血紅蛋白的提取和分離(第1課時)(存儲版)
【正文】 后續(xù)血紅蛋白的提取純度。 你能描述血紅蛋白分離的完整過程嗎？ 思考下面的問題： 讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的 pH范圍內(nèi)，維持結(jié)構(gòu)和功能正常。 你能觀察到蛋白質(zhì)的分離過程中紅色區(qū)帶的移動嗎？請描述紅色區(qū)帶的移動情況，并據(jù)此判斷分離效果？ 血紅蛋白提取和分離的程序可分為四大步，包括： 樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定 。 ＡＣＤ 凝膠色譜柱取長為 40 cm，內(nèi)徑為 1． 6 cm，有關(guān)說法中，正確的是 (多選 ) A．一般凝膠色譜柱直徑的大小不影響分離的效果 B．凝膠色譜柱過高超過 1 m，不影響分離的效果 C．凝膠色譜柱過矮，則影響混合物的分離度 D．凝膠色譜柱直徑過大會耗用過多洗脫液，樣品的稀釋度過大 （三） SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳（選做） ： 鑒定血紅蛋白純度。 ④洗脫： 小心加入 pH= 的 20mmol/l的磷酸緩沖液到適當(dāng)高度，連接緩沖液洗脫瓶，打開下端出口進行洗脫。注意： 凝膠裝填時盡量緊密，以降低凝膠顆粒之間的空隙。④組裝： 將上述三者按相應(yīng)位置組裝成一個整體 。 ②試管中溶液層次： 第 1層（最上層）：甲苯層（ 無色透明 ）；第 2層（ 中上層 ）：脂溶性物質(zhì)沉淀層（ 白色薄層固體）； 第 3層（中下層）：血紅蛋白的水溶液層（ 紅色透明液體 ）；第 4層（最下層）：雜質(zhì)沉淀層（ 暗紅色 ）。 二、實驗操作 樣品處理 → 粗分離 → 純化 → 純度鑒定 ： （一）蛋白質(zhì)提取和分離步驟 （二）操作過程 本課題可選用豬、牛、羊或其他脊椎 動物的血液來分離血紅蛋白 。 （ SDS的作用 ） 為了消除 凈電荷對遷移率的影響， 可以在凝膠中加入 SDS。 ：在本課題中使用的緩沖液是 :__________ , 其目的是 : 利用緩沖液模擬細胞內(nèi)的 PH環(huán)境， 保證 血紅蛋白的正常結(jié)構(gòu)和功能，便于觀察 (紅色 )和科 學(xué)研究 (活性 ) 磷酸緩沖液 ： 帶電粒子在電場作用下發(fā)生遷移的過程。 ： 根據(jù)蛋白質(zhì) 各種特性 的差異，如 分子的形狀和大小、所帶電荷的性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)和對其他分子的親和力 等等，可以用來分離 不同種類 的蛋白質(zhì)。 凝膠粒 相對分子質(zhì)量的大小 原理： 當(dāng)不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時 相對分子質(zhì)量較小 相對分子質(zhì)量較大 凝膠內(nèi)部的通道 容易進入 無法進入凝膠內(nèi)部的通道 只能在 凝膠外部 移動 路程 較長 移動速度 較慢 路程 較短
試題試卷相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1