通過磁場把結(jié)合狀態(tài)(沉淀部分)和游離 狀態(tài)的化學(xué)發(fā)光劑標(biāo)記物分離開來,然后加入 發(fā)光促進(jìn)劑進(jìn)行發(fā)光反應(yīng),通過對發(fā)光強(qiáng)度的 檢測進(jìn)行定量或定性檢測 。 二、技術(shù)類型 常用磁顆粒分離技術(shù) 同酶發(fā)光免疫測定技術(shù) 將包被 McAb的磁顆粒和待 測標(biāo)本加入到反應(yīng)管中,標(biāo)本中待測 Ag與磁珠 上 Ab結(jié)合,再加上 AE標(biāo)記 Ab,經(jīng)過溫育,形成 磁珠 AbAgAE標(biāo)記 Ab復(fù)合物。 技術(shù)要點 在電磁場中進(jìn)行 23次洗滌后,很快 地將未結(jié)合的多余 Ag和標(biāo)記 Ab洗去。 經(jīng)洗滌的磁珠中,加入 H2O2和 pH糾正液 NaOH,這時 AE不需要催化劑即分解并 發(fā)光,由集光器接收,經(jīng)光電倍增管放大,記 錄 1S內(nèi)所產(chǎn)生的光子能,其積分與被測物含量 成正比,按標(biāo)準(zhǔn)曲線,儀器可計算出被測物含量。 、化學(xué)反應(yīng)簡單、快速而無催 化劑。 方法評價 , 從而增加靈敏度 , 靈敏度可達(dá) 1015g/ml。 , 可達(dá)一年 。 ,除增大包被 面積,加快反應(yīng)外,
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