【正文】 整個(gè)臨床試驗(yàn)過(guò)程中遵循預(yù)定的方案實(shí)施，不可隨意改動(dòng)。 （ 1）應(yīng)在至少兩家經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局備案的臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)開展臨床試驗(yàn)。適于冷凍保存的樣本還應(yīng)對(duì)凍融次數(shù)進(jìn)行研究。試劑穩(wěn)定性主要包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性（有效期）、運(yùn)輸穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性等研究，申請(qǐng)人可根據(jù)實(shí)際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。 （五）參考區(qū)間確定資料參考區(qū)間確定所采用的樣本來(lái)源、確定方法及詳細(xì)的試驗(yàn)資料。 在實(shí)施方法學(xué)比對(duì)前，應(yīng)分別對(duì)擬申報(bào)試劑和對(duì)比試劑進(jìn)行初步評(píng)估，只有在確認(rèn)兩者都分別符合各自相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)后方可進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)。每個(gè)濃度重復(fù) 3 份，對(duì)鉤狀效應(yīng)進(jìn)行合理的驗(yàn)證。 （ 2）干擾物質(zhì)：樣本中常見(jiàn)干擾物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，如高脂、黃疸、類風(fēng)濕因子、嗜異性抗體等干擾因子對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。 （ 1）批內(nèi)精密度：同一批次的測(cè)定試劑對(duì)線性范圍內(nèi)的 3 個(gè)濃度的質(zhì)控品或樣本進(jìn)行重復(fù)檢測(cè) 10 次，計(jì)算 10 次測(cè)量結(jié)果的平均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差（ SD），根據(jù)公式 CV=SD/ 100%得出變異系數(shù)。 也可以采用高濃度樣本稀釋的方法驗(yàn)證線性，將接近線性區(qū)間上限的高值樣本按一定比例稀釋為至少 5 個(gè)濃度，其中低值濃度的樣本須 接近線性區(qū)間的下限。建立一種定量測(cè)定方法的線性范圍時(shí)，需在預(yù)期測(cè)定范圍內(nèi)選擇 7— 11 個(gè)濃度水平。 （國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品）的偏差分析。 （四）分析性能評(píng)估資料企業(yè)應(yīng)提交產(chǎn)品研制階段進(jìn)行的所有性能驗(yàn)證的研究資料，包括具體研究方法、質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、統(tǒng)計(jì)分析等詳細(xì)資料。固相載體、信號(hào)放大系統(tǒng)、酶作用底物等的介紹及研究資料。 ：申請(qǐng)人應(yīng)考慮反應(yīng)模式、反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)溫度、洗滌次數(shù)等條件對(duì)產(chǎn)品性能的影響，通過(guò)試驗(yàn)確定上述條件的最佳組合。反應(yīng)體系主要包括：反應(yīng)條件、樣本用量、試劑用量等確定的依據(jù) 。 、質(zhì)控品（如有）的原料選擇、制備、定值過(guò)程及試驗(yàn)資料。應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局令第 5 號(hào)）和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局公告 2021年第 44 號(hào)）的相關(guān)要求。無(wú)論 1 型或 2 型糖尿病患者，初病時(shí)都應(yīng)通過(guò)檢測(cè) C肽或胰島素水平以判斷胰島β細(xì)胞功能。 C肽是由 31 個(gè)氨基酸組成的連接肽，分子量約 3021道爾頓。 二、注冊(cè)申報(bào)資料要求（一）綜述資料 C肽（ CPeptide）又稱連接肽，是胰島β細(xì)胞的分泌產(chǎn)物，它與胰島素有一個(gè)共同的前體─胰島素原。 一、適用范圍 C肽測(cè)定試劑是指利用抗原抗體反應(yīng)的免疫學(xué)方法對(duì)人血清、血漿或其他體液中的 C肽（ CPeptide）進(jìn)行體外定量檢測(cè)的試劑。 本指導(dǎo)原則是對(duì) C肽測(cè)定試劑的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。 本指導(dǎo)原則是供申請(qǐng)人和審查人員使用的指導(dǎo)文件，不涉及注冊(cè)審批等行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料。本指導(dǎo)原則適用于以酶標(biāo)記、（電）化學(xué)發(fā)光標(biāo)記、（時(shí)間分辨）熒光標(biāo)記等標(biāo)記方法標(biāo)記抗體，以微孔板、管、磁顆粒、微珠和塑料珠等為載體包被抗體，定量檢測(cè) C肽的免疫分析試劑，不適用于以膠體金或其他方法標(biāo)記的定性或半定量測(cè)定的 C肽試劑、用放射性同位素標(biāo)記的各類放射免疫或免疫放射測(cè)定試劑。