【文章內(nèi)容簡介】 ? 臨界值血清是室內(nèi)質控血清，不是判斷陰、陽性的標準，判斷樣品不是判斷陰、陽性結果的標準是以試劑盒說明書提供的 cutoff值為標準。任何人不能隨意更改試劑盒說明書中提供的判斷陰、陽性結果的公式。 40 cut off (CO)值又稱臨界值 或陽性與陰性界限值 CO 值計算實例：（以夾心法為例） ? 1）依據(jù)試劑盒說明書規(guī)定 S/N ≥2 .1 為陽性 .（ S:樣品， N：陰性對照） 因為 S ≥ N 判斷為陽性 , 所以 S = N 為陰陽性結果分界點，即 CO值 . CO (cut off) 值 = N 當 S≥CO值時，判為陽性； SCO值時，判為陰性 ? 2）樣品結果表示法： S/CO 值 S/CO = 樣品 A值 247。 CO 值 當 S/CO ≥ 1時，判為陽性； S/CO 1 時判為陰性。 41 CO 值計算實例： ELISA抗 HBc（競爭抑制試驗） ? 依據(jù)試劑盒說明書規(guī)定： （ 1） S/N ≥ 2 .1 為陽性 . （ S: 樣本 ， N：陰性對照） 所以 S ≤ N247。 ， 判斷為陽性 , 當 S = N247。 為陰陽性結果分界點，即 CO值 . CO (cut off) 值 = N247。 當 S ≤ CO 值時，判為陽性； S CO值時，判為陰性 ? （ 2）樣品結果新表示法： S/CO 值 當 S/CO ≤ 1時，判為陽性； ， S/CO 1 時，判為陰性。 ** 每天檢驗常規(guī)樣本時帶入臨界值血清，進行每日（日間），每塊板（板間）的監(jiān)測，觀察其靈敏度，這對盒試劑的質量檢驗是十分重要的。 42 ? 每塊版放置臨界 CO值血清做試劑盒質檢是十分簡便可行的事。 試劑盒的質檢 43 五、室內(nèi)質控步驟 ? 根據(jù)英國 Whitehead的意見，室內(nèi)質控分為以下幾個階段： 最佳條件下的變異 (optimal condition variation,OCV) 常規(guī)條件下已知值質控血清的變異 (routine condition variationknown,RCVK) 常規(guī)條件下未知值質控血清的變異 (routine condition variationunknown,RCVu) 病人結果的資料統(tǒng)計應用 (statistics use of patient’s results) 44 最佳條件下的質控血清變異測定 ? 在本實驗室最佳條件下（包括操作者、試劑、儀器等）檢測質控血清 20~30次，將測得結果計算，求出該組數(shù)據(jù)的均值（ x）和標準差 (s)表示該實驗室的最佳條件下質控血清變異。 ? 舉例說明 HBsAgELISA法檢測時 OCV的測定。 45 ? 使用的質控血清 HBsAg臨界值血清。在實驗室中選擇素質最好、操作最熟練的技術員進行認真地專門測定，選用最佳的試劑盒，檢測之前應將恒溫箱、加樣器等認真校正、調試，使用新的加樣吸頭等，即在最佳、最理想地條件下進行檢測，測定陰性對照品和陽性對照品， 質控血清做雙測定 ， 得出 2個吸光值（ A值）的均值。 獲得 X1……計算 S/CO值計算，獲 20個 S/CO值。這組數(shù)據(jù)舉例見表 46 次數(shù) 質控血清 1 陰性對照品 Cutoff值 S/CO值 A值 A值 陰性 A值 1 2 181 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 47 ? 通過表 ，計算 20各質控血清的 s/co值的均值（ X），標準差（ s）和變異系數(shù)（ cv）： ? X= s= cv=% ? 從而獲得該實驗室 OCV測定數(shù)據(jù)。 48 常規(guī)條件下已知值質控血清變異 ? 做常規(guī)檢驗的技術人員，在常規(guī)檢驗的條件下，將質控血清放在常規(guī)檢測樣本中，進行20次檢驗，結果計算同 OCV法。仍以HBsAg為例，檢測 2ng/ml的質控血清，結果和計算見表 49 次數(shù) 質控血清 1 陰性對照品 Cutoff值 S/CO值 A值 A值 陰性 A值 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 50 ?通過表 ，計算 20各質控血清的 s/co值的均值（ X），標準差（ s）和變異系數(shù)（ cv）： ?X= s= cv=% ?這組數(shù)據(jù)中的 s值變異太大， s值為 3倍于 ocv的 s ，不予接受。 一般 RCV的 S值在 OCV 的 S值的兩倍范圍內(nèi)可以接受 。若太大應該查找原因，使其向 ocv 的 s值靠近。 ?在改進實驗條件后（例如校正加樣器，糾正洗板操作，調整溫育溫度等），重新進行RCVK的測定結果，其結果見標 51 次數(shù) 質控血清 1 陰性對照品 Cutoff值 S/CO值 A值 A值 陰性 A值 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 52 ?通過表 ，計算 20各質控血清的 s/co值的均值（ X），標準差（ s）和變異系數(shù)（ cv）： ?X= s= cv=% ?這組數(shù)據(jù)中的 s值變異太大， s值為 顯改善，已經(jīng)接近 ocv的 s 。符合要求。 ?如果 RCVK的值比 OCV的 S 值更小，說明OCV不是最佳條件下測定的，應重新測定OCV。 53 常規(guī)條件下未知值質控血清變異的測定 ? 有時為了避免主觀性，再做 RCVU測定。測定步驟同 RCVK，但測定的操作者不知質控血清的定值；或在操作者不知道哪一份是質控血清的條件下進行常規(guī)檢驗，以排除操作者的主觀性。在此不再舉例說明。 54 質控圖 55 次數(shù) 日（月、日） 質控血清 1 陰性對照品 Cutoff值 S/CO值 A值 A值 陰性 A值 21 22 23 24 1081 25 26 27 28 29 56 室內(nèi)質控圖示例 57 病人資料的統(tǒng)計 ? S/CO值分布統(tǒng)計 ? S/CO值分布統(tǒng)計 ? X和 S，分別做質控圖 58 統(tǒng)計學計算方法 ——“即刻法 ” 質控 （ Gribbsit法） ? ELISA有其特殊性，最合適的質控方法尚待研究建立．有些實驗室不是每天進行 ELISA項目的檢驗，而 ELISA試劑盒效期短，同一批號試劑盒連續(xù)常規(guī)測２０次，難度較大，采用即刻法質控統(tǒng)計方法，只需連續(xù)測３次，即可對第３次檢驗結果進行質控． ? 具體計算方法如下： ? （１）先將測定值從小到大排列：Ｘ １ ．Ｘ ２ ．Ｘ ３－Ｘ n（Ｘ １ 為最小值，Ｘ n為最大），總計算出Ｘ和Ｓ值． 59 ? （２）計算ＳＩ上限值和ＳＩ下限值． Ｘ最大值 X Ｓ I上限 ＝ －－－－－－－ ① Ｓ Ｘ－Ｘ最小值 Ｓ I下限 ＝