【正文】 ⑷ 外毒素：是多數(shù)革蘭陽性菌和少數(shù)革蘭陰性菌在生長繁殖過程中釋放到菌體外的蛋白質(zhì)，其毒性強，為細菌重要的致病物質(zhì)。TB（結(jié)核桿菌）約18小時，產(chǎn)氣莢膜梭菌為8分鐘。C；⑷ 必要的氣體環(huán)境。 細菌的生長曲線可分為幾期？各自的主要特點是什么？細菌生長曲線：是將一定量的細菌接種于適宜培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，連續(xù)檢測細菌在不同培養(yǎng)時間的活菌數(shù)目（以菌落形成單位cfu表示），以cfu為縱坐標，培養(yǎng)時間為橫坐標，可以作出一條反映細菌生長數(shù)變化規(guī)律的曲線，即生長曲線。⑴ 遲緩期：代謝活躍，菌體增大，積累酶、輔酶和中間代謝產(chǎn)物，不分裂繁殖，為細菌大量繁殖作好物質(zhì)準備。⑶ 穩(wěn)定期：細菌數(shù)仍在增加，死菌數(shù)與活菌數(shù)形成一種動態(tài)平衡。⑷ 衰亡期：死亡菌數(shù)增多，超過活菌數(shù)，細菌形態(tài)顯著改變，生理活動趨于停止。根據(jù)細菌代謝時對分子氧的需求與否，可將細菌分為哪幾類？根據(jù)細菌代謝時對氧氣要求的不同，可將細菌分為專性需氧菌；微需氧菌；兼性厭氧菌；專性厭氧菌四大類。 細菌檢驗技術(shù)名詞解釋：培養(yǎng)基；分離培養(yǎng)；純培養(yǎng)；菌落；細菌的生化反應(yīng)；IMViC試驗；KIA試驗；CAMP試驗；莢膜腫脹試驗。⑵ 分離培養(yǎng)：臨床標本中含有多種細菌，可經(jīng)過劃線接種到固體培養(yǎng)基表面分散開，經(jīng)過1824小時培養(yǎng)后可得到單個菌落?；颍簩⒃鼍囵B(yǎng)物或含菌量多的標本如糞便、膿汁等，直接在平板上劃線分離，將其中的目的菌分離出來的培養(yǎng)方法。⑷ 菌落：單個細菌在固體培養(yǎng)基上生長繁殖形成的單一的肉眼可見的細菌集團，稱菌落。⑸ 細菌的生化反應(yīng)：用生化試驗的方法，檢測細菌對各種基質(zhì)（糖、蛋白質(zhì)等）的代謝作用以及形成的代謝產(chǎn)物，從而對細菌鑒別的反應(yīng)。）⑹ IMViC試驗：吲哚（I）、甲基紅（M）、VP（V）及枸櫞酸鹽利用（C）四種試驗，常用于腸道桿菌的鑒定，合稱IMViC試驗。⑺ KIA試驗：即雙糖鐵—半固體培養(yǎng)基，它是一種復(fù)合性的檢查生化反應(yīng)的培養(yǎng)基，可檢查4種反應(yīng)，即葡萄糖、乳糖的發(fā)酵反應(yīng)，是否產(chǎn)生H2S，有無動力等。KIA試驗主要用于腸桿菌科細菌的鑒定和鑒別。該試驗主要用于B群鏈球菌的鑒定。可作為肺炎鏈球菌等細菌的血清學(xué)診斷。細菌染色標本檢查的基本程序：涂片－→干燥－→固定－→染色。革蘭染色的原理、染液組成、染色方法、結(jié)果判斷、影響因素與臨床意義。革蘭陰性菌細胞壁中含有較多類脂質(zhì)，而肽聚糖含量較少。⑵ 化學(xué)說：G+菌菌體含有大量的核糖核酸鎂鹽，可與碘、結(jié)晶紫牢固結(jié)合，使已著色的菌體不易脫色。革蘭染色染液組成：結(jié)晶紫染液、盧戈碘液、 95％乙醇、稀釋石炭酸復(fù)紅。結(jié)果判斷：革蘭陽性菌呈紫色，革蘭陰性菌呈紅色。