一個(gè)分子的胰島素原經(jīng)酶切后，裂解成一個(gè)分子的胰島素和一個(gè)分子的 C肽。 C肽本身無(wú)生物活性，由于胰島素和 C肽是以等摩爾濃度分泌的，進(jìn)入血液后，大部分胰島素經(jīng)肝臟被滅活，而 C肽被肝臟攝取很少，加上 C肽降解速度比胰島素慢，所以血液中 C肽濃度比胰島素高，一般在 5 倍以上，故 C肽更能準(zhǔn)確反映胰島β細(xì)胞的功能。由于外周血中 C肽被肝細(xì)胞攝取少，更能反映胰島β細(xì)胞分泌時(shí)濃度，加之其基礎(chǔ)清除率穩(wěn)定，不受多種因素影響，故 C肽釋放試驗(yàn)曲線下面積優(yōu)于胰島素釋放試驗(yàn)，更能代表胰島β細(xì)胞功能。 （二）主要原材料研究資料（如需提供） 劑所用抗體的制備、篩選、純化以及鑒定等詳細(xì)試驗(yàn)資料。 GB/T21415— 2021/ISO17511： 2021《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測(cè)量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性》提供所用校準(zhǔn)品的來(lái)源、賦值過(guò)程和相應(yīng)指標(biāo)、以及不確定度等內(nèi)容。 ，可以流程圖方式表示，并簡(jiǎn)要說(shuō)明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。 ：申請(qǐng)人應(yīng)考慮樣本加樣方式、加樣量以及試劑添加順序、添加量對(duì)產(chǎn)品 檢測(cè)結(jié)果的影響，通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定最佳的樣本及試劑的添加方式和添加量。 （如適用）如果試劑盒適用樣本類型包括血漿樣本，應(yīng)采用各種抗凝劑抗凝的血漿樣本分別與血清樣本進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)研究。建議選擇不少于 3批產(chǎn)品對(duì)以下分析性能進(jìn)行研究，包括空白限、線性、準(zhǔn)確度、精密度、特異性等指標(biāo)，具體研究方法建議參考相關(guān)的美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)批準(zhǔn)指南（ CLSI— EP）或國(guó)內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評(píng)估的文件進(jìn)行。將參考物質(zhì)配制成指定濃度的準(zhǔn)確度樣品進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算相對(duì)偏差。例如，將預(yù)期測(cè)定范圍加寬至 130%，在此范圍內(nèi)選擇更多的濃度水平，然后依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果逐漸減少數(shù)據(jù)點(diǎn)直至表現(xiàn)出線性關(guān)系，確定線性范圍。將測(cè)定濃度的平均值與理論濃度或稀釋比例用最小二乘法進(jìn)行直線擬合，并計(jì)算線性相關(guān)系數(shù) r。 （ 2）批間精密度：用不少于 3 個(gè)批次的 測(cè)定試劑對(duì)線性范圍內(nèi)的3 個(gè)濃度的質(zhì)控品或樣本各重復(fù)檢測(cè) 10 次，計(jì)算 3 批測(cè)量結(jié)果的平均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差（ SD），根據(jù)公式 CV=SD/ 100%得出變異系數(shù)。如無(wú)法獲得含有高濃度干擾物質(zhì)的樣本，可采用純品物質(zhì)分別添加到健康人樣本、參考區(qū)間附近樣本、中濃度值樣本中的方式進(jìn)行驗(yàn)證。建議在產(chǎn)品說(shuō)明書上明示對(duì)鉤狀效應(yīng)的研究結(jié)果。方法學(xué)比對(duì)時(shí)應(yīng)注意質(zhì)量控制、樣本類型、濃度分布范圍并對(duì) 結(jié)果進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。樣本來(lái)源覆蓋年齡、性別等因素，盡可能考慮樣本來(lái)源的多樣性、代表性。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實(shí)施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。 試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內(nèi)容的研究結(jié)果應(yīng)在說(shuō)明書【儲(chǔ)存條件及有效期】和【樣本要求】?jī)身?xiàng)中分別進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。 （ 2）臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)應(yīng)有能力提供臨床試驗(yàn)所需的各類樣本，實(shí)驗(yàn)操作人員有足夠的時(shí)間熟悉檢測(cè)系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（儀器、試劑、質(zhì)控及操作程序等），熟悉評(píng)價(jià)方案。