【正文】 ,% and % after 10 days in sun’s rays and darkly as well as declined %,%,% and % after 30 days in room temperature and 4℃ . Conclusions: Under the experimental condition, the stability of Shuang Huang Lian Injection with craft II was better than craft I. What’s more, that could not be stored under cold and without light.Key words：Shuang Huang Lian Injection； UVVis； Baicalin； Stability1 前言雙黃連注射液是由金銀花、黃芩和連翹三味中藥精制而成，具有清熱解毒,辛涼解表的功能，用于外感風(fēng)熱引起的發(fā)熱、咳嗽、咽痛等病癥。因此，本課題擬采用兩種不同方法制備雙黃連注射液，對(duì)比兩種注射液的理化性質(zhì)，穩(wěn)定性，為指導(dǎo)生產(chǎn)實(shí)踐提供一些依據(jù)。 主要藥品及試劑兩種工藝制備的雙黃連注射液（西南大學(xué)榮昌校區(qū)中藥研究開發(fā)實(shí)驗(yàn)室研制）；鹽酸（重慶川東化工（集團(tuán)）有限公司化學(xué)試劑廠，編號(hào)：20060306）；氫氧化鈉（重慶川東化工（集團(tuán)）有限公司化學(xué)試劑廠 ， 編號(hào)： 20020610）；苯甲醇（ 重慶川東化工（集團(tuán)）有限公司化學(xué)試劑廠 ，編號(hào)： 20080209）；吐溫80（重慶川東化工（集團(tuán)）有限公司化學(xué)試劑廠 ， 編號(hào)：20070503）；三氯化鐵（成都市科龍化工試劑廠， 編號(hào)： 20071215）；黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)品（ 中國藥品生物制品檢定所，編號(hào)：110715200413）以及95%的醫(yī)用乙醇和蒸餾水。金銀花、連翹加水浸漬30分鐘，煎煮二次，每次1小時(shí)，分次濾過，合并濾液，(7080℃測)，放冷至40℃，緩緩加乙醇使含醇量達(dá)75%，充分?jǐn)嚢?，靜置12小時(shí)，濾取上清液，回收乙醇至無醇味，加入34倍量水，充分?jǐn)嚢璨⒓訜嶂练?，靜置48小時(shí)，濾取上清液，(7080℃測)，放冷至40℃，加入乙醇使含醇量達(dá)85%，靜置12小時(shí)，濾取上清液，回收乙醇至無醇味，備用。 水提醇沉法[10]制備雙黃連注射液Ⅱ制法：黃芩、金銀花和連翹混合，加水六倍量，浸泡30分鐘，煎煮兩次，每次60分鐘，過濾合并濾液。靜置冷藏24小時(shí)后濾過，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀回收乙醇，然后再加乙醇，使含醇量達(dá)80%，冷藏放置2448小時(shí)后過濾，濾液調(diào)至pH=8，再過濾，接下來回收乙醇，%，加入苯甲醇和吐溫80，過濾，加蒸餾水至1g/ml，再加NaCl,調(diào)至等滲，,過濾加注射用水至1000ml，灌封，滅菌，即得。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 取黃芩苷對(duì)照品，105mg/ml，104mg/ml，103mg/ml，103mg/ml，102mg/ml，102mg/ml濃度的溶液，在278nm波長處測定它們的吸收度。 樣品含量的測定精密量取本品2ml置100ml容量瓶中,加乙醇稀釋至刻度搖勻，精密量取1ml置25ml容量瓶中， mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度,搖勻即得[12]。 加樣回收率試驗(yàn)，[13]，采用加樣回收法分別測得工藝Ⅰ和工藝Ⅱ%%，% % 。 取樣品1滴，滴于濾紙上加1滴蒸餾水紫外燈下，呈藍(lán)色熒光，氨氣熏蒸呈黃綠色熒光[14]。①各8支5ml安瓿在25℃避光保存；②各8支5ml安瓿25℃不避光保存。 溫度影響試驗(yàn)分別取灌封的雙黃連注射液。將上述兩種樣品分別作記號(hào)后，分別在0d，7d，15d，30d時(shí)取兩支，混勻后測pH值，顏色，澄明度和黃芩苷的含量。 