原料藥質(zhì)量研究(上海藥檢所)(編輯修改稿)
2025-02-01 22:19 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 出，加大點樣量。 (4) 主斑點如超載、“斷腰 ”，可適當減小點樣量。 (5) 顯色劑盡可能新鮮配制。 (6) 觀測時，建議增加翻轉(zhuǎn)觀測，即透過玻璃面觀測。 高效液相色譜法測定 有關物質(zhì) (1) 每批樣品配制 1份，即可。 (2) 多批樣品同時檢測時，選用粉末量最少的樣品稀釋制成自身對照溶液即可，絕對無需每一樣品均稀釋成自身對照溶液。 (3) 對照溶液連續(xù)進樣 3針，計算主峰峰面積的RSD，小于 %即認為儀器穩(wěn)定、積分無誤。取峰面積均值用于樣品雜質(zhì)峰比較。 高效液相色譜法測定 有關物質(zhì) (4) 測定空白溶劑（梯度洗脫時一定要先行測定） (5) 每一樣品進樣一針，對雜質(zhì)峰進行積分。積分時注意事項： ? 最小峰面積：設定為對照溶液主峰面積的 1/101/50（講述原理） ? 斜率與峰寬：與對照溶液積分參數(shù)相同。 ? 技巧：對照溶液稀釋后，若主峰面積呈線性（一般均呈線性），歸一化法計算結(jié)果與自身對照法測定結(jié)果基本一致（相差在 %以內(nèi)），可用歸一化直接觀測。 一、線性試驗 主成分含量測定 以測定濃度為 100% ，50%~120%之間選取 5個點即可。 溶出（釋放）度測定 以釋放量的 10%～120%間選取 5個點即可。 雜質(zhì)含量用雜質(zhì)對照品準確測定 以雜質(zhì)限度為 100% ， 50%~120%之間選取 5個點即可。 測定結(jié)果 ： 1）闡述如何看待截距和斜率、如何應用。 2）誤差在哪里，應用時的注意事項。 3）為什么沒有不成線性的？通常 C、 H、 O、N結(jié)構(gòu)，紫外監(jiān)測器決定。 個別化學鍵所致。梯度洗脫時，有時會出現(xiàn)不成線性。 4）都成線性、為何還要做？最小二乘法的原理知曉。 何種情況不呈線性？ 唑 來 磷 酸 結(jié) 構(gòu) 式 不呈線性情況 ： 1）分子結(jié)構(gòu)式怪異，如唑來膦酸。 2）梯度洗脫，所以此時規(guī)定柱效無意義。 3）主成分在色譜柱上幾乎無保留，保留時間為“死時間”（如氫溴酸右美沙芬的測定） 4）濃度過高時、檢測器或色譜柱超載。 引申使用： 1）有關物質(zhì)測定 歸一化法和自身對照法的相互妙用。 2）緩釋制劑溶出度測定，對照品濃度設定為中間濃度。舉例說明。 3）回收率試驗為何做 80%~120%即可？亦及樣品濃度與對照品濃度接近到何等程度的理解。 4）國內(nèi)只注重相關系數(shù)，不注重截距。 二、精密度試驗 重復性試驗：連續(xù)進樣 6次。 中間精密度試驗和重現(xiàn)性試驗通過“耐用性試驗中的溶液穩(wěn)定性試驗”來體現(xiàn)。 濃度極低時才會不理想，加大進樣量。 色譜峰形極為重要，對稱性、柱效等參數(shù)。加大柱溫、增加流動相中有機相比例，使被測物質(zhì)峰盡快出峰。 三、準確度試驗 用回收率來衡量 作法：在 80%~120%間選擇 3點或 5點，原因是由外標一點法決定的。 已知雜質(zhì)、且有雜質(zhì)對照品的，可采用加入法，即加樣回收率來評價。 一般情況下，只要空白輔料無干擾，回收率均是良好的！ 四、專屬性 有關物質(zhì)為主，其他檢測項目（含量）基本上均參照有關物質(zhì)。 有關物質(zhì)的驗證，采用中間體和降解產(chǎn)物（確認結(jié)構(gòu)后人工合成）來驗證與主成分的分離。 詳述強破壞試驗的宗旨與內(nèi)涵！ ● 系統(tǒng)適用性試驗用溶液配制法 在 100％濃度的主成分溶液中加入 1%濃度的雜質(zhì)對照品，以模擬樣品中有可能存在的狀態(tài)。 介紹配制方法： 先配制雜質(zhì)貯備液，再用供試品溶液（或濃的對照品溶液）來稀釋，簡便、易行！ 存在問題： 配制相同濃度，測定樣品時，主成分峰驟然加大，將雜質(zhì)峰覆蓋。 專屬性試驗驗證圖譜 ★ 強破壞試驗的目的 驗證藥品在遭遇了極端的氣候環(huán)境條件下產(chǎn)生的雜質(zhì)，在所建立的色譜條件下是否能夠分離、測定。 破壞追求的目標：可產(chǎn)生降解產(chǎn)物的條件下，主成分保留70~80%量。 同時采用 DAD 檢測主峰純度，驗證其中不含雜質(zhì)峰。 ★ 保留時間的設定 經(jīng)過上述方法學認證后，確定供試品溶液的保留時間，通常以洗脫出全部雜質(zhì)和經(jīng)強力破壞試驗出的雜質(zhì)，規(guī)定至主成分保留時間的幾倍為止。 ★ 強力破壞試驗（世界衛(wèi)生組織公布的最新方法） ※ 熱破壞 取原料，加溶劑配成 1:1溶液后，在 60℃ 放置 1~10天。 ※ 高濕破壞 取原料固體適量，放置在 75%濕度下 1~10天。 ※ 強酸破壞 取原料適量，用 :1 溶液后，放置 110天。 ※ 強堿破壞 取原料適量，用 2:1溶液后，放置 110天。 ※ 氧化破壞 取原料適量，用 3%過氧化氫溶液配制成 1:1溶 液后，放置 13天。 ※ 光解破壞 取原料適量，置紫外燈下放置 110天。 ※ 金屬離子破壞 加入 + 或 Cu2+。 四、檢測限 ● 信噪比的三倍 —— 純屬“紙上談兵”，實際測定中根本用不上。 ● 是相對值，不是絕對值。是相對于供試品溶液濃度的多少分之一而言，一般至少要在5000倍以上。 (1)最大進樣量 (2) 有關物質(zhì)測定 供試品溶液濃度、 (3)含量測定濃度 (4)有關物質(zhì)測定 自身稀釋對照溶液 濃度 (5)最低檢出限 五者間的
教學課件相關推薦
鄂ICP備17016276號-1