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血紅蛋白的提取和分離(第1課時(shí))(已修改)

2025-08-28 01:36 本頁面
 

【正文】 血紅蛋白 兩個(gè) α -肽鏈 兩個(gè) β 一肽鏈 四個(gè)亞鐵 血 紅素基團(tuán) 每個(gè)肽鏈環(huán)繞一個(gè)亞鐵血紅素基團(tuán), 此基團(tuán)可攜帶一分子氧或一分子二 氧化碳,血紅蛋白因含有血紅素而 呈紅色。 血紅蛋白的特點(diǎn): : 選用一定的 物理或化學(xué) 的方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的 生物大分子 。 : 根據(jù)蛋白質(zhì) 各種特性 的差異,如 分子的形狀和大小、所帶電荷的性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)和對(duì)其他分子的親和力 等等,可以用來分離 不同種類 的蛋白質(zhì)。 一、血紅蛋白的提取和分離 一、基礎(chǔ)知識(shí) (一)凝膠色譜法(分配色譜法) 根據(jù) 分離蛋白質(zhì)的有效方法。 凝膠是一些 微小 的 多孔 球體,由 多糖類化合物 (如葡聚糖、瓊脂糖等)構(gòu)成。 凝膠粒 相對(duì)分子質(zhì)量的大小 原理: 當(dāng)不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時(shí) 相對(duì)分子質(zhì)量較小 相對(duì)分子質(zhì)量較大 凝膠內(nèi)部的通道 容易進(jìn)入 無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道 只能在 凝膠外部 移動(dòng) 路程 較長 移動(dòng)速度 較慢 路程 較短 移動(dòng)速度 較快 相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)因此得以分離。 分離蛋白質(zhì) 的原理和 具體過程 (二)緩沖溶液 : 在一定的范圍內(nèi),凡是能夠抵制 外加少量強(qiáng) 酸或強(qiáng)堿 的影響使原來溶液 PH值基本保持 不變的混 合溶液。 能夠抵制外界的酸和堿對(duì)溶液 PH值的影響, 維持 PH基本不變。 : : 通常由 1- 2 種緩沖劑 溶解于水 中配制而成。調(diào)節(jié) 緩沖劑的使用比例 就可以制得在 不同 PH范圍內(nèi) 使用的緩沖液。 :在本課題中使用的緩沖液是 :__________ , 其目的是 : 利用緩沖液模擬細(xì)胞內(nèi)的 PH環(huán)境, 保證 血紅蛋白的正常結(jié)構(gòu)和功能,便于觀察 (紅色 )和科 學(xué)研究 (活性 ) 磷酸緩沖液 : 帶電粒子在電場作用下發(fā)生遷移的過程。 : ① 許多重要的生物大分子,如多肽、核酸等都具有 可解離的基團(tuán) ,在一定的 pH下,這些基團(tuán)會(huì) 帶上正電或負(fù)電 。 ② 在電場的作用下,這些帶電分子會(huì)向著與其 所帶電荷相反 的電極移動(dòng)。 ③ 電泳利用了待分離樣品中各種分子 帶電性質(zhì)的差異 以及分子本身的大小,形狀的不同 使帶電分子產(chǎn)生 不同的遷移速度 ,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。 : 瓊脂糖凝膠電泳 聚丙烯酰胺凝膠電泳 (三)電泳 陽極(+)
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