根據(jù)經(jīng)典恒溫?zé)峒铀僭囼?yàn)結(jié)果，求出不同溫度下的回歸方程，由回歸方程的斜率計(jì)算各溫度下的分解速率常數(shù)(K)，進(jìn)而求得lgK，以lgK對(duì)1/T(T為絕對(duì)溫度)進(jìn)行線性回歸，,求出室溫25℃時(shí)的分解速率常數(shù)K，再計(jì)算出藥物中黃芩苷的保存期[11]。圖1：黃芩苷的紫外掃描圖 : UV graph scan of Baicalin 標(biāo)準(zhǔn)曲線 如圖2，經(jīng)回歸處理得回歸方程：Y=+， r=。圖2：黃芩苷的標(biāo)準(zhǔn)曲線: The standard curve of Baicalin 黃芩苷理化性質(zhì)鑒定 向注射液樣品中加入5%三氯化鐵試液2滴，溶液呈藍(lán)綠色；而在紫外熒光下，溶液顯藍(lán)色熒光；樣品經(jīng)氨氣熏蒸后呈黃綠色熒光。表1：光照對(duì)雙黃連注射液穩(wěn)定性的影響Table 1: Influence of Shuang Huang Lian Injection on the stability in light條件時(shí)間/d黃芩苷含量(mg/ml)黃芩苷的相對(duì)含量/%顏色澄明度pH值照射前Ⅰ0棕紅色澄清照射前Ⅱ0棕紅色澄清避光Ⅰ3棕紅色澄清7棕紅色澄清10棕紅色澄清自然光Ⅰ3棕紅色澄清7棕紅色澄清10棕紅色澄清避光Ⅱ3棕紅色澄清7棕紅色澄清10棕紅色輕微混濁自然光Ⅱ3棕紅色澄清7棕紅色澄清10棕紅色澄清 表2所示，兩種不同制法制備的雙黃連注射液分別在室溫和4℃冷藏條件下保存30d后，%，%，%%，外觀顏色沒有變化，pH值升高，說明工藝I制備的雙黃連注射液在室溫條件下降解慢，保存較好，而工藝II制備的雙黃連注射液在冷藏條件下保存較好。由表3可以看出，在恒溫加速條件下，隨著溫度的升高和加熱時(shí)間的延長，雙黃連注射液中的黃芩苷相對(duì)含量都在降低，說明了雙黃連注射液對(duì)熱不穩(wěn)定。見表4，結(jié)果表明線性關(guān)系較好，說明黃芩苷含量隨溫度時(shí)間變化符合一級(jí)降解反應(yīng)。結(jié)果見表5。說明雙黃連注射液對(duì)高溫不穩(wěn)定。藥物的穩(wěn)定性研究主要是指體外的穩(wěn)定性，使制備的產(chǎn)品應(yīng)在一定的時(shí)間內(nèi)保持制備時(shí)所規(guī)定的藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，從而保證藥品從生產(chǎn)到患者使用期內(nèi)均不變質(zhì)[17]。盡管如此，藥物的穩(wěn)定性評(píng)價(jià)是處方前研究工作的重要而必需的內(nèi)容之一，從而合理地進(jìn)行處方設(shè)計(jì)，并篩選出最佳處方，為臨床提供安全、有效、穩(wěn)定的藥物制劑，為生產(chǎn)提供可靠的處方和工藝，有利于提高經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。 光照對(duì)藥物穩(wěn)定性的影響 光是一種輻射能，輻射能量的單位是光子。在本試驗(yàn)中，表1顯示，兩種不同工藝制備的雙黃連注射液分別在避光和自然光條件下10d后，%，%，%%，外觀顏色幾乎沒有變化，pH值也普遍升高，說明雙黃連注射液對(duì)光不穩(wěn)定，而且工藝Ⅱ制備的雙黃連注射液中的黃芩苷相對(duì)含量在避光和自然光條件下都較工藝Ⅰ下降少，可能是雙黃連注射液中的某些物質(zhì)發(fā)生了氧化分解導(dǎo)致的。正如表2所示，兩種不同制法制備的雙黃連注射液分別在室溫和4℃冷藏條件下30d后，%，%，%%，外觀顏色沒有變化，pH值升高，說明工藝Ⅰ制備的雙黃連注射液室溫保存較好，而工藝Ⅱ制備的雙黃連注射液冷藏保存較好。在本研究中，由表6可知，工藝Ⅱ制備的雙黃連注射液中黃芩苷的保存期較工藝Ⅰ制備的長，且整個(gè)試驗(yàn)過程中，兩種不同制法制備的雙黃連注射液的顏色、澄明度及pH值都表現(xiàn)出較穩(wěn)定。本試驗(yàn)也與武煊[11]的試驗(yàn)數(shù)據(jù)一致。這說明兩種工藝制備的雙黃連注射液中均存在對(duì)熱不穩(wěn)定物質(zhì)，在高溫加速試驗(yàn)時(shí)物質(zhì)就會(huì)析出產(chǎn)生沉淀。故在中藥制備過程中，怎樣使雜質(zhì)剔除干凈尤為重要。參考文獻(xiàn)：[1] 郭彩娥，李衛(wèi)紅，熊南燕等．雙黃連注射液和頭孢曲松鈉聯(lián)用抗菌效果的研究[J]．