【正文】 常使用過(guò)濾除菌法除菌，以確保血清中的營(yíng)養(yǎng)成分不被破壞。 ⑵ 鑒定細(xì)菌常用 凝集試驗(yàn)。奇異變形桿菌和普通變形桿菌、雷極普羅威登菌和摩根菌為陽(yáng)性；克雷伯菌為弱陽(yáng)性；大腸埃希菌、斯氏和產(chǎn)堿普羅威登菌為陰性。培養(yǎng)基：克氏雙糖鐵培養(yǎng)基或醋酸鉛培養(yǎng)基結(jié)果：培養(yǎng)基變黑為陽(yáng)性，不變?yōu)殛幮?。結(jié)果：培養(yǎng)基變?yōu)楹谏珵殛?yáng)性，不變色者為陰性。VP試驗(yàn)： 原理：葡萄糖 → 丙酮酸 → 脫酸生成中性的乙酰甲基甲醇 → 在堿性環(huán)境中被空氣中的氧氧化成二乙酰 → 二乙酰再與培養(yǎng)基內(nèi)蛋白胨中的精氨酸所含的胍基反應(yīng)，生成紅色化合物為陽(yáng)性。⑷ 鑒別培養(yǎng)基：如糖發(fā)酵管、雙糖鐵培養(yǎng)基等。有鞭毛的細(xì)菌可由穿刺線向四周運(yùn)動(dòng)播散，培養(yǎng)后穿刺線模糊不清，呈羽毛狀或云霧狀混濁生長(zhǎng)；無(wú)鞭毛的細(xì)菌，不能運(yùn)動(dòng)，僅沿穿刺線生長(zhǎng)，穿刺線清晰，穿刺線以外的培養(yǎng)基仍透明澄清。⑶ 微需氧培養(yǎng)法： 5~6 %O2 、5~10%CO2和85%N2 有些微需氧菌，如空腸彎曲菌、幽門(mén)螺桿菌等，在低氧分壓的條件下生長(zhǎng)良好。簡(jiǎn)述細(xì)菌的培養(yǎng)方法有哪些？根據(jù)不同標(biāo)本及培養(yǎng)目的的不同，可采取不同的方法進(jìn)行培養(yǎng)，常用的有普通（一般）培養(yǎng)法（又叫需氧培養(yǎng)法）、二氧化碳培養(yǎng)法、微需氧培養(yǎng)法及厭氧培養(yǎng)法。⑷ 液體培養(yǎng)基接種法：用于純種增菌或生化反應(yīng)。⑵ 含糖/明膠培養(yǎng)基：113 ℃滅菌15min。應(yīng)用：主要用于觀察活菌的動(dòng)力和運(yùn)動(dòng)方式。影響革蘭染色的關(guān)鍵步驟是脫色。⑵ 化學(xué)說(shuō)：G+菌菌體含有大量的核糖核酸鎂鹽，可與碘、結(jié)晶紫牢固結(jié)合，使已著色的菌體不易脫色?？勺鳛榉窝祖溓蚓燃?xì)菌的血清學(xué)診斷。）⑹ IMViC試驗(yàn)：吲哚（I）、甲基紅（M）、VP（V）及枸櫞酸鹽利用（C）四種試驗(yàn)，常用于腸道桿菌的鑒定，合稱IMViC試驗(yàn)。⑵ 分離培養(yǎng)：臨床標(biāo)本中含有多種細(xì)菌，可經(jīng)過(guò)劃線接種到固體培養(yǎng)基表面分散開(kāi)，經(jīng)過(guò)1824小時(shí)培養(yǎng)后可得到單個(gè)菌落。⑶ 穩(wěn)定期：細(xì)菌數(shù)仍在增加，死菌數(shù)與活菌數(shù)形成一種動(dòng)態(tài)平衡。TB（結(jié)核桿菌）約18小時(shí)，產(chǎn)氣莢膜梭菌為8分鐘。⒁ 芽胞不是細(xì)菌的 ，而是細(xì)菌的 。⑹ 細(xì)菌莢膜的功能是、，普通菌毛的功能為，鞭毛的功能為。主要生物學(xué)性狀：⑴ 高度多形性；⑵ 著色不勻，大多染成革蘭陰性；⑶ 培養(yǎng)條件要求高，必須在高滲低瓊脂含血清的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)；⑷ 生長(zhǎng)緩慢（2～7天），菌落呈荷包蛋樣；⑸ 去除誘發(fā)因素后，有些L型可回復(fù)為原菌；⑹ 生化反應(yīng)與原菌有明顯差異；⑺ 存在于細(xì)胞壁的抗原減弱或丟失；臨床意義：可引起慢性和反復(fù)發(fā)作的感染，如尿路感染、骨髓炎、心內(nèi)膜炎等，并常在使用作用于細(xì)胞壁的抗菌藥物治療過(guò)程中發(fā)生。