感冒清膠囊微生物限度檢查方法驗證畢業(yè)論文-全文預覽
【正文】 32． [16]鄭俊華．生藥學 [M]．人民衛(wèi)生出版社 [17]Manik， C． D et a1． Phytochemistry,1983， 22： 1071 [18]彭潔 .中成藥中微生物限度檢查的方法學研究 .中山大學 ， 2020， 1： 16— 20 陜西科技大學畢業(yè)論文 16 16 致 謝： 在本次畢業(yè)設計論文的制作中我對 微生物限度檢查 有了 新的認識 ，雖然在制作設計的過程中遇到了一些問題，但是通過我自己翻書，上網查資料及向老師同學們請教，這些問題也得到了解決。 細菌計數回收率試驗大腸埃希菌的驗證結果可為控制菌大腸埃希菌的檢查提供參考。所以，當制劑中含有這些成分時，就要考慮是否要采取相應的措施進行應對 。三萜及其皂苷具有抗真菌活性。在進行 微生物限度檢查驗證之前，了解處方組成及簡要的工藝流程是十分重要的。在制備驗證用黑曲霉菌懸液前，首先需要從固體培養(yǎng)基上將菌苔洗下，制成儲備液，然后再稀釋。 驗證菌株黑曲霉屬于半知菌亞門曲霉菌屬。 陜西科技大學畢業(yè)論文 13 13 第三章 結 論 本試驗采用口服中成藥的常見劑型膠囊制劑 感冒清膠囊 做微生物限度檢查方法驗證， 感冒清膠囊中穿心蓮 [15]都具有抑制細菌生長的作用。 陰性對照 取生理鹽水 10ml，加入相應規(guī)定量的增菌培養(yǎng)基 (檢查大腸埃希菌用膽鹽乳糖培養(yǎng)基，大腸菌群用膽鹽乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基中 )，按藥典方法檢查。 回收率 (％ )=[(試驗組菌數．供試品對照組菌數 )／菌液組菌數 ] 100％ [大于 70％ ]結果果見表 21 表 2— 1 細菌、霉菌及酵母菌計數回收率 (％ ) 品名 批號 金黃色葡萄球菌 大腸埃希氏菌 枯草芽孢桿菌 白色念珠菌 黑曲霉 感冒清膠囊 121230 131202 陜西科技大學畢業(yè)論文 11 11 141127 控制菌檢查的方法驗證 本次驗證的均為口服制劑，需進行大腸埃希菌的檢查。 方法驗證 細菌、霉菌和酵母菌計數法回收率的測定 試驗組 取供試品溶液 lml和菌懸液 lml注入 1個滅菌平皿中，迅速倒入 15～ 20 ml 45℃左右的相應瓊脂培養(yǎng)基 (細菌用 胰酪大豆胨瓊脂 ，霉菌及酵母菌用玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基 )，每個 菌株平行做 2 個平皿，待凝。 [18] 儀器與試藥 培養(yǎng)基與試劑 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 （批號： 3103443）、瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基（批號： 3101627）、營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基（批 號： 3102516）、 胰酪大豆胨瓊脂 培養(yǎng)基（批號： 3101005） 、改良馬丁培養(yǎng)基（批號： 3101022）、改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基（批號： 202009171）、膽鹽乳糖培養(yǎng)基（批號： 3104061）、膽鹽乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基 (批號： 202007071）、 7． 0 氯化鈉．蛋白胨緩沖液 (批號： 3101597）、伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基（批號： 3102141）、 4— 甲基傘形酮葡糖甘酸培養(yǎng)基（批號： 3101426） 以上品種均購自廣州微生物環(huán)凱科技公司。 陜西科技大學畢業(yè)論文 9 9 第二章中 感冒清膠囊 微生物限度檢查 方法驗證 常規(guī)法最主要的特征是將制備好的供試品溶液 lml 加入培養(yǎng)皿后，直接加入相應培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。生長適溫 37℃，最低相對濕度為 88％，能引致水分較高的糧食霉變。該菌在孢子狀態(tài)下穩(wěn)定性好，能耐氧化、耐擠壓、耐高溫 (能長期耐 600C 高溫，在 1200C 溫度下能存活 20 分鐘 )和耐酸堿，在酸性胃環(huán)境中能保持活性，可以耐唾液和膽汁的攻擊，在適當的條件下能快速繁殖。大腸埃希菌通常作為革蘭氏陰性菌的代表。菌落計數方法的驗證通過驗證個菌 株的回收率來確認，而控制菌的檢查則通過陽性對照和陰性對照的生長情況來確定。所以，藥品中微生物檢驗時，只有在各檢測條件均適宜，即在該檢驗條件下的樣品濃度不足以抑陜西科技大學畢業(yè)論文 7 7 制污染微生物的生長，使供試品中污染的微生物狀況得以真實的反映，從而才能保證檢驗結果的科學性和準確性。例如：某些藥品供試品本身具有抑菌活性的成分、酊劑中有所含乙醇、合劑中所含的防腐劑山梨醇甲脂等，若使用簡單的常規(guī)法，很可能會出現(xiàn)假陰性的情況，這對于藥物安全性的控制是不利的。但是，由于待測供試品往往不易全分散成單個細胞，所以，長成的一個單菌落也可能來自供試品中的 2~3或更多個細胞。 平板菌落計數法是活菌計數的方法之一，也是目前國內外微生物限度檢查中最常用的方法。不同特性的供試品溶液，應采取不同的制備方法。然而無論具體的操作步驟有什么不同，對于含抑菌成分的原料或制劑，最先需要處理的是消除其抑菌作用。細菌數的檢查方法有多種，如平皿法、薄膜過濾法、涂抹法、 MPN 法。本菌為革蘭氏染色陽性菌，大多數為專性厭氧。 梭菌 梭菌屬是在自然界分布廣泛的一類微生物，主要存在于土壤、海水和淡水的沉積物中。本菌廣泛分布于自然界中，對人和動物植物均可造成危害。 [12]如金黃色葡萄球菌，可引起多種嚴重感染，通常作為革蘭氏陽性菌的代表。 金黃色葡萄球菌 葡萄球菌是最常見 的化膿性球菌， 80％的化膿性感染由它引起。我國藥典采用 MPN(Most Probable Number)測定法檢查大腸菌群。 大腸菌群 大腸菌群是指在 37℃生長時能發(fā)酵乳糖， 24 小時內產酸產氣的革蘭氏陰性、氧化酶陰性、需氧或厭氧的無芽孢桿菌。該菌常作為糞便污染的指示菌，它是腸桿科系各族細菌中從各種溫血動物的腸道檢出率最高的菌種。霉菌及酵母菌測定的方法很多，最常用的是平板菌落計數法。藥品細菌數測定是活菌計數，最常用也是我國藥典收載的使用的方法是平板法。 微生物限度檢查的主要內容 微生物限度檢查主要包括染菌量的檢查和控制菌的檢查兩個方面： 定量檢查 染菌量的檢查測定單位重量 (g)、單位容積 (m1)和單位面積 (cm2)藥品中的細菌數及真菌數 (霉菌和酵母菌數 )。在《中國藥典》 2020 年版 [6]中重新對丸劑、片劑、散劑、膠囊劑以及以含發(fā)酵類藥材為原料的制劑修訂了微生物限度標準。在調查研究并積累大量數據后，
黨政相關相關推薦
鄂ICP備17016276號-1