血紅蛋白的提取和分離(第1課時)-文庫吧
2025-08-01 01:36 本頁面
【正文】 陰極（—） 帶正電的離子 帶負電的離子 電泳原理示意圖 帶電性質 以及 分子大小，形狀的不同 分子遷移速度不同，從而實現樣品中各種分子的分離。 電泳檢測結果 瓊脂糖凝膠電泳 聚丙烯酰胺凝膠電泳 在測定蛋白質分子量時常用 十二烷基硫酸鈉（ SDS） — 聚丙烯酰胺凝膠電泳。聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺和交聯(lián)劑 N,N’ 亞甲基雙丙烯酰胺在 引發(fā)劑 和 催化劑 的作用下聚合交聯(lián)成的具有三維網狀結構的凝膠。 N,N’亞甲基雙丙烯酰胺（形成交聯(lián)） 丙烯酰胺和交聯(lián)劑 N,N’亞甲基雙丙烯酰胺的交聯(lián)共聚反應 蛋白質在聚丙烯酰胺凝膠中的 遷移率 取決 于它所帶 凈電荷 的多少以及 分子的大小 等因素。 （ SDS的作用 ） 為了消除 凈電荷對遷移率的影響， 可以在凝膠中加入 SDS。 ： SDS能使蛋白質發(fā)生完全變性 。 由幾條肽鏈組成的 蛋白質復合體 在 SDS的作用下會 解聚成單條肽鏈 ，因此測定的結果只是 單條肽鏈的分子量 。 SDS能與各種蛋白質形成 蛋白質 — SDS復合物 ， SDS所帶負電荷的量大大超過了蛋白質分子 原有的電荷量 。因而掩蓋了 不同種蛋白質間的電荷差別 ， 使電泳遷移率完全取決于分子的大小。 3. SDS作用機理 : 用 SDS測定蛋白質分子量的方法 使用 SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳 測定蛋白質的分子量時，可選用一組 已知分子量的標準蛋白 同時進行電泳，根據已知分子量的標準蛋白的 電泳區(qū)帶位置 ，可以測定 未知蛋白質 的分子量。 市場上有高分子量、次高分子量及低分子量的標準蛋白試劑出售。 使用 SDS聚丙烯酰胺電泳過程中，不同蛋白質的電泳遷移率完全取決于 A 電荷的多少 B 分子的大小 C 肽鏈的多少 D 分子形狀的差異 1. 血液有哪些成分？ 二、實驗操作： 樣品處理 → 粗分離 → 純化 → 純度鑒定 知識回顧 血液 血漿 水 分 固體物質： 血漿蛋白、無機鹽、磷脂、葡萄糖等 血細 胞 白細胞 血小板 紅細胞 （最多） 血紅蛋白 （ 90％） 兩個 α －肽鏈 兩個 β 一肽鏈 四個亞鐵紅素基團 DNA，用豬、牛、羊的紅細胞提取血紅蛋白的原因是什么？ 雞的紅細胞具有細胞核，含有 DNA，便于進行 DNA的提?。蝗说募t細胞無細胞核，結構簡單，血紅蛋白含量豐富，便于提取血紅蛋白。 二、實驗操作 樣品處理 → 粗分離 → 純化 → 純度鑒定 ：
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