⑵ 染液因素：盧戈碘液放置時間過長； 95％乙醇揮發(fā)；結(jié)晶紫與草酸銨混合時間太長等。影響革蘭染色的關(guān)鍵步驟是脫色。請寫出抗酸染色的染液組成、染色方法及染色結(jié)果、原理。簡述細菌細胞壁染色的方法與結(jié)果。簡述細菌不染色標本鏡檢的常用方法與用途。應(yīng)用：主要用于觀察活菌的動力和運動方式。簡述培養(yǎng)基制備的一般程序與原則。培養(yǎng)基的種類很多，但一般制備原則有三條：⑴ 足夠和適當?shù)臓I養(yǎng)成份。⑶ 絕對無菌。⑵ 含糖/明膠培養(yǎng)基：113 ℃滅菌15min。⑷ 不耐高溫的液體成分如血清、尿素、細胞培養(yǎng)液等：濾過除菌。⑴ 平板劃線接種法……分離培養(yǎng)，主要用于固體培養(yǎng)基的接種。 ★方法： ★分區(qū)劃線法：適用于含菌量較多的標本如糞便、膿汁 ★連續(xù)劃線法：適用于含菌量較少的標本.⑵ 瓊脂斜面接種法：用于純種增菌、保存菌種或生化反應(yīng)。⑷ 液體培養(yǎng)基接種法：用于純種增菌或生化反應(yīng)。方法：是將經(jīng)滅菌生理鹽水適量稀釋(通常作101～105稀釋)的標本lml，置于滅菌平皿內(nèi)。求出每毫升或每克標本中所含活菌數(shù)。我國規(guī)定生活飲用水的標準是：1 ml 水中細菌總數(shù)≤100cfu。簡述細菌的培養(yǎng)方法有哪些？根據(jù)不同標本及培養(yǎng)目的的不同，可采取不同的方法進行培養(yǎng)，常用的有普通（一般）培養(yǎng)法（又叫需氧培養(yǎng)法）、二氧化碳培養(yǎng)法、微需氧培養(yǎng)法及厭氧培養(yǎng)法?！?燭缸培養(yǎng)法：能自動調(diào)節(jié)CO2的含量和溫度，使用較為方便。將接種細菌的培養(yǎng)基放入缸中，加蓋密封。置37℃孵箱孵育。⑶ 微需氧培養(yǎng)法： 5~6 %O2 、5~10%CO2和85%N2 有些微需氧菌，如空腸彎曲菌、幽門螺桿菌等，在低氧分壓的條件下生長良好。 ⑷ 厭氧培養(yǎng)法：厭氧培養(yǎng)箱、厭氧袋、厭氧罐、皰肉培養(yǎng)法、硫乙醇酸鹽法等。培養(yǎng)基按其物理性狀可分為固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基與液體培養(yǎng)基三種。菌落分為三型：① 光滑型菌落（S型菌落）；② 粗糙型菌落（R型菌落）；③ 粘液型菌落(M型菌落)。有鞭毛的細菌可由穿刺線向四周運動播散，培養(yǎng)后穿刺線模糊不清，呈羽毛狀或云霧狀混濁生長；無鞭毛的細菌，不能運動，僅沿穿刺線生長，穿刺線清晰，穿刺線以外的培養(yǎng)基仍透明澄清。細菌在液體培養(yǎng)基中生長呈三種狀態(tài)。1按用途不同可將培養(yǎng)基分為哪幾種？請各列出一種常用的培養(yǎng)基。② 專用增菌培養(yǎng)基：如堿性蛋白胨水用于霍亂弧菌的增菌。⑷ 鑒別培養(yǎng)基：如糖發(fā)酵管、雙糖鐵培養(yǎng)基等。1簡述甲基紅試驗、VP試驗、七葉苷水解試驗、靛基質(zhì)（吲哚）試驗、硫化氫試驗、尿素酶試驗、枸櫞酸鹽利用試驗的原理、培養(yǎng)基、方法、結(jié)果與應(yīng)用。