現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2009，18(10) ：1103．[2] 張連祥，馬瑞霞．雙黃連注射液治療矽肺合并肺部感染30例療效觀察[J]．職業(yè)醫(yī)學(xué)，1993，20(5)：283284．[3] Takashi Kumagai, Claudia , Julian , Yasufumi Imai,et al. Scutellaria baicalensis,a herbal medicine: Antiproliferative and apoptotic activity against acute lymphocytic leukemia , lymphoma and myeloma cell lines [J].Leukemia research，2007，31：523524.[4] Kyung Jin Woo, Jun Hee Lim, Seong Il Suh,YoungKyu Kwon,et al. Differential inhibitory effects of baicalein and baicalin on LPSinduced cyclooxygenase2 expression through inhibition of C/EBPB DNA binding activity[J]. Immunology，2006，211：359.[5] 劉小莉，劉曉星，張志榮，等．雙黃連注射液中咖啡酸和黃芩苷的HPLCDADECD法測定[J]．藥物分析雜志，2006，26(12) ：1777． [6] 文敏，李雪，付守廷．黃芩苷藥理作用研究新進(jìn)展[J]． 沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，25(2) ：158．[7] Akira Kotani, Satoshi Kojima, Hideki Hakamata, Fumiyo Kusu. HPLC with electrochemical detection to examine the pharmacokinetics of baicalin and baicalein in rat plasma after oral administration of a Kampo medicine [J].Analytical Biochemistry，2006，350：99100.[8] 吳偉，黃衍濤，張賽霞，等. 黃芩苷抗肺炎衣原體的研究[J]．中國微生態(tài)學(xué)雜志，2005，17（2）：87．[9] 中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑［S］．第十一冊(cè)，1996，38．[10] 崔福德． 藥劑學(xué)[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2008，234．[11] 武煊．獸用雙黃連注射液及其HPLC指紋圖譜的研究［D］．重慶：西南大學(xué)，2006，5556．[12] 張雅杰．紫外分光光度法測定雙黃連注射液中間體黃芩苷含量[J]．黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2006，29（5）：54．[13] 黃啟華．紫外分光光度法測定雙黃連注射液中黃芩苷的含量[J]．中成藥，2000，12（22）：836837．[14] 韓太云，侯國平，張佐等．雙黃連注射液的制備和質(zhì)量控制方法的研究[J]．哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1984，2：79．[15] 沈麗萍，鄧筱華，王建．清熱除濕合劑中黃芩苷的穩(wěn)定性考察[J]．中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2006，26(3) ：345．[16] 李引乾，黃勇旗，吳秋俠，等．復(fù)方環(huán)丙沙星注射液的穩(wěn)定性研究[J]．西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，36(2) ：88．[17] 崔福德．藥劑學(xué)[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2008，292．[18] 雷濘菲，彭書明，周嘉峪，等．黃芩中黃芩苷提取工藝的研究[J]．時(shí)珍國醫(yī)國藥，2007，18（11）：2665．27