【正文】 日本窒素公司首先用生物技術(shù)方法工業(yè)化生產(chǎn)聚賴(lài)氨酸，同年，日本在添加劑目錄表中把εPL 歸屬于一種天然添加劑，并允許使用。因此，開(kāi)發(fā)綠色食品、有機(jī)食品成為提高經(jīng)濟(jì)效益，增加市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力，提高人民生活質(zhì)量的重要舉措。它不但對(duì)人體健康無(wú)害，有的還具有一定的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，是今后開(kāi)發(fā)的方向。 迄今為止 ε聚賴(lài)氨酸的微生物發(fā)酵 在日本已實(shí)現(xiàn)工業(yè)化，年銷(xiāo)售量為 1000 t。在ε PL 發(fā)酵生產(chǎn)中 ， 培養(yǎng)基的 pH 值通常會(huì)從最初的 6. 8 降到 36 h 后的 ， 然后 96 h 內(nèi)逐漸降到 。其中之一 (11011A)在測(cè)試管中的最大生產(chǎn)量是 mg/mL ， 是野生種 346 的 10 倍。為了提高 εPL 的生產(chǎn)力 ， Hiraki 等在 S .albulus 346 中篩選出對(duì) S2氨乙基半胱氨酸和甘氨酸 (Glycine) 有抵抗力的變種。在發(fā)酵過(guò)程中 ， εPL 的最大積累濃度開(kāi)始于 pH 值 。 εPL 作為一種濃縮膠質(zhì)溶液的交聯(lián)劑 ， 它的效力對(duì) pH 和膠質(zhì)分布有依賴(lài)性。 H[NHCH2CH2CH2CH2CHCO] nOH ε聚賴(lài)氨酸結(jié)構(gòu)式 NH2 ε聚賴(lài)氨酸帶正電 荷，可以和陰離子物質(zhì)發(fā)生結(jié)合 ； 沒(méi)有固定的熔點(diǎn)， 250℃以上開(kāi)始軟化分解 ； 易溶于水、乙醇，但不溶于乙酸乙醋、乙醚等有機(jī)溶劑 ； 能夠承受一般食品加工過(guò)程中的熱處理，熱穩(wěn)定性高， 120℃加熱 10min 仍具有抑菌活性[17]，可以隨原料一同進(jìn)行滅菌處理，防止二次污染 ； ε聚賴(lài)氨酸經(jīng) 6N HCl 酸解 24h后，測(cè)其賴(lài)氨酸的旋光度為 ＋ 176。 1． 2 物理和化學(xué)性質(zhì) ε聚賴(lài)氨酸是一種含有 25～ 30個(gè)賴(lài)氨酸殘基的同型單體聚合物多 肽 。 1． 1 ε 聚賴(lài)氨酸 1977 年日本學(xué)者 和 [1]從放線菌培養(yǎng)過(guò)濾液中提取出一種含有25～ 30 個(gè)賴(lài)氨酸殘基的同型單體聚合物。目前，國(guó)際上批準(zhǔn)使用的微生物食品防腐劑僅有乳酸鏈球菌素 (Nisin)和納他霉素 (Natamycin)。長(zhǎng)期以來(lái)，由于受到經(jīng)濟(jì)環(huán)境和開(kāi)發(fā)水平的制約，幾乎所有的食品都采用化學(xué)合成防腐劑來(lái)延長(zhǎng)食品的保質(zhì)期。 Streptomyces albulus。7H2O and gL1 K2HPO4, gL 1 glucose, g濾液通過(guò) D152 離子交換柱 (H型 )，用水和 N 醋酸洗滌，用 的鹽酸洗脫。L 1 ， 比優(yōu)化前提高了 25 %。L ZnSO4L MgSO4L 酵母粉 g微生物發(fā)酵畢業(yè)論文 題 目 : 白色鏈霉菌 PL36菌株產(chǎn)聚賴(lài)氨酸發(fā)酵條件研究 專(zhuān)業(yè) ： 生物工程 I 摘 要 ε聚賴(lài)氨酸 (εPolyLLysine)是由微生物發(fā)酵合成的一種由賴(lài)氨酸單體通過(guò) ε酞胺鍵形成的多膚。結(jié)果表明 ， 該菌株產(chǎn) εPL 的優(yōu)化培養(yǎng)基為 :葡萄糖 gL K2HPO4 g7H2O g在優(yōu)化培養(yǎng)基下 ， εPL 搖瓶產(chǎn)量達(dá)到 g離心分離發(fā)酵 ( )，調(diào)節(jié)濾液的pH值到 ， 過(guò)濾除去沉淀。 關(guān)鍵詞： ε聚賴(lài)氨酸 白色鏈霉菌 發(fā)酵條件 提取 離子交 換 II Abstract εPolyLLysine is prised of lysine linked by amide bond through microbial fermentation. It has excellent antibacterial activity against Grampositive and Gramnegative bacteria, yeast and some kinds of viruses. In additional εPolyLLysine is soluble and attractive heat stable. The fermentation medium of Streptomyces albulus producing εpolyLLysine was optimized by orthogonal experiments. The optimal medium consisted of gL1 