【文章內(nèi)容簡介】 在羊、馬和貓也找到免疫缺陷病毒，至于如何傳播給人類的，從譜系分析尚不能得出解釋。 如果對現(xiàn)今有關(guān) SIV和 HIV的研究作仔細的探討，總結(jié)它的地理分布、蔓延的歷史、對人類和猿猴不同的致病性以及 HIV— O的存在，可以設(shè)想還有其他 HIV變異株在傳播，發(fā)現(xiàn)引起免疫 缺陷病的 HIV變異株，在 HIV1和 HIV— 2試驗陰性的病人技術(shù)上是簡單的，可以將這類變異株稱之為HIV— U，如果變異株不引起典型的臨床癥狀，其發(fā)現(xiàn)則甚困難。 結(jié)論：今后對 HIV的診斷，必須針對那些已有的或新傳播的 HIV變異株，研究確診的方法。 （ 摘自：德國醫(yī)學(xué) 第 12卷 第 3期 同濟醫(yī)科大學(xué)附屬同濟醫(yī)院 郝連杰譯） 滴金法同步檢測甲、乙、丙型肝炎病毒免疫標(biāo)志物方法學(xué)建立及評價 馬文君 目的： 建立同步檢測甲、乙、丙型肝炎病毒免疫標(biāo)志物的金免疫滲濾法 (GIFA)的實驗方法，并對其性能作評價。 方法： 采用膠體金作為免疫示蹤物 ,標(biāo)記羊抗人 IgG單克隆抗體 ,將相應(yīng)的病毒抗原 HAVAg、HBcAg及 HCVAg包被在硝酸纖維素薄膜表面 ,標(biāo)本中所含抗體與相應(yīng)的抗原結(jié)合后 ,加入金標(biāo)記抗體 ,即可在薄膜表面形成肉眼可見的紅色斑點。 結(jié)果 :自制的 GIFA紙條法檢測 645份血清標(biāo)本 ,與 ELISA、 RIA法作對比 ,符合率分別為 %、%、 %,最低檢測濃度分別為 2ng/ml、 1ng/ml、 1ng/ml。本實驗方法具有較高的特異性和靈敏度 ,操作簡便。 討論： GIFA法由于其方法的局限法 ,檢測靈敏度較 ELISA及 RIA低 ,檢測 ELISA靈敏度為,而我們的實驗表明 ,我們建立的方法檢測靈敏度在 1ng/ml以上，稍遜一籌的靈敏度可能將部分滴度較低的標(biāo)本漏判。但該方法簡便 ,不需特殊設(shè)備 ,實驗耗時較短；成本較低 ,可有效降低患者的經(jīng)濟負擔(dān) ,減輕肉體痛苦 ,三份不同標(biāo)本用同一載體 (GIFA紙片 )一次檢測即可得出 3種肝炎病毒的感 染狀況。 （摘自：現(xiàn)代診斷與治療 2020年 3月第 15卷第 3期） １８ 血清反復(fù)凍融對 HBsAg 和抗 HBs 抗體檢測的影響 徐美艷 一、引言 :對 183份血清標(biāo)本凍融前、凍融 3次、凍融 6次后的 HBsAg和抗 HBs進行了檢測和分析比較。 二、材料和方法： 材料：西京醫(yī)院門診乙肝 5項檢測血清 183份，年齡、性別、診斷不限。 方法：于初次檢測 HBsAg和抗 HBs后置 20℃過夜，連續(xù)凍融 3次、凍融 6次后分別檢測HBsAg和抗 HBs?？迫A試劑。 3次檢測用同一批號試劑，嚴格按說明書方法判斷陰陽性結(jié)果。 三、結(jié)果： HBsAg：凍融前、凍融 6次后均陽性 61份，均陰性 115份，凍融前陰性凍融 6次后陽性者 1份，凍融前陽性凍融 6次后陰性者 6份，符合率為 % 抗 HBs：凍融前和凍融 6次后均 陽性 97份，均陰性 10份，凍融前陰性凍融 6次后陽性者 2份，凍融前陽性凍融 6次后陰性者 10份，符合率為 % 四、討論： 血清反復(fù)凍融對 HBsAg的檢測沒有影響，凍融 3次和凍融 6次與凍融前相比，無論陽性率和 S/N值均無明顯差別 抗 HBs凍融 3次與凍融前沒有顯著差別，而凍融 6次后與凍融前相比，其陽性率有明顯下降，經(jīng)對凍融前和凍融 6次后抗 HBs檢測相關(guān)性進行分析，發(fā)現(xiàn)凍融 6次后和凍融前無相關(guān)性，凍融前陽性標(biāo)本 107份，而凍融 6次后下降至 99份，說明凍融對血清抗 HBs的檢測結(jié)果確有 影響， 原因尚不清楚 臨床上或血清流行病學(xué)調(diào)查研究中，血清可以放置在 20℃貯存，反復(fù)凍融將不會影響HBsAg的檢測結(jié)果；而對抗 HBs的檢測，應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融，進行多指標(biāo)檢測時，應(yīng)提前將所有試劑盒準(zhǔn)備好，短時間內(nèi)完成。 （摘自：經(jīng)驗交流 文章編號： 10002790(2020)12108401） 凍融前 凍融 3次 凍融 6次 陽性數(shù) 陽性率 S/N均值 陽性數(shù) 陽性率 S/N均值 陽性數(shù) 陽性率 S/N均值 HBsAg 67 % 64 % 62 % HBsAb 107 % 110 % 99 １９ 對乙肝“二對半”檢測中“ HBsAg 陰性 HBeAg 陽性”現(xiàn)象的分析 楊海 背景介紹： 在乙型肝炎病毒 (HBV)血清標(biāo)記物中 ,在一般情況下 ,HBeAg只出現(xiàn)于 HBsAg陽性血清中 , HBeAg是一種可溶性的蛋 白抗原 ,是完整的 HBcAg肽鏈的一部分 ,當(dāng) HBcAg被蛋白酶裂解時 ,HBeAg即游離出來分泌到外周血中 ,在血循環(huán)中與 Dane顆粒 ,出現(xiàn)時間相平行 ,與 HBV、 DNAP的消長動態(tài)也基本一致 ,而消失較早 ,是 HBV體內(nèi)復(fù)制與具有傳染性的重要指標(biāo)。而我們在用 ELISA法檢測 HBV五項血清學(xué)標(biāo)記物時 ,發(fā)現(xiàn) 6例 HBsAg陰性而 HBeAg陽性的血清。 臨床資料及方法： 6例血清均來自 1997年 3月至 1998年 8月門診收檢的疑為乙型肝炎的患者。 試劑及方法試劑盒均由上?？迫A公司提供 (ELISA),嚴格按說明書操作。 結(jié)果 6例 血清 HBeAg均為陽性 ,而其他 4項標(biāo)記物均為陰性。 HBeAg陽性的臨床意義： 作為急性乙型肝炎輔助診斷和預(yù)防的重要指標(biāo) 。 有助于確定乙肝患者、無病狀 HBV攜帶者及孕婦的傳染性強弱 。 HBeAg單獨陽性表示病毒仍在體內(nèi)復(fù)制 。 血清轉(zhuǎn)換期如用敏感方法檢測 HBeAb,可能同時陽性 ,但滴度較低。 分析： 筆者通過查閱文獻 ,及時對 6例患者的臨床資料綜合分析 ,認為以下因素可能是導(dǎo)致這一現(xiàn)象的主要原因 : 檢測方法不夠靈敏 ,HBV的檢測方法眾多 ,而近年來的臨床實驗室較普遍地采用 ELISA法 ,該方法要求血清中必須含一定量的 病毒顆粒 ,才可能顯示陽性結(jié)果 ,其靈敏度與 RIA相比 ,僅是 1/20,而現(xiàn)代發(fā)展起來的分子生物學(xué)方法 ,對病毒的敏感性更是提高了數(shù)百倍。在這 6例血清中 ,當(dāng)我們送至上級醫(yī)院用 RIA法檢測時 ,有 3例 HBsAg陽性。 血清中類風(fēng)濕因子 (RF)干擾。 RF本質(zhì)為免疫球蛋白 IgM、 IgG,在抗原性上與 HBeAg具有類似的性質(zhì) ,而 ELISA法的本質(zhì)為抗原 抗體復(fù)合反應(yīng) ,故 RF陽性的血清 ,HBV的檢測可能受到干擾 ,出現(xiàn)HBeAg假陽性。經(jīng)檢測 ,在這 6例血清中 ,有 2例 RF陽性。據(jù)報道 ,此種血清熱聚變 IgG中和 HBeAg可轉(zhuǎn)陰 ,或用 F(ab)2片段制備的酶結(jié)合物 ,也可除去 RF的干擾。由于實驗條件限制 ,此點我們未加以驗證。 ２０ HBsAg與 HBsAb形成免疫復(fù)合物而致的影響 ,機體的免疫狀態(tài)與 HBV的消長密切相關(guān)。在正常狀況下 ,HBeAg的產(chǎn)生晚于 HBsAg而消失較早。對于一些免疫功能亢進的患者 ,由于抗 HBS產(chǎn)生過早 ,中和了 HBsAg,使之無法檢測出 ,而呈現(xiàn) HBeAg陽性。 HBsAg主要以小球形顆粒存在 ,HBeAg僅存在于 Dane顆粒上 ,在 HBsAg消失與 HBsAb出現(xiàn)后 ,仍有部分 HBV遺留在血液中 ,其 Dane顆粒表面的 HBsAg被抗體包 裹 ,故檢測結(jié)果陰性。 試劑盒批間或批內(nèi)的差異 ,而致 HBeAg假陽性。