培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨水試劑：甲基紅試劑方法：將待檢菌接種于葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中，培養(yǎng)24d，于培養(yǎng)基內(nèi)加入甲基紅指示劑2d，立即觀察結(jié)果。應(yīng)用：主要用于腸桿菌科細菌的鑒別。VP試驗： 原理：葡萄糖 → 丙酮酸 → 脫酸生成中性的乙酰甲基甲醇 → 在堿性環(huán)境中被空氣中的氧氧化成二乙酰 → 二乙酰再與培養(yǎng)基內(nèi)蛋白胨中的精氨酸所含的胍基反應(yīng)，生成紅色化合物為陽性。結(jié)果：在數(shù)分鐘內(nèi)出現(xiàn)紅色為陽性；如無紅色出現(xiàn)且于35℃4h后仍如故者即為陰性。該試驗常與甲基紅試驗一起使用，因為前者陽性的細菌，后者通常為陰性。培養(yǎng)基：七葉苷培養(yǎng)基、膽汁七葉苷培養(yǎng)基。結(jié)果：培養(yǎng)基變?yōu)楹谏珵殛栃?，不變色者為陰性。也可用于革蘭陰性桿菌（克雷伯菌屬、腸桿菌屬和沙雷菌屬）、腸球菌及厭氧菌的鑒別。培養(yǎng)基：蛋白胨水培養(yǎng)基試劑：靛基質(zhì)試劑（含對二甲基氨基苯甲醛）方法：挑取純培養(yǎng)物接種蛋白胨水培養(yǎng)基，于35℃培養(yǎng)24 ~48h后，使成兩層，觀察結(jié)果。應(yīng)用：用于腸桿菌科細菌的鑒定。培養(yǎng)基：克氏雙糖鐵培養(yǎng)基或醋酸鉛培養(yǎng)基結(jié)果：培養(yǎng)基變黑為陽性，不變?yōu)殛幮?。沙門菌屬（甲型副傷寒沙門菌為陰性）、愛德華菌屬、亞利桑那菌屬、枸櫞酸桿菌屬和變形桿菌屬等多為陽性，其他菌書呈陰性。培養(yǎng)基：尿素培養(yǎng)基（）試劑：酚紅指示劑方法：將被檢菌接種于相應(yīng)的尿素培養(yǎng)基，于35℃培養(yǎng)18 ~24h后觀察結(jié)果。結(jié)果：培養(yǎng)基變紅者為陽性；培養(yǎng)基不變色者為陰性。奇異變形桿菌和普通變形桿菌、雷極普羅威登菌和摩根菌為陽性；克雷伯菌為弱陽性；大腸埃希菌、斯氏和產(chǎn)堿普羅威登菌為陰性。培養(yǎng)基：枸鹽酸鹽瓊脂斜面培養(yǎng)基試劑：溴麝香草酚藍（，）方法：在枸鹽酸鹽瓊脂斜面上濃密劃線，大量接種被檢菌，于35 ℃培養(yǎng)1~ 4天，逐日觀察結(jié)果。應(yīng)用：有助于腸桿菌科屬間的鑒別。1填空題⑴ 在形態(tài)和染色性上具有特征的致病菌常用＿＿＿方法作初步診斷。 ⑵ 鑒定細菌常用 凝集試驗。 ⑴ 直接涂片鏡檢 結(jié)核分枝桿菌 白喉棒狀桿菌⑵ 直接玻片 抗體 抗原1綜合分析題實驗室在對細菌培養(yǎng)時，需先制備培養(yǎng)基，根據(jù)所培養(yǎng)的細菌不同，選擇不同類型的培養(yǎng)基，如培養(yǎng)營養(yǎng)要求高的細菌時，需制備含血清培養(yǎng)基（即在培養(yǎng)基中加入血清）。思考題：⑴ 制備培養(yǎng)基過程中應(yīng)注意什么？⑵ 制備含血清培養(yǎng)基時，基礎(chǔ)培養(yǎng)基和血清如何進行消毒滅菌？用于保存菌種的牛奶又如何進行消毒滅菌？? 提示1：培養(yǎng)基制備過程中應(yīng)注意無菌操作，以防止微生物的污染。含血清培養(yǎng)基和用于保存細菌的牛奶，既要對其進行滅菌處理，又不能破壞營養(yǎng)成分，故常用間歇蒸汽滅菌法。? 