⑷ 懸滴法或壓滴法觀察細(xì)菌的動(dòng)力間接判斷該菌有無(wú)鞭毛；菌毛的功能：⑴ 普通菌毛：細(xì)菌的黏附結(jié)構(gòu)，與細(xì)菌的致病性有關(guān)。細(xì)胞膜的功能： ⑴ 物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)；⑵ 生物合成；⑶ 細(xì)胞呼吸；⑷ 形成中介體，參與細(xì)菌分裂等。細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)與特殊結(jié)構(gòu)以及它們的主要功能。中介體參與細(xì)菌的分裂和能量的產(chǎn)生，有類似于真核細(xì)菌紡錘絲與線粒體的作用。⑵ 生物學(xué)性狀基本相同的細(xì)菌群體構(gòu)成一個(gè)菌種，不同來(lái)源的同一菌種的細(xì)菌稱為該菌的不同_____；性狀相近關(guān)系密切的若干菌種構(gòu)成____；具有某種細(xì)菌典型特征的菌株稱該菌的____。包括細(xì)菌、病毒、真菌等三類。⑴ 確保臨床標(biāo)本可靠；⑵ 全面了解機(jī)體正常菌群；⑶ 保證檢驗(yàn)質(zhì)量、快速準(zhǔn)確提供信息；⑷ 微生物學(xué)定性、定量和定位分析，并結(jié)合病情（三定一結(jié)合）；⑸ 加強(qiáng)與臨床聯(lián)系。C）；芽胞⑵ 菌株、菌屬、標(biāo)準(zhǔn)菌株（典型菌株） 細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)名詞解釋：細(xì)菌L型；中介體；質(zhì)粒；芽胞；莢膜腫脹試驗(yàn)⑴ 細(xì)菌L型：是指細(xì)胞壁缺陷型的細(xì)菌。芽胞的大小、形態(tài)、位置等隨菌種而異，有助于細(xì)菌鑒別。⑷ G菌外膜是一種屏障結(jié)構(gòu)，阻止某些抗生素的進(jìn)入，成為細(xì)菌耐藥的機(jī)制之一。莢膜染色特點(diǎn)：不易著色。項(xiàng)目 革蘭陽(yáng)性菌 革蘭陰性菌 與細(xì)胞壁的關(guān)系染色性 紫色 紅色 細(xì)胞壁對(duì)酒精的通透性抗原性 主要為磷壁酸 主要為外膜 細(xì)胞壁的化學(xué)組成不同毒性 無(wú)內(nèi)毒素（以外毒素為主）有內(nèi)毒素 內(nèi)毒素為陰性菌細(xì)胞壁成分對(duì)青霉素的作用 有效 無(wú)效 作用部位為肽聚糖 五肽交聯(lián)橋?qū)θ芫傅淖饔?有效 無(wú)效 作用部位為肽聚糖 聚糖骨架簡(jiǎn)述細(xì)菌L型的形成、主要生物學(xué)性狀及其臨床意義。⑷ G+菌細(xì)胞壁的肽聚糖由、組 成。⑾ 莢膜具有 、 作用和 作用。⑶ 內(nèi)毒素：即革蘭陰性菌細(xì)胞壁的脂多糖，其毒性成分為脂質(zhì)A，當(dāng)菌體死亡裂解后才釋放，是革蘭陰性菌的主要致病物質(zhì)。包括遲緩期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期、衰退期這四個(gè)時(shí)期。專性厭氧菌不能在有氧環(huán)境中生長(zhǎng)繁殖的原因：缺乏Eh高的呼吸酶（細(xì)胞色素和細(xì)胞色素氧化酶）；缺乏分解有毒氧基團(tuán)的酶（超氧化物歧化酶SOD、觸酶、過(guò)氧化物酶）。許多菌落融合在一起形成菌苔。