整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程應(yīng)在臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)并由本實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員操作完成，申報(bào)單位的技術(shù)人員除進(jìn)行必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干涉實(shí)驗(yàn)進(jìn)程，尤其是數(shù)據(jù)收集過(guò)程。各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)選用的對(duì)比試劑應(yīng)一致，對(duì)比試劑的適用機(jī)型盡量相同，如不相同需評(píng)估不同機(jī)型間檢測(cè)結(jié)果的一致性后選用，以便進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 應(yīng)考慮樣本量的分布，各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)樣本量和樣本分布應(yīng)相對(duì)均衡。對(duì)于對(duì)比實(shí)驗(yàn)的等效性研究，最常用是對(duì)考核試劑和對(duì)比試劑兩組檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)及線性回歸分析，以 y=a+bx 和R2 的形式給出回歸分析的擬合方程，其中： y 是考核試劑結(jié)果， x是對(duì)比試劑結(jié)果， b是方程斜率， a 是 y軸截距， R2 是判定系數(shù)， r 是相關(guān)系數(shù)，同時(shí)應(yīng)給出 b的 95%（或 99%）置信區(qū)間。 （八）產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)分析資料申請(qǐng)人應(yīng)考慮產(chǎn)品壽命周期的各個(gè)環(huán)節(jié)，從預(yù)期用途、可能的使用錯(cuò)誤、與安全性有關(guān)的特征、已知及可預(yù)見(jiàn)的危害等方面的判定以及對(duì)患者風(fēng)險(xiǎn)的估計(jì)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分析，應(yīng)符合YY/T0316— 2021/ISO14971： 2021《醫(yī)療器械風(fēng)險(xiǎn)管理對(duì)醫(yī)療器械的應(yīng)用》及附錄 H 的要求。 ：以 YY/T0316— 2021 附錄 H為基礎(chǔ)，判定產(chǎn)品預(yù)期用途和與安全性有關(guān)的特性，判定已知和可預(yù)見(jiàn)的危 害、對(duì)患者風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估，并形成問(wèn)題清單。 ：對(duì)產(chǎn)品生產(chǎn)和生產(chǎn)后的性能進(jìn)行內(nèi)部和外部的監(jiān)測(cè)。 （九）產(chǎn)品技術(shù)要求產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局令第 5 號(hào)）和《關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則的通告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021年第 9號(hào)）的相關(guān)規(guī)定。 （十一）產(chǎn)品說(shuō)明書說(shuō)明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、樣本要求、檢驗(yàn)方法、檢測(cè)結(jié)果的解釋以及注意事項(xiàng)等重要信息，是指導(dǎo)使用者正確操作、臨床醫(yī)生針對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)，因此，產(chǎn)品說(shuō)明書是體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)最重要的文件 之一。 1.【預(yù)期用途】產(chǎn)品的預(yù)期用途建議描述為：本產(chǎn)品用于定量檢測(cè)人血清或血漿或其他體液中 C肽的含量。 2.【檢驗(yàn)原理】詳細(xì)說(shuō)明檢驗(yàn)原理、方法，必要時(shí)可采用圖示方法描述。如塑料滴管、封板膜、自封袋等。 （ 2）如果打開包裝后產(chǎn)品或組分的穩(wěn)定性不同于原包裝產(chǎn)品，則打開包裝后產(chǎn)品或組分的儲(chǔ)存條件也必須注明。 6.【樣本要求】重點(diǎn)明確以下內(nèi)容： （ 1）明確本產(chǎn)品適用的樣本類型，血液樣本應(yīng)當(dāng)說(shuō)明對(duì)采血管及抗凝劑的要求，其他樣本應(yīng)說(shuō)明樣本采集、處理及保存方式。如有需要應(yīng)對(duì)高于檢測(cè)范圍樣本 的稀釋方法進(jìn)行規(guī)定。 （ 4）明確樣本檢測(cè)的操作步驟。 （ 7）結(jié)果計(jì)算：說(shuō)明校準(zhǔn)曲線擬合方式及結(jié)果計(jì)算方法。 （ 3）超出檢測(cè)范圍的樣本怎樣報(bào)告結(jié)果，如要得到準(zhǔn)確的結(jié)果需怎樣處理，如需稀釋，應(yīng)注明稀釋方法、最佳或最大稀釋比例等。 （ 2）嗜異性抗體或類風(fēng)濕因子等對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。 12.