提示4：在準備含血清培養(yǎng)液時，通常使用過濾除菌法除菌，以確保血清中的營養(yǎng)成分不被破壞。在正常情況下對機體有益無害。⑵ 條件致病菌：正常情況下不致病，在特定條件下可致病的正常菌群，稱條件致病菌（或：機會致病菌）。由此而引起的病癥稱為菌群失調(diào)癥。⑸ 消毒：殺死物體上或環(huán)境中的病原微生物的方法。⑹ 滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。⑺ 無菌：不存在活的微生物的意思。⑼ 噬菌體：是感染細菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的病毒。⑾ 毒性噬菌體：能在宿主細胞內(nèi)復(fù)制增殖，產(chǎn)生許多子代噬菌體，并最終裂解細菌的噬菌體，稱毒性噬菌體。⒀ 濾過除菌法：用物理阻留的方法除去液體或空氣中的細菌，達到無菌的目的。生物安全柜也是根據(jù)這個原理，利用高效空氣過濾器的過濾作用，除去空氣中的微生物，以達到保護操作對象、保護操作者、保護環(huán)境的目的。 正常菌群的生理作用有哪些？正常菌群轉(zhuǎn)化為機會致病菌的條件有哪些？（簡要說明微生態(tài)失調(diào)的主要原因有哪些？）正常菌群的生理作用：⑴ 生物拮抗；⑵ 營養(yǎng)作用；⑶ 免疫作用；⑷ 抗衰老作用；⑸ 抑腫瘤作用。常用濕熱滅菌方法的種類及其效果與適用范圍。持續(xù)法: ℃ 30分鐘；瞬間法: ℃ 1530秒；常用于消毒牛奶、酒類。⑶ 流動蒸氣消毒法：阿諾蒸鍋或蒸籠。⑸ 高壓蒸氣滅菌法：一種最有效、最徹底的滅菌方法。是普通培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)敷料等耐高溫、耐濕物品的最佳滅菌法。隨著壓力升高，蒸氣的溫度也相應(yīng)升高， 蒸氣壓下，℃，維持15～20 min，可殺滅包括細菌芽胞在內(nèi)的微生物。但該溫度還不足以滅活朊粒和熱原質(zhì)。⑴ 紫外線（UV）的殺菌機制主要是損傷細菌DNA構(gòu)型，使一條DNA鏈上相鄰的兩個胸腺嘧啶共價結(jié)合而形成二聚體，從而干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致細菌死亡。② 紫外線的穿透力極弱：不能透過玻璃或紙張等，故一般只用于空氣消毒及物體表面消毒。④ 一般用低壓水銀蒸氣燈做紫外線殺菌處理。乙醇消毒滅菌的機制、特點及主要用途：⑴ 機制：去除菌細胞膜中的脂類，并使菌體蛋白質(zhì)變性與凝固。② 易揮發(fā)，需加蓋保存，定期調(diào)整濃度。～%碘酊、%碘伏：多用于皮膚黏膜、體溫計以及其他物品的表面消毒。3％~ 6％過氧化氫 kill most bacteria。但對金屬制品有腐蝕作用。2%戊二醛：機理：細菌蛋白和核酸的烷化作用。用途：%～， 配成2%水溶液，浸泡5min，適用于精密儀器、內(nèi)窺鏡（不能用熱力滅菌法進行滅菌）等的滅菌。機理：細菌蛋白和核酸的烷化作用。用途：已廣泛用于醫(yī)療器械、一次性用具的滅菌。影響消毒滅菌效果的因素有哪些？⑴ 消毒劑的性質(zhì)、濃度和作用時間消毒劑種類不同，其殺菌效果亦有很大差別，大多數(shù)濃度越高，殺菌效果越好，但醇類例外，作用時間越長，殺菌效果越好。同種消毒劑對不同的微生物殺菌效果也不一致，且微生物數(shù)量越多，所需消毒的時間就越長。⑷ 酸堿度：酸堿度可影響消毒劑的殺菌效果。