由于包被試劑的純度及工藝流程等的影響 ,試劑盒本身允許有一定的假陽性 (1%～ 2%)存在 ,導(dǎo)致實驗有誤差。 有文獻報道 [3],高滴度的 HBsAg易發(fā)生假陰性 ,即鉤狀效應(yīng)或前帶現(xiàn)象 ,用生理鹽水稀釋后可排除干擾 ,我們做了 1∶ 10,1∶ 20,1∶ 100倍血清稀釋后 ,結(jié)果未變?？赡苁俏覀兊臉?biāo)本量少的緣故。 HBV是具有高度變異性的病毒 (尤其是編碼 HBsAg的基因區(qū) )為逃避人體免疫系統(tǒng)的攻擊 ,HBV經(jīng)常發(fā)生突變而使我們現(xiàn)有的方法無法檢出。 討論 ： 乙型肝 炎是危害人類健康最嚴重的傳染病之一 ,而我國乙肝患者眾多 ,預(yù)防和治療負擔(dān)都很重 ,怎樣才能盡早盡快地發(fā)現(xiàn) HBV感染或攜帶者 ,是廣大臨床實驗工作者應(yīng)予關(guān)心的問題。對 HBV研究和檢測近年來有了迅速發(fā)展 ,但仍有許多現(xiàn)象無法解釋清楚。在全國各大小醫(yī)院里 ,ELISA法以其經(jīng)濟、簡便、易于開展和掌握已成為確診乙型肝炎最直接的實驗診斷方法 ,其結(jié)果具有相當(dāng)?shù)目尚判?。但我們的發(fā)現(xiàn)說明 ,僅僅 HBsAg陰性 ,也不能認為無 HBV在體內(nèi)復(fù)制。在本報道所列舉的6例血清中 ,有 3例 HBeAg假陽性 ,而另 2例 HBsAg假陰性 ,說明體內(nèi)仍有 HBV復(fù)制。傳統(tǒng)的肝功能實驗僅檢測 HBsAg,而不檢測其他 4項 HBV標(biāo)記物 ,按照我們的發(fā)現(xiàn)來估計 ,會有相當(dāng)量的乙肝患者的漏診 ! 個人小結(jié)： 據(jù)上述文獻所報道就我公司 HBeAg項目前所出現(xiàn)的問題來分析，造成假陽性的原因是否與上述 7種原因有關(guān)，是否說明有一些假陽性是酶標(biāo)試劑所共同存在的必然結(jié)果，針對此文摘所講述的內(nèi)容并結(jié)合目前我公司 HBeAg項目存在的假陽性問題，通過系統(tǒng)調(diào)整可以解決一部分假陽性問題，那么無法解決的假陽性問題是否與上述 7種原因有關(guān)，我們的假陽性問題主要還是與原料有關(guān)，原料本身所造成的假陽性解決起來有一 定難度，是否可以找一些大量的 HBeAb強陽性的血清進行沉淀，純化，然后標(biāo)記再進行檢測，若可行的話，是否可以減少原料所造成的假陽性問題。 （摘自《臨床薈萃》 2020年第 15卷第 15期） ２１ 電化學(xué)發(fā)光與酶聯(lián)免疫檢測血清甲胎蛋白的比較 梁崴 背景介紹：目前，臨床實驗室常規(guī)檢測血清甲胎蛋白（ AFP）多采用酶聯(lián)免疫法。近年來，電化學(xué)發(fā)光免疫法以其敏感、快速、穩(wěn)定等優(yōu)點，在固相標(biāo)記免疫測定技術(shù)上居領(lǐng)先地位。為進一步了解電化學(xué)發(fā)光免疫法的特點，本文應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光免疫法與酶聯(lián)免疫法對比檢測 165 份臨床血清標(biāo)本的 AFP含量， 對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析和比較。 目 的：電化學(xué)發(fā)光與酶聯(lián)免疫檢測血清甲胎蛋白的比較 方 法： 標(biāo)本：隨機抽取 165份臨床送檢血清標(biāo)本，包括正常和異常標(biāo)本。 儀器與試劑：全自動酶免疫分析系統(tǒng) ES300 和全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)Elecsys2020 及其配套試劑，質(zhì)控品，羅氏公司提供。 方法：按儀器操作手冊，用配套試劑測定質(zhì)控品，數(shù)值在標(biāo)定值允許的變異范圍內(nèi)，繼做線性、相關(guān)性、回收率、精密度測試。 