【正文】 使用的緩沖液。 使用 SDS聚丙烯酰胺電泳過(guò)程中，不同蛋白質(zhì)的電泳遷移率完全取決于 A 電荷的多少 B 分子的大小 C 肽鏈的多少 D 分子形狀的差異 1. 血液有哪些成分？ 二、實(shí)驗(yàn)操作： 樣品處理 → 粗分離 → 純化 → 純度鑒定 知識(shí)回顧 血液 血漿 水 分 固體物質(zhì)： 血漿蛋白、無(wú)機(jī)鹽、磷脂、葡萄糖等 血細(xì) 胞 白細(xì)胞 血小板 紅細(xì)胞 （最多） 血紅蛋白 （ 90％） 兩個(gè) α －肽鏈 兩個(gè) β 一肽鏈 四個(gè)亞鐵紅素基團(tuán) DNA，用豬、牛、羊的紅細(xì)胞提取血紅蛋白的原因是什么？ 雞的紅細(xì)胞具有細(xì)胞核，含有 DNA，便于進(jìn)行 DNA的提?。蝗说募t細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，血紅蛋白含量豐富，便于提取血紅蛋白。③ 頂塞的制作： 打孔 → 安裝玻璃管 。 ③樣品滲入凝膠床： 加樣后打開(kāi)下端出口，使樣品滲入凝膠床內(nèi)，等樣品完全進(jìn)入凝膠層后，關(guān)閉下端出口。 如果凝膠色譜柱裝填得很成功、分離操作也正確的話，能清楚地看到血紅蛋白的紅色區(qū)帶 均勻、狹窄、平整 ，隨著洗脫液緩慢流出；如果紅色區(qū)帶 歪曲、散亂、變寬 ，說(shuō)明分離的效果不好，這與凝膠色譜柱的裝填有關(guān)。 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評(píng)價(jià) 你是否完成了對(duì)血液樣品的處理？你能描述處理后的樣品發(fā)生了哪些變化嗎？ 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評(píng)價(jià) 你裝填的凝膠色譜柱是否有氣泡產(chǎn)生？你的色譜柱裝填得成功嗎？你是如何判斷的？ 由于凝膠是一種半透明的介質(zhì)，因此可以在凝膠柱旁放一支與凝膠柱垂直的日光燈，檢查凝膠是否裝填得均勻。 （ 2）凝膠色譜柱的裝填 50cm高 注意： 液面不要低于凝膠表面，否則可能有氣泡混入，影響液體在柱內(nèi)的流動(dòng)與最終生物大分子物質(zhì)的分離效果。 ②透析目的： 除去樣品中分子量較 小 的雜質(zhì)。 SDS能與各種蛋白質(zhì)形成 蛋白質(zhì) — SDS復(fù)合物 ， SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過(guò)了蛋白質(zhì)分子 原有的電荷量 。 凝膠粒 相對(duì)分子質(zhì)量的大小 原理： 當(dāng)不同的蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí) 相對(duì)分子質(zhì)量較小 相對(duì)分子質(zhì)量較大 凝膠內(nèi)部的通道 容易進(jìn)入 無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道 只能在 凝膠外部 移動(dòng) 路程 較長(zhǎng) 移動(dòng)速度 較慢 路程 較短 移動(dòng)速度 較快 相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)因此得以分離。 ：在本課題中使用的緩沖液是 :__________ , 其目的是 : 利用緩沖液模擬細(xì)胞內(nèi)的 PH環(huán)境， 保證 血紅蛋白的正常結(jié)構(gòu)和功能，便于觀察 (