⑻ CAMP試驗(yàn)：B群鏈球菌產(chǎn)生一種細(xì)胞外CAMP因子，可增強(qiáng)金黃色葡萄球菌β溶血素的活性，因此，血平板上，在兩菌（B群鏈球菌與金黃色葡萄球菌）交界處出現(xiàn)箭頭狀溶血區(qū)。革蘭染色原理：⑴ 通透性說(shuō)：主要是由于兩類細(xì)菌的細(xì)胞壁成分和結(jié)構(gòu)的不同。影響革蘭染色的因素：⑴ 操作因素：涂片的厚、??；標(biāo)本是否固定好；染色與脫色時(shí)間的長(zhǎng)短。方法： 自然干燥 固定15min 3～5min制片 →→→→ 10%鞣酸 →→→→ %龍膽紫 →→→→ 鏡檢 水洗 水洗結(jié)果：有細(xì)胞壁的細(xì)菌僅菌體周邊染成紫色，菌體內(nèi)部無(wú)色；無(wú)細(xì)胞壁的細(xì)菌（如L型細(xì)菌）可見(jiàn)整個(gè)菌體濃染呈紫色。⑵ 合適的酸堿度。 ★目的：使混合的細(xì)菌呈單個(gè)分散生長(zhǎng)，形成單個(gè)菌落，以便獲得純菌。1ml 標(biāo)本中活菌數(shù)= 全平板CFU稀釋倍數(shù)。隨燃燒產(chǎn)生的CO2增加，蠟燭自行熄滅，此時(shí)缸內(nèi)CO2濃度約為5%～10%。分別觀察下列生長(zhǎng)現(xiàn)象：⑴ 固體培養(yǎng)基：細(xì)菌得以分離培養(yǎng)生成菌落從而獲得純種，主要用于細(xì)菌的分離純化、鑒定以及藥敏試驗(yàn)。⑴ 基礎(chǔ)培養(yǎng)基：如營(yíng)養(yǎng)肉湯、營(yíng)養(yǎng)瓊脂、蛋白胨水等⑵ 增菌培養(yǎng)基：① 通用增菌培養(yǎng)基：如血平板、血清肉湯等。結(jié)果：呈現(xiàn)紅色為陽(yáng)性；橘紅色為弱陽(yáng)性；黃色為陰性。七葉苷水解試驗(yàn)：原理：某些細(xì)菌可將七葉苷分解成葡萄糖和七葉素，七葉素與培養(yǎng)基中枸櫞酸鐵中的二價(jià)鐵離子反應(yīng)，生成黑色的化合物，使培養(yǎng)基呈黑色。結(jié)果：加入試劑后，兩者液面接觸處出現(xiàn)紅色為陽(yáng)性；無(wú)色為陰性。陰性時(shí)應(yīng)繼續(xù)觀察4天。埃希菌屬、志賀菌屬、愛(ài)德華菌屬和耶爾森菌屬均為陰性；產(chǎn)氣腸桿菌、沙門(mén)菌屬、克雷伯菌屬、黏質(zhì)和液化沙雷菌、某些變形桿菌以及枸櫞酸桿菌為陽(yáng)性。? 提示2：基礎(chǔ)培養(yǎng)基通常使用高壓蒸汽滅菌法滅菌，以殺滅包括細(xì)菌繁殖體和芽胞在內(nèi)的所有微生物。⑶ 菌群失調(diào)癥：宿主某部位正常菌群中各菌種間的比例發(fā)生較大幅度改變并超出正常范圍的狀態(tài)稱為菌群失調(diào)。⑻ 無(wú)菌操作：防止微生物進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)。但濾過(guò)除菌法只能除去細(xì)菌，一般不能除去病毒、支原體、衣原體和細(xì)菌的 L 型。繁殖體 ：煮沸100℃，15～30min⑷ 間歇蒸氣滅菌法：如血清培養(yǎng)基的滅菌。請(qǐng)敘述紫外線的殺菌作用機(jī)制、特點(diǎn)和注意事項(xiàng)。⑵ 特點(diǎn)與主要用途：① 以濃度為70% ～75%時(shí)殺菌力最強(qiáng)。%~%過(guò)氧乙酸：類似于過(guò)氧化氫。常用的滅菌要求是濃度800~1200mg/L；相對(duì)濕度55%~60%；50 ℃；6h?；瘜W(xué)消毒劑的殺菌機(jī)制有哪些？各自種類的代表是什么？