生理鹽水清洗污染創(chuàng)口表面。它的增殖過程包括吸附，穿入，生物合成和裝配、成熟與釋放等步驟。⑵ 當正常菌群發(fā)生 或 時，可成為 菌。 ⑷ 引起微生態(tài)失調(diào)動主要原因是 、 和 。⑹ 噬菌體參與的基因轉(zhuǎn)移與重組的方式有 和 。⑻ 溫和噬菌體有三種存在形式_______、______、_________。（轉(zhuǎn)化是指受體菌直接攝取供體菌游離的DNA片段，從而使受體菌獲得供體菌的遺傳性狀的過程。⑶ 轉(zhuǎn)導(dǎo)：是以溫和噬菌體為載體，將供體菌的一段DNA 轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi)，使受體菌獲得新的性狀。⑸ 耐藥性變異：細菌對某種抗菌藥物由敏感變成耐藥的變異稱耐藥性變異⑹ 卡介苗：卡介二氏將有毒力的牛型結(jié)核分枝桿菌接種在含有膽汁、甘油、馬鈴薯培養(yǎng)基上，經(jīng)過13年傳230代，終于獲得一株毒力減弱但仍保持免疫原性的變異株，即卡介苗。⑵ 菌落變異：細菌SR變異⑶ 毒力變異：毒力增強的變異與毒力減弱的變異⑷ 抗原性變異：O抗原與H抗原變異；H抗原的I相與II相的互變。⑹ 酶活性變異簡述細菌耐藥性獲得的主要機制有哪些？⑴ 鈍化酶的產(chǎn)生 ⑵ 藥物作用靶位發(fā)生改變⑶ 細胞壁的通透性的改變，抗菌藥物的滲透障礙⑷ 主動外排機制：細菌主動外排系統(tǒng)的過度表達醫(yī)學(xué)上重要的質(zhì)粒的種類有哪些？簡述質(zhì)粒的主要特征。質(zhì)粒的主要特點：⑴ 具有自我復(fù)制的能力；⑵ 編碼產(chǎn)物賦予細菌某些性狀特征：如sex pilus 、細菌素、毒素和耐藥性等；⑶ 可自行丟失與消除，非生命活動所必需；⑷ 質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移性：可通過接合、轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo)等方式在細菌間轉(zhuǎn)移；⑸ 質(zhì)粒的不相容性與相容性。簡述F+菌、F菌、Hfr的區(qū)別以及F+菌和Hfr的共同特點。F 菌：不帶有F質(zhì)粒無性菌毛的細菌。F+菌和Hfr 菌的共同特點是：兩者都有性菌毛，均可通過接合方式進行基因轉(zhuǎn)移。⑵ R質(zhì)?？赏ㄟ^ 、 和 等基因轉(zhuǎn)移和重組的方式在細菌間傳遞耐藥性，其中最主要的方式為 。⑴ 雌菌，接合 ⑵ 轉(zhuǎn)化，接合，轉(zhuǎn)導(dǎo)，接合 ⑶ HO，細菌L型 細菌的感染與免疫名詞解釋：侵襲力；毒血癥；膿毒血癥；敗血癥；菌血癥；外源性感染；內(nèi)源性感染⑴ 侵襲力：致病菌能突破宿主皮膚、粘膜生理屏障等免疫防御機制，進入機體定居、繁殖和擴散的能力。外毒素經(jīng)血到達特定的靶器官和組織，引起特征性的毒性癥狀。⑶ 膿毒血癥是指化膿性細菌侵入血流后，在其中大量繁殖，并通過血流擴散到機體其他組織器官，產(chǎn)生新的化膿性病灶。⑷ 敗血癥是指病原菌侵入血流并在其中大量繁殖，產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)物（包括內(nèi)毒素和外毒素等）所引起嚴重的全身性中毒癥狀。⑸ 菌血癥是指病原菌由局部入血，一過