工業(yè)酶制劑——蛋白酶(編輯修改稿)
2025-02-02 03:19 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 ? 許多霉菌產(chǎn)生的酸性蛋白酶需要較大分子的底物 , 對蛋白質(zhì)的專一性較胃蛋白酶低 , 胃蛋白酶作用過的底物蛋白 , 可進一步用霉菌的酸性蛋白酶進行水解 。 ? 幾乎所有來源于霉菌的酸性蛋白酶 , 能裂解胰蛋白酶原的賴氨酸和異亮氨酸之間的肽鍵 (Lys6— Ile7), 將胰蛋白酶原激活 , 利用此特異性 , 可鑒別酸性蛋白酶制劑是來源于霉菌或其他來源 。 中性蛋白酶 ? 中性蛋白酶是最早用于酶制劑工業(yè)化生產(chǎn)的蛋白酶 , 目前的微生物生產(chǎn)的商品酶制劑的菌種主要有 : 枯草桿菌 、 耐熱解蛋白芽孢桿菌 、 灰色鏈霉菌 、 寄生曲霉 、 米曲霉 、 棲土曲霉 。 ? 除上述微生物生產(chǎn)中性蛋白酶外 , 來源于植物的木瓜蛋白酶 、 無花果蛋白酶 、 菠蘿蛋白酶等都屬于中性蛋白酶 。 一般性質(zhì) : ① 分子特性 : 大部分微生物產(chǎn)生的中性蛋白酶屬于金屬蛋白酶 , 一分子酶蛋白含有一個鋅原子 , 酶蛋白的分子量在 35,00040,000范圍 , 等電點 pI 89, 微生物蛋白酶中 , 中性蛋白酶的穩(wěn)定性最差 , 分子之間最容易發(fā)生自溶 , 即使在低溫條件下 , 也會發(fā)生明顯的自溶 , 造成分子量明顯降低 。 ② 催化特性 : 中性蛋白酶的熱穩(wěn)定性較差 , 如 枯草桿菌的中性蛋白酶在 pH7, 60℃ 處理 15min, 失活 90%。 棲土曲霉的中性蛋白酶在 pH7, 55℃處理 10min, 失活 80%以上 。 以酪蛋白為底物時 , 枯草桿菌蛋白酶的最適 pH7 熱解蛋白芽孢桿菌的中性蛋白酶的最適 pH7 棲土曲霉的中性蛋白酶 。 最適溫度受測定時的反應(yīng)時間有直接關(guān)系 , 因為酶蛋白的穩(wěn)定性較差 , 所以反應(yīng)時間的長短影響著反應(yīng)結(jié)果 , 一般在 1030min 最適溫度為 4550℃ 。 鈣離子可以增加酶蛋白的穩(wěn)定性 ,并減少自溶 。 關(guān)于中性蛋白酶的活性中心 ? 大部分微生物產(chǎn)生的中性蛋白酶的活性中心有一個鋅離子 , 鋅離子起著酶蛋白與底物之間的橋梁作用 ,有些酶蛋白還含有鈣離子 , 鈣離子具有穩(wěn)定酶蛋白空間構(gòu)象的作用 。 此外 , 鈣離子還與酶蛋白的熱穩(wěn)定性有關(guān) , 含有鈣離子的酶蛋
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