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高二生物血紅蛋白的提取和分離(已修改)

2024-11-28 18:16 本頁(yè)面
 

【正文】 本課題學(xué)習(xí)目標(biāo) 體驗(yàn)從復(fù)雜體系中提取生物大分子的基本過(guò)程和方法,并了解色譜法、電泳法等分離生物大分子的基本原理。 主要概念: ① 凝膠色譜法 ②電泳法 ③緩沖溶液 ④它們?cè)谘t蛋白的提取中分別起到什么作用。 2. 主要原理: ①凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理 ②電泳法分離樣品的原理 ③緩沖溶液的組成和作用機(jī)理 課題重點(diǎn): 凝膠色譜法的原理和方法 課題難點(diǎn): ①樣品的處理 ②色譜柱填料的處理和色譜柱的裝填。 血液 血漿 水 分 固體物質(zhì): 血漿蛋白、 無(wú)機(jī)鹽、磷脂、葡萄糖等 血細(xì) 胞 白細(xì)胞 血小板 紅細(xì)胞 (最多) 血紅蛋白 ( 90%) 兩個(gè) α -肽鏈 兩個(gè) β 一肽鏈 四個(gè)亞鐵紅素基團(tuán) : 血液有哪些成分? : 用雞的紅細(xì)胞提取 DNA,用豬、牛、羊的紅細(xì)胞提取血紅蛋白的原因是什么? 雞的紅細(xì)胞具有細(xì)胞核,含有 DNA,便于進(jìn)行 DNA的提??;人的紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,血紅蛋白含量豐富,便于提取血紅蛋白。 血 紅 蛋白 血紅蛋白 兩個(gè) α -肽鏈 兩個(gè) β 一肽鏈 四個(gè)亞鐵 血 紅素基團(tuán) 每個(gè)肽鏈環(huán)繞一個(gè) 亞鐵血紅素基團(tuán), 此基團(tuán)可攜帶 一分子氧或一分子二 氧化碳, 血紅蛋白因含有 血紅素 而 呈 紅色。 血紅蛋白的特點(diǎn): : 選用一定的 物理或化學(xué) 的方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的 生物大分子 。 : 根據(jù)蛋白質(zhì) 各種特性 的差異,如 分子的形狀和大小、所帶電荷的性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)和對(duì)其他分子的親和力 等等,可以用來(lái)分離 不同種類(lèi) 的蛋白質(zhì)。 一、血紅蛋白的提取和分離 (一) 凝膠色譜法( 分配色譜法 ) : 大多數(shù)凝膠是由 多糖類(lèi)化合物 (如 葡聚糖或 瓊脂糖 )構(gòu)成的 多孔 小球體, 內(nèi)部有許多貫穿的通道 。 根據(jù)被分離物質(zhì)的蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大 小,利用具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠,來(lái)進(jìn)行分離。 : ① 當(dāng)相對(duì)分子量不同的蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí),相對(duì)分子量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程較長(zhǎng),移動(dòng)速度較慢 。② 而相對(duì)分子量較大的蛋白質(zhì)無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動(dòng),路程較短,移動(dòng)速度較快。相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離。③ 依據(jù)的特性是: 蛋白質(zhì)分子量的大小。 分離蛋白質(zhì) 的原理和 具體過(guò)程 凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)過(guò)程的動(dòng)畫(huà)演示 (二)緩沖溶液 : 在一定的范圍內(nèi),凡是能夠抵制 外加少量強(qiáng) 酸或強(qiáng)堿 的影
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