蛋白酶的測(cè)定方法ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-01 18:52 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 步加入 (HCl)使溶解，加蒸溜水定容至 100m1，其濃度為 1000μg/m1。 再吸取此液 10ml以蒸餾水定容至 100ml即配成100μg/m1酪氨酸镕液． 此溶液配成后也應(yīng)及時(shí)使用或放入冰箱內(nèi)保存，以免繁殖細(xì)菌而變質(zhì)。 3 操作步驟 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 （ 1） 按表配制各種不同濃度的酪氨酸溶液 (2)測(cè)定步驟 另取 6支試管按上表編號(hào)分別吸取不同濃度的酪氨酸 1ml， 各加入 ， 再加入已稀釋的福林試劑 1m1。 搖勻置于水浴鍋中 ， 40℃ 保溫發(fā)色 20min， 在波長(zhǎng)660nm處測(cè)定吸光度 。 一般測(cè) 3次 ， 取平均值 ． 以吸光度為縱座標(biāo) ， 酪氨酸的濃度為橫座標(biāo) ， 繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線 。 準(zhǔn)確稱(chēng)取蛋白酶固態(tài)發(fā)酵的濕曲 2g， 用 10－ 20ml蒸餾水 ， 30℃ 浸提 半小時(shí) ， 用濾紙 過(guò)濾 。 將濾液稀釋一定倍數(shù) (使其測(cè)定光密度在 － )。 酶液的制備 取四支試管 ， 分別加入 1ml稀釋酶液 ， 其中一支為空白管 ， 三支為平行試驗(yàn)管 ， 置入 40℃ 水浴中預(yù)熱 3－ 5min。 在三支平行試驗(yàn)管中分別加入 1ml 2% 酪蛋白溶液 ， 準(zhǔn)
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