食品安全現(xiàn)代生物檢測技術(shù)-全文預(yù)覽
【正文】 且滿足兩個前提條件： ? 待檢測的抗原或抗體能夠結(jié)合到不溶性載體表面并保持活性； ? 標(biāo)記酶能與抗原或抗體結(jié)合并同樣 保持各自生物活性。目的主要通過導(dǎo)入外源基因或?qū)ψ陨砘蚣右孕揎梺硎故荏w動物降低結(jié)締組織交聯(lián)度、改善肉質(zhì)．或使受體生物個體肥大，或生產(chǎn)營養(yǎng)價值高的蛋、肉、乳等。 ? （ 5） DNA序列分析 ? 第三節(jié) 轉(zhuǎn)基因食品的檢測技術(shù) ? 一、概述 ? 轉(zhuǎn)基因食品又稱遺傳修飾食品（ geically modified food），簡稱 GMF或 GM食品。 ? ? ? ? ? （四）常見的 PCR種類 ? PCR ? PCR ? PCR ? PCR的 DNA指紋圖譜技術(shù) ? ? ? DNA多態(tài)性（ RAPD） ? DNA介導(dǎo)的 PCR技術(shù) ? （ REP）和基因內(nèi)重復(fù)性一致序列（ ERIC）的擴增 ? （ AFLP） ? （ RFLP） ? RNA病毒檢測的核酸擴增技術(shù) ? （五） PCR技術(shù)用于檢測的主要步驟 ? （ 1）運用化學(xué)手段對目標(biāo) DNA進行提取。 ? （一） PCR原理 ? PCR是依據(jù) DNA模板的特性，模仿體內(nèi)的復(fù)制過程，在體外合適的條件下以單鏈 DNA為模板，以人工設(shè)計和合成的寡核苷酸為引物，利用熱穩(wěn)定的 DNA聚合酶延 5’3’方向摻人單核苷酸來特異性的擴增 DNA片段的技術(shù)。 ? 1 雙抗體夾心法測抗原 ? 2 雙抗原夾心法測抗體 ? 3 間接法測抗體 ? 4 競爭法測抗體 ? 5 競爭法測抗原 ? （三） ELISA的材料與試劑 ? 完整的 ELISA試劑盒包含以下各組分：已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；酶的底物；陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測定中）；結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；洗滌液；酶反應(yīng)終止液。這一方法的基本原理如下。一個成功的免疫測定法必須具備 3個要素：性能優(yōu)良的抗體、靈敏和專一性的標(biāo)記物和高效的分離手段。在此基礎(chǔ)上結(jié)合一些生化或理化方法作為信號顯示或放大系統(tǒng)即可建立免疫測定法，如放射免疫測定法、酶免疫測定法、熒光免疫測定法等。 ? 目前最常用的免疫學(xué)檢測技術(shù)如下： ? （ 1）放射免疫測定技術(shù) ? （ 2）酶免疫測定技術(shù) ? （ 3）熒光免疫測定技術(shù) ? （ 4）發(fā)光免疫測定技術(shù) ? （ 5）膠體金免疫測定技術(shù) ? 二、酶聯(lián)免疫吸附試驗 (ELISA) ? （一） ELISA的基本原理 ? ELISA(EnzymeLinked immunosorbent assay)的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。用于臨床檢驗的 ELISA主要有以下幾種類型。這些技術(shù)顯示出了巨大的潛力，發(fā)揮著越來越大的作用，也正因為如此它們被譽為 20世紀(jì) 80年代分子生物學(xué)革命和生物技術(shù)的飛躍。下面介紹 PCR反應(yīng)中的一些具體參數(shù)。 ? （ 4）克隆并篩選鑒定 PCR產(chǎn)物，將擴增產(chǎn)物進行電泳、染色，在紫外光照射下可見擴增特異區(qū)段的 DNA帶．根據(jù)該帶的不同即可鑒定不同的 DNA。 ? （ 2）轉(zhuǎn)基因動物食品 如轉(zhuǎn)基因的魚、雞、牛、羊等。 ? （ 一） ELISA技術(shù)與轉(zhuǎn)基因食品檢測 ? ? 建立在抗體抗原
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