凝膠層析分離血紅蛋白與魚精蛋白(存儲(chǔ)版)
【正文】 ，網(wǎng)孔越小，適用于分離低分子質(zhì)量生化產(chǎn)品。我們?cè)O(shè)柱床體積為 Vt，外水體積為 Vo，內(nèi)水體積為 Vi，基質(zhì)體積為 Vg，則有： Vt＝ Vo＋ Vi＋ Vg 由于 Vg相對(duì)很小，可以忽略不計(jì)，則有： Vt＝ Vo＋ Vi 凝膠層析柱各種體積示意圖（陰影部分） 外水體積（ V0） 內(nèi)水體積（ Vi） 基質(zhì)體積（ Vg） 柱床體積 （ Vt） ? 當(dāng)分子的 Kd＝ 0時(shí)， Ve＝ Vo即該分子被完全排阻于凝膠顆粒之外，全部分布于流動(dòng)相里，固定相里分布為零（ A)； ? 當(dāng)分子的 Kd＝ 1時(shí)， Ve＝ Vo+Vi即該分子完全不被排阻，均勻的分布在流動(dòng)相和固定相里，兩相比值為 1(C)； ? 當(dāng) 0 Kd 1時(shí)， Ve = Vo + Kd*Vi即表明分子受到部分排阻 (B)。 ? 原理：凝膠顆粒內(nèi)部具有多孔性網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，被分離的混合物流過(guò)層析柱時(shí)，比凝膠孔徑大的分子不能進(jìn)入凝膠孔內(nèi)，在凝膠顆粒之間的空隙向下移動(dòng)，并最先被洗脫出來(lái)；比網(wǎng)孔小的分子能不同程度的自由出入凝膠孔內(nèi)外，在柱內(nèi)經(jīng)過(guò)的路程較長(zhǎng)移動(dòng)速度較慢，最后被洗脫出來(lái)。 親和層析示意圖 離子交換層析 ? 離子交換層析是依據(jù)各種離子或離子化合物與離子交換劑的結(jié)合力不同而進(jìn)行分離純化。 ? 物質(zhì)在一定溶劑中的分配系數(shù)是一定的， Rf值也是恒定的，因此可以根據(jù) Rf值來(lái)鑒定被分離的物質(zhì)。 分配層析技術(shù) （液 液層析法） ? 原理：利用混合物在兩種不相混溶的液相（固定相和流動(dòng)相）之間的分配系數(shù)的不同而達(dá)到分離各組分的目的。 層析法分類 層析法分類 按兩相所處的狀態(tài)分類： ? 流動(dòng)相有兩種狀態(tài)：液體作為流動(dòng)相 氣體作為流動(dòng)相 ? 固定相也有兩種狀態(tài)：固體吸附劑作為固定相 以吸附在固體上的液體作為固定相 按兩相所處的狀態(tài)分為： ? 液相層析和氣相層析 流動(dòng)相 固定相 液體 （液相層析 ) 氣體 （固相層析） 液 體 液 液層析 氣 液層析 固 體 液 固層析 氣 固層析 層析法分類 名稱 操作形式 適用范圍 柱層析 將固定相裝于柱內(nèi)，使
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