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血紅蛋白的提取和分離(第1課時(shí))(完整版)

  

【正文】 白、無(wú)機(jī)鹽、磷脂、葡萄糖等 血細(xì) 胞 白細(xì)胞 血小板 紅細(xì)胞 (最多) 血紅蛋白 ( 90%) 兩個(gè) α -肽鏈 兩個(gè) β 一肽鏈 四個(gè)亞鐵紅素基團(tuán) DNA,用豬、牛、羊的紅細(xì)胞提取血紅蛋白的原因是什么? 雞的紅細(xì)胞具有細(xì)胞核,含有 DNA,便于進(jìn)行 DNA的提?。蝗说募t細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,血紅蛋白含量豐富,便于提取血紅蛋白。 N,N’亞甲基雙丙烯酰胺(形成交聯(lián)) 丙烯酰胺和交聯(lián)劑 N,N’亞甲基雙丙烯酰胺的交聯(lián)共聚反應(yīng) 蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的 遷移率 取決 于它所帶 凈電荷 的多少以及 分子的大小 等因素。調(diào)節(jié) 緩沖劑的使用比例 就可以制得在 不同 PH范圍內(nèi) 使用的緩沖液。 血紅蛋白的特點(diǎn): : 選用一定的 物理或化學(xué) 的方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的 生物大分子 。 分離蛋白質(zhì) 的原理和 具體過(guò)程 (二)緩沖溶液 : 在一定的范圍內(nèi),凡是能夠抵制 外加少量強(qiáng) 酸或強(qiáng)堿 的影響使原來(lái)溶液 PH值基本保持 不變的混 合溶液。 : 瓊脂糖凝膠電泳 聚丙烯酰胺凝膠電泳 (三)電泳 陽(yáng)極(+) 陰極(—) 帶正電的離子 帶負(fù)電的離子 電泳原理示意圖 帶電性質(zhì) 以及 分子大小,形狀的不同 分子遷移速度不同,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。因而掩蓋了 不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別 , 使電泳遷移率完全取決于分子的大小。 鹽水洗滌:用五倍體積的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為%的氯化鈉溶液洗滌。 透析過(guò)程動(dòng)畫演示 練習(xí)鞏固 隨著人類跨入蛋白質(zhì)組時(shí)代,對(duì)蛋白質(zhì)的研究和應(yīng)用越來(lái)越深入,首先要做的一步是 A 弄清各種蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu) B 弄清各種蛋白質(zhì)的功能 C 弄清各種蛋白質(zhì)的合成過(guò)程 D 獲得高純度的蛋白質(zhì) 用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的過(guò)程中,關(guān)于蛋白質(zhì)的敘述,正確的是 A 相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)行程大于相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì) B 相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)行程小于相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì) C 相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)行程等于相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì) D 二者根本無(wú)法比較 : ( 1)凝膠色譜柱的制作: ① 取長(zhǎng) 40厘米,內(nèi)徑 , 兩端需用砂紙磨平。 75表示凝膠的得水值,即每克凝膠膨脹時(shí)吸水 。 不能發(fā)生洗脫液流干,露出凝膠顆粒的現(xiàn)象 。 使吸管管口沿管壁環(huán)繞移動(dòng)。此外,還可以加入大分子的有色物質(zhì), 例如藍(lán)色葡聚糖 — 2022或紅色葡聚糖,觀察色帶移動(dòng)的情況。
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