血紅蛋白的提取和分離(優(yōu)質(zhì)課)(已修改)
2025-10-30 07:00 本頁面
【正文】 ,,血紅蛋白的提取(t237。qǔ)與別離,第一頁，共四十一頁。,1.別離(fēnl237。)生物大分子的根本思路：,選用一定的物理或化學(xué)的方法別離(fēnl237。)具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。,2.蛋白質(zhì)別離和提取(t237。qǔ)的原理：,根據(jù)蛋白質(zhì)各種特性的差異，如分子的形狀和大小、所帶電荷的性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)和對其他分子的親和力等等，可以用來別離不同種類的蛋白質(zhì)。,根底知識,凝膠色譜法,凝膠電泳法,第二頁，共四十一頁。,根底知識,2.凝膠：,大多數(shù)凝膠是由多糖類化合物〔如葡聚糖或 瓊脂糖〕構(gòu)成(g242。uch233。ng)的多孔小球體，內(nèi)部有許多貫穿的通道。,根據(jù)被別離的蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量(zh236。li224。ng)的大小，利用具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠的分子篩作用，來進行別離。,1.概念(g224。ini224。n)：,〔一〕 凝膠色譜法〔分配色譜法〕,第三頁，共四十一頁。,根底知識,〔一〕 凝膠色譜法〔分配(fēnp232。i)色譜法〕,3.凝膠色譜法的原理(yu225。nlǐ),①當(dāng)相對分子量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時，相對分子量較小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長，移動速度較慢。②而相對分子量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快。相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此(yīncǐ)得以別離。③依據(jù)的特性是：蛋白質(zhì)分子量的大小。,第四頁，共四十一頁。,4.凝膠色譜法別離蛋白質(zhì)的原理(yu225。nlǐ)和具體過程,第五頁，共四十一頁。,凝膠色譜法別離蛋白質(zhì)過程(gu242。ch233。ng)的動畫演示,第六頁，共四十一頁。,〔二〕緩沖溶液(huǎn chōnɡ r243。nɡ y232。),1.概念(g224。ini224。n):,在一定(yīd236。ng)的范圍內(nèi)，但凡能夠抵抗外加少量強酸或強堿的影響使原來溶液PH值根本保持不變的混合溶液。,能夠抵抗外界的酸和堿對溶液PH值的影響，維持PH根本不變。,2.作用:,根底知識,第七頁，共四十一頁。,〔二〕緩沖溶液(huǎn chōnɡ r243。nɡ y232。),根底知識,3.緩沖溶液(huǎn chōnɡ r243。nɡ y232。)的配制:,通常由1－2 種緩沖劑溶解于水中配制而成。調(diào)節(jié)緩沖劑的使用(shǐy242。ng)比例就可以制得在不同PH范圍內(nèi)使用的緩沖液。,4.提問：在本課題中使用的緩沖液是:____ , 其目的是:,利用緩沖液模擬細(xì)胞內(nèi)的PH環(huán)境，保證血紅蛋白的正常結(jié)構(gòu)和功能，便于觀察(紅色)和科學(xué)研究(活性),磷酸緩沖液,第八頁，共四十一頁。,〔三〕 電泳(di224。n yǒnɡ)：,1.概念(g224。ini224。n)：,帶電粒子在電場(di224。n chǎng)作用下發(fā)生遷移的過程。,2.原理：,①許多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解離的基團，在一定的PH下，這些基團會帶上正電或負(fù)電。②在電場的作用下，這些帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動。③電泳利用了待別離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小，形狀的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的別離。,根底知識,第九頁，共四十一頁。,影響(yǐngxiǎng)蛋白質(zhì)分子運動速度的因素,√,√,√,√,√,
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