凝膠層析分離血紅蛋白與魚精蛋白(已修改)
2025-06-07 03:38 本頁面
【正文】 凝膠層析分離血紅蛋白 與魚精蛋白 一般性實(shí)驗(yàn) 3 背 景 ? 層析法也稱色譜法，是 1906年俄國植物學(xué)家 Michael Tswett發(fā)現(xiàn)并命名的。他將植物葉子的色素通過裝填有吸附劑的柱子，各種色素以不同的速率流動(dòng)后形成不同的色帶而被分開，由此得名為“色譜法”（ Chromatography) 。 ? 后來無色物質(zhì)也可利用吸附柱層析分離。 ? 英國生物學(xué)家 Martin和 Synge。他們首先提出了色譜塔板理論。 ? 1944年出現(xiàn)紙層析以后，層析法不斷發(fā)展，相繼出現(xiàn)薄層層析、親和層析、凝膠層析、氣相層析、高壓液相層析等。 葉綠素通過碳酸鈣管柱所形成的色譜圖 層析的兩種相 ? 固定相：固定相是層析的一個(gè)基質(zhì)。它可以是固體物質(zhì)（如吸附劑，凝膠，離子交換劑等），也可以是液體物質(zhì)（如固定在硅膠或纖維素上的溶液），這些基質(zhì)能與待分離的化合物進(jìn)行可逆的吸附，溶解，交換等作用。 ? 流動(dòng)相：在層析過程中，推動(dòng)固定相上待分離的物質(zhì)朝著一個(gè)方向移動(dòng)的液體、氣體或超臨界體等，都稱為流動(dòng)相。在柱層析中一般稱為洗脫劑，薄層層析時(shí)稱為展層劑。 ? 層析法是利用混合物中各組分物理化學(xué)性質(zhì)的差異（如吸附力、分子形狀及大小、分子親和力、分配系數(shù)等），使各組分在兩相（一相為固定的，稱為固定相；另一相流過固定相，稱為流動(dòng)相）中的分布程度不同，即各組分所受的固定相的阻力和流動(dòng)相的推力影響不同，從而使各組分以不同的速度移動(dòng)而達(dá)到分離的目的。 按層析過程的機(jī)理分類： ? 分配層析 : 根據(jù)不同組分在不同溶劑中分配系數(shù)不同而使物質(zhì)分離的方法稱為分配層析。 ? 吸附層析 :吸附是兩相成一界面，溶質(zhì)在表面密集的現(xiàn)象。以吸附劑為固定相，根據(jù)待分離物與吸附劑之間吸附力不同而達(dá)到分離目的的一種層析技術(shù)稱為吸附層析。常用吸附劑：活性碳、硅。 ? 離子交換層析 : 是以離子交換劑為固定相，根據(jù)物質(zhì)酸堿度、極性和分子大小差異而將物質(zhì)予以分離的一種方法。 ? 凝膠層析（分子篩）利用凝膠顆粒形成具有三維空間多孔性網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的物質(zhì)，不帶電荷，可起濾過或 “ 篩 ” 的作用。 ? 親和層析是利用生物分子間所具有的專一性親和力的層析技術(shù)。 層析法分類 層析法分類 按兩相所處的狀態(tài)分類： ? 流動(dòng)相有兩種狀態(tài)：液體作為流動(dòng)相
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