KH2PO4, gL1 FeSO4L1with optimal medium, which increased 25% pared to initial medium. The separation and extraction of εPolyLLysine from fermentation liquid by using weak acid anionexchange resin D152 .The culture broth () was filtered and the filtrate was adjusted to . Then, the precipitate formed was removed by filtration. The filtrate was applied on a column of weak acid anionexchange resin D152 (H+from) and washed with N acetic acid and water, successively. The substance was eluted with hydrochloric acid. The eluate was neutralized with 1N sodium hydroxide and decolorized with active charcoal, and then evaporated to a small volume .The substance was precipitated as a white powder by addition of an ethanol and ether (2:1) mixture. Keywords: εPolyLLysine。由于食品的特殊性，對(duì)其防腐保鮮一直是食品研究中的重要方面。 微生物食品防腐劑是天然防腐劑中的一大類(lèi)，其是指通過(guò)微生物發(fā)酵的方法，從發(fā)酵液中提取分離得到有抑菌作用的物質(zhì)，主要為多膚類(lèi)物質(zhì)。由于這三種微生物防腐劑安全無(wú)毒、抑菌作用強(qiáng)，因此具有廣闊的應(yīng)用前景。 ε聚賴(lài)氨酸作為食品防腐劑已經(jīng)取代了 α 多 聚賴(lài)氨酸 [3]。紅外光譜分析表明 : ε聚賴(lài)氨酸在 1680～ 1640cm1和 1580～ 1520cm1有強(qiáng)吸收峰 [5]?？赡苡捎诰?賴(lài)氨酸作為賴(lài)氨酸的聚合物 ， 在酸性和堿性條件下易分解 [7]。 1． 3 聚賴(lài)氨酸的發(fā)酵生產(chǎn) 最初用野生的 S . albulus 346 進(jìn)行發(fā)酵的研究中 ， εPL 在最優(yōu)化的培養(yǎng)基中的積累濃度是 g/L。 εPL 在 pH 值 ～ 時(shí)產(chǎn)量迅速下降 ， 說(shuō) 明 S . albulus 中含有 εPL 降解酶。在對(duì) S2氨乙基半胱氨酸和甘氨酸耐受性的菌種中 ， 90% 是 εPL 的高產(chǎn)菌。 Kahar 等論證了利用 S . albulus 410 生產(chǎn)ε PL 中嚴(yán)格控制 pH 值和葡萄糖濃度的重要性 [9]。在發(fā)酵過(guò)程中 ， 發(fā)酵液的葡萄糖濃度控制在 10 g/L ， 當(dāng)葡萄糖濃度低于 10 g/L 時(shí) ， 流加碳源和氮源 (含有 80%葡萄糖和 8%硫酸銨的培養(yǎng)基 ) ， 使葡萄糖濃度維持在 10 g/L(一般在 48 h 后 ) ， 經(jīng)過(guò) 4～ 7 d 的發(fā)酵 ， εPL 的產(chǎn)率最高達(dá) g/L。天然防霉防腐劑是近年來(lái)國(guó)內(nèi)外倡導(dǎo)、開(kāi)發(fā)和尋求的新型產(chǎn)品，開(kāi)發(fā)抗菌性強(qiáng)、安全無(wú)毒的天然防霉防腐劑已成為各國(guó)科技工作者的研究熱點(diǎn)。 21 世紀(jì)是 綠色 的世紀(jì)，是追求食品安全與可持續(xù)發(fā)展的世紀(jì)。 微生物發(fā)酵畢業(yè)論文 4 至今 εPL 發(fā)酵生產(chǎn)的研究已歷經(jīng)幾十年，目前雖然 εPL 發(fā)酵生產(chǎn)已在日本實(shí)現(xiàn)工業(yè)化， εPL 作為一種天然、無(wú)毒 、可生物降解的聚氨基酸，不僅在食品工業(yè)有廣泛的應(yīng)用，而且其在醫(yī)藥、環(huán)保、農(nóng)業(yè)中的應(yīng)用也將不斷拓開(kāi)。該公司還將逐步把 εPL 的應(yīng)用拓展至纖維、化妝品及其他貨品，甚至把 εPL 作為抗菌材料用于廚房及浴室用具中。 微生物發(fā)酵畢業(yè)論文 5 2 材料與方法 2． 1 材料 菌種 白色鏈霉菌（ Streptomyces albulus） 實(shí)驗(yàn)室 保藏 菌株。 7H2O 上海第二 鋼鐵廠 MgSO4 mol/LHCl：量取 9 mL 的 36%37%濃度的 HCl 定容于 1000 mL 蒸餾水中 。 （ 6） % 磷酸溶液 量取質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 85% 的磷酸定容于 1000 mL 蒸餾水中 。 2． 2 方法 菌種的分離與純化 [11