【注意事項(xiàng)】應(yīng)至少包括以下內(nèi)容： （ 1）有關(guān)人源組分（如有）的警告，如：試劑內(nèi)質(zhì)控品或其他可能含有人源物質(zhì)的組分，雖已經(jīng)通過(guò)了 HBsAg、 HIV1/2Ab、 HCVAb 等項(xiàng)目的檢測(cè)，但截至目前，沒(méi)有任何一項(xiàng)檢測(cè)可以確保絕對(duì)安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對(duì)待。 13.【標(biāo)識(shí)的解釋】如有圖形或 符號(hào)，請(qǐng)解釋其代表的意義。 15.【基本信息】根據(jù)《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說(shuō)明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021 年第 17 號(hào)）的要求編寫。 三、審查關(guān)注點(diǎn)（一）技術(shù)要求中性能指標(biāo)的設(shè)定及檢驗(yàn)方法是否符合相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求； 技術(shù)要求的格式是否符合《關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則的通告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021 年第 9 號(hào)）的相關(guān)規(guī)定。 （五）產(chǎn)品穩(wěn)定性研究方法是否合理，穩(wěn)定性結(jié)論是否與說(shuō)明書聲稱一致。 第二篇：甘油三酯測(cè)定試劑盒注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則 附件 5 甘油三酯測(cè)定試劑盒注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原 則 本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊(cè)申請(qǐng)人對(duì)甘油三酯（ Triglyceride， TG）測(cè)定試劑盒注冊(cè)申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時(shí)也為技術(shù)審評(píng)部門審評(píng)注冊(cè)申報(bào)資料提供參考。 本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。在 ATP 存在下，甘油激酶將甘油磷酸化成 3磷酸甘油。 依據(jù)《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局令第 5 號(hào)）、《食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管〔 2021〕 242 號(hào)），甘油三酯檢測(cè)試劑屬于酯類檢測(cè)試劑，管理類別為Ⅱ類，分類代號(hào)為 6840。病理性升高：原發(fā)性見(jiàn)于家族性高甘油三酯血癥與家族性混合型高脂（蛋白）血癥等。綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、方法學(xué)特征、生物安全性評(píng)價(jià)、研究結(jié)果總結(jié)以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容，應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局公告 2021年第 44 號(hào)）的相關(guān)要求。 ，包括：樣本采集及處理、樣本要求，確定反應(yīng)溫度、時(shí)間、緩沖體系比較等條件的確認(rèn)資料及試驗(yàn)數(shù)據(jù)，確定樣本和試劑盒組分加樣量的確認(rèn)資料及試驗(yàn)數(shù)據(jù)，校準(zhǔn)方法、質(zhì)控方法等。 性能評(píng)估應(yīng)至少包括準(zhǔn)確度、精密度、線性范圍、最低檢測(cè)限、分析靈敏度、分析特異性、其他影響檢測(cè)的因 素等。 回收試驗(yàn) 在人血清樣品中加入一定體積標(biāo)準(zhǔn)或校準(zhǔn)品溶液或純品，每個(gè)濃度重復(fù)測(cè)定 3 次，計(jì)算回收率。方法學(xué)比對(duì)時(shí)應(yīng)注意質(zhì)量控制、樣本類型、濃度分布范圍并對(duì)結(jié)果進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 最低檢測(cè)限的確定常使用同批號(hào)試劑對(duì)零濃度校準(zhǔn)品（或樣品稀釋液）進(jìn)行至少 20 次重復(fù)檢測(cè)，平均值加 2 倍 SD（≥ 95%臵信區(qū)間）即試劑的最低檢測(cè)限。 藥物干擾的研究可根據(jù)需要由申請(qǐng)人選擇是否進(jìn)行或選擇何種藥物及其濃度進(jìn)行。如注冊(cè)申請(qǐng)中包含不同的包裝規(guī)格，需要對(duì)不同包裝規(guī)格之間的差異進(jìn)行分析或驗(yàn)證。研究結(jié)論應(yīng)與產(chǎn)品說(shuō)明書【參考區(qū)間】的相應(yīng)描述保持一致。 適用樣本的穩(wěn)定性主要包括室溫保存、冷藏和冷凍 條件下的有效期驗(yàn)證，可以在合理溫度范圍內(nèi)選擇溫度點(diǎn)（溫度范圍），每間隔一定的時(shí)間段即對(duì)儲(chǔ)存樣本進(jìn)行性能的分析驗(yàn)證，從而確認(rèn)不同類型樣本的效期穩(wěn)定性。下面僅對(duì)臨床實(shí)驗(yàn)中的基本問(wèn)題