實驗一堿變性法抽提質(zhì)粒dna(編輯修改稿)
2025-06-20 01:43 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 。 ? 當在溶液體系中加入 NaAC時，溶液恢復(fù)中性，質(zhì)粒 DNA迅速復(fù)性，染色體 DNA不能恢復(fù)，形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心可以把變性的染色體 DNA和蛋白 SDS復(fù)合物沉淀分離出來 。 質(zhì)粒 DNA 細菌染色體 DNA 分子量小 分子量大 超螺旋 線性雙螺旋 三、實驗儀器、材料與試劑 （一） 儀器 1. 恒溫搖床 2. 超凈工作臺 3. 高壓滅菌鍋 4. 高速離心機 5. 微量取液器 （二） 材料 大腸桿菌 JM109（ pBR322HBV） （三） 試劑 1. LB培養(yǎng)基 2. LA培養(yǎng)基（ LB+Amp） HBV片段 pBR322HBV 四、實驗步驟 甘油保存的菌種 JM109PBR322HBV,涂布于 LA瓊脂平板 ? 37℃ ，培養(yǎng)過夜 挑取單克隆于 2ml LA液體培養(yǎng)基中 ? 37℃ ， 220rpm振蕩培養(yǎng)過夜 ? 取 EP管中 ? 12021rpm、離心 30s，棄上清 ? 重復(fù)上述步驟一次 ? 100ul溶液 I懸浮菌體（ 充分振蕩 ) ? 加入 200uL溶液 II,顛倒混勻 5次（ 輕柔 ），冰浴 3～ 5
環(huán)評公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1