結(jié) 果： 線性：電化學(xué)發(fā)光法在 ，酶聯(lián)法在，可見電化學(xué)發(fā)光法檢測范圍更寬，更能充分滿足臨床要求。 相關(guān)性：結(jié)果表明，兩法差異無顯著性，兩法相關(guān)性良好。 回收率：用電化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)法測得平均回收率 。 精密度：結(jié)果表明，電化學(xué)發(fā)光法的重復(fù)性較酶聯(lián)法更好。見表 討 論： 電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測結(jié)果的穩(wěn)定性、靈敏度、精密度均優(yōu)于酶聯(lián)免疫法。電化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)采用電促化學(xué)發(fā)光，使用非同位素金屬三聯(lián)吡啶釕作為標(biāo)記物，由電極激發(fā) ，在三丙胺的參與下，迅速穩(wěn)定發(fā)光，使得檢測結(jié)果穩(wěn)定可靠。磁性微珠包被技術(shù)的應(yīng)用提高了檢測的靈敏度。 電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測的線性范圍更寬。電化學(xué)發(fā)光采用磁性微珠包被技術(shù)，由于磁珠體積小，可以吸附更多的抗原或抗體，同時磁珠的核心是鐵，在磁場中很快下沉，因此容易進行洗滌和固相載體分離。發(fā)光信號檢測的寬線性加上獨特的標(biāo)記物本身循環(huán)發(fā)光，使電化學(xué)發(fā)光檢２２ 測的線性范圍更寬。 試劑穩(wěn)定性好，有效期長。由于非同位素金屬三聯(lián)吡啶釕在自然環(huán)境下非常穩(wěn)定，因此用它標(biāo)記的試劑也非常穩(wěn)定。而酶聯(lián)免疫法采用酶作為標(biāo)記物，通過 顯色強度反映待測物質(zhì)的濃度，由于許多因素影響酶和底物的活性，因而試劑的穩(wěn)定性、靈敏度略顯不足。 快速進行免疫反應(yīng)，較酶聯(lián)免疫法大大縮短了時間，提高了工作效率。一次性加樣頭的使用及流動沖洗過程，徹底避免了交叉污染。 隨著檢驗醫(yī)學(xué)的飛速發(fā)展，免疫測定的新方法、新技術(shù)不斷出現(xiàn)，電化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的應(yīng)用實現(xiàn)了免疫測定的自動化，具有靈敏度高、結(jié)果穩(wěn)定、線性范圍寬、測定速度快、試劑保存期長、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點，顯示出很好的應(yīng)用前景。 （摘自：中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志 2020年 7月第 24卷第 4期） 盧龍縣戊性肝炎流行特征調(diào)查 蔡芳 為了解本地區(qū)戊型肝炎 (HE)流行特征， 1994年 5月至 1995年 4月對 1 57例散發(fā)性肝炎病人和 57例急性暴發(fā)流行的肝炎病人進行戊性肝炎的病原和流行病學(xué)調(diào)查。結(jié)果：散發(fā)性急性肝炎中戊型肝炎感染率為 %，急性爆發(fā)肝炎病人中戊肝感染率為 %，沒有顯著性差異，流行特點為散發(fā)； 31例（占 100%）戊型肝炎病人均有接觸肝炎病人史和不潔飲食史；與甲肝混合感染率高，為%；男女發(fā)病比例為 1:，發(fā)病平均年齡為 ，大于甲肝的發(fā)病年齡。發(fā)病多為 8~10月份與甲肝發(fā)病月份相似。 （摘自 ：現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué) 1997年第 24卷第 2期 唐景裕等） 369 例病毒性肝炎患者抗 HEV 的檢測與分析 蔡芳 1992 年 1月至 1992 年 12月住院的 369 例病毒性肝炎患者血清中抗 HEV 的檢出率