⑴ 使菌體蛋白變性或凝固，導(dǎo)致細(xì)菌死亡：酚類（高濃度）、醇類、重金屬鹽類、酸堿類、醛類⑵ 干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝：某些氧化劑、重金屬鹽類(低濃度)與細(xì)菌酶蛋白的SH基結(jié)合而使有關(guān)酶失去活性，導(dǎo)致細(xì)菌代謝發(fā)生障礙而死亡；⑶ 損傷細(xì)胞膜，能降低菌細(xì)胞的表面張力并增加其通透性，胞外液體內(nèi)滲，導(dǎo)致細(xì)菌破裂：酚類（低濃度）、表面活性劑、脂溶劑毒性噬菌體增殖以何種方式增殖？它的增殖過(guò)程包括哪幾個(gè)階段？毒性噬菌體以復(fù)制方式增殖。⑺ 噬菌體的化學(xué)組成主要為_(kāi)______、_______。常見(jiàn)的細(xì)菌變異現(xiàn)象有哪些？⑴ 形態(tài)、結(jié)構(gòu)變異：如 L型細(xì)菌的產(chǎn)生；莢膜、芽孢、鞭毛的形成與缺失。F+菌：帶有F質(zhì)粒具有性菌毛的細(xì)菌，這種細(xì)菌可通過(guò)性菌毛將遺傳物質(zhì)傳遞給F菌。⑵ 毒血癥是指致病菌侵入宿主機(jī)體后，只在機(jī)體局部生長(zhǎng)繁殖，病菌不進(jìn)入血循環(huán)，但其產(chǎn)生的外毒素入血。⑹ 外源性感染：病原菌來(lái)源于宿主體外的感染。避免雜菌污染標(biāo)本；⑵ 因時(shí)取材。⑵ 細(xì)菌的毒力由 和 構(gòu)成。① 可預(yù)測(cè)抗菌治療的效果。目前，我國(guó)主要遵循美國(guó)NCCLS（National mittee for clinical laboratory standards ,NCCLS）制定的抗菌藥物敏感性試驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)。 藥物敏感試驗(yàn)（AST）結(jié)果如何解釋？簡(jiǎn)述常用的藥物敏感試驗(yàn)（AST）方法有哪些？ 不論是抑菌圈的量取或MIC、IC值的讀取，根NCCLS標(biāo)準(zhǔn)，藥物敏感試驗(yàn)（AST）結(jié)果最終以“敏感”、 “耐藥”和“中介”報(bào)告。該法的特點(diǎn)是可同時(shí)做多株細(xì)菌的MIC測(cè)定，結(jié)果的重復(fù)性優(yōu)于肉湯稀釋法，且易于發(fā)現(xiàn)耐藥突變株或污染，是驗(yàn)證新藥體外抗菌活性時(shí)常用的參照標(biāo)準(zhǔn)。抑菌圈的大小反映測(cè)試菌對(duì)測(cè)定藥物的敏感程度，并與該藥對(duì)測(cè)試菌的MIC呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。校正后的菌液應(yīng)在15分鐘內(nèi)接種。 但對(duì)頭霉素、碳青霉稀及β內(nèi)酰胺酶抑制復(fù)合制劑可能敏感。臨床意義 :耐萬(wàn)古霉素腸球菌目前尚無(wú)有效治療方法，但對(duì)青霉素敏感的VRE可用青霉素和慶大霉素聯(lián)合治療，若對(duì)青霉素耐藥而不是高水平耐氨基糖苷類可用替考拉寧＋慶大霉素。此種溶血環(huán)稱為α溶血（甲型溶血）。肺炎鏈球菌：引起大葉性肺炎、支氣管炎等疾病。淋球菌：淋病。主要生化反應(yīng)：觸酶試驗(yàn)：+ （籍此區(qū)別葡萄球菌屬與鏈球菌屬）多數(shù)菌能分解葡萄糖、麥芽糖和蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。甲鏈?zhǔn)强谇患吧虾粑啦课坏恼＞?，隨口腔破潰處進(jìn)入血液并引起菌血癥，隨血流到達(dá)心臟，如果心瓣膜有損傷或有先天性缺陷，細(xì)菌則在損傷部位繁殖，引起亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎。對(duì)寒冷、濕熱、干燥、消毒劑、紫外線均敏感。 ⑵ 菌落特征：在血平板上菌落細(xì)小灰白，周圍有寬大的透明溶血環(huán)。你對(duì)患者的初步診斷是什么？應(yīng)如何進(jìn)行微生物學(xué)檢查？初步診斷是淋病奈瑟菌引起的急性淋菌性尿道炎。發(fā)病一周前面部皮膚有一癤子，曾自行擠壓過(guò)。標(biāo)本：血液—血培養(yǎng)—分離培養(yǎng)—鑒定并做藥敏試驗(yàn)—報(bào)告血培養(yǎng)：取血液標(biāo)本5ml注入含50ml葡萄糖肉湯增菌液的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，混勻后37℃培養(yǎng)18~24h，培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體渾濁、溶血、并有膠凍狀凝固。將腦脊液離心沉淀后取沉渣涂片，革蘭染色鏡檢，發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞內(nèi)外均有革蘭陰性雙球菌。提示4：對(duì)兒童注射莢膜多糖疫苗。⑷ 變形桿菌的菌株X1XXk的O抗原與某些立克次體有共同抗原成分，可發(fā)生交叉反應(yīng)。大腸桿菌形成紫黑色帶金屬光澤菌落　☆EMB平板：含乳糖、伊紅和美藍(lán)指示劑選擇性培養(yǎng)基的特點(diǎn)：l 均含有乳糖和酸堿指示劑：　 細(xì)菌分解乳糖產(chǎn)酸，使培養(yǎng)基pH降低，指示劑呈酸性變色。⑸ MIU試驗(yàn)：即動(dòng)力、吲哚、脲酶試驗(yàn)的合稱。腸桿菌科名詞解釋：遷徙生長(zhǎng)現(xiàn)象； KIA試驗(yàn)；肥達(dá)試驗(yàn)；外斐反應(yīng)；MIU試驗(yàn)。腦脊液離心沉淀涂片，中性粒細(xì)胞內(nèi)外見(jiàn)革蘭陰性雙球菌，結(jié)合患兒臨床表現(xiàn)和腦脊液檢查特點(diǎn)可初步診斷為腦膜炎奈瑟菌。鑒定：取可疑菌落進(jìn)行革蘭染色、觸酶試驗(yàn)、血漿凝固酶試驗(yàn)、發(fā)酵甘露醇（耐熱核酸酶）。入院檢查：T：℃，Bp：120/70mmHg，急性面容，神清，煩躁，氣促。⑵ 分離培養(yǎng)：取材接種于巧克力平板，觀察典型菌落；⑶ 鑒定：氧化酶試驗(yàn)、分解利用葡萄糖、多克隆和單克隆熒光抗體染色法協(xié)同凝集實(shí)驗(yàn)等?！靖健挎溓蚓闹饕b定依據(jù)：A群鏈球菌－－桿菌肽敏感試驗(yàn)（+）、PYR（ +）B 群鏈球菌－－CAMP試驗(yàn)（+）、馬尿酸鈉水解試驗(yàn)（+）D群鏈球菌－－膽汁七葉苷試驗(yàn)（+）、％氯化鈉生長(zhǎng)（－）肺炎鏈球菌－－Optochin敏感試驗(yàn)（+）、膽汁溶菌試驗(yàn)（+）、形態(tài)和菌落特征典型甲型鏈球菌－－Optochin敏感試驗(yàn)（－）、膽汁溶菌試驗(yàn)（－）、菊糖分解試驗(yàn)（）腸球菌－－革蘭陽(yáng)性球菌，短鏈排列；營(yíng)養(yǎng)要求高；在10℃、45℃；血平板上溶血現(xiàn)象不定；觸酶試驗(yàn)（）；膽汁七葉苷試驗(yàn)（+）；％NaCl生長(zhǎng)試驗(yàn)（+）；PYR試驗(yàn)（+）；血清學(xué)分類屬D群。且能產(chǎn)生自溶酶。簡(jiǎn)述肺炎鏈球菌鑒定的主要依據(jù)。簡(jiǎn)述從可疑金黃色葡萄球菌敗血癥患者中分離鑒定細(xì)菌的步驟、依據(jù)和報(bào)告。簡(jiǎn)述金黃色葡萄球菌鑒定的主要依據(jù)有哪些？金黃色葡萄球菌鑒定的主要依據(jù)有：① 涂片、革藍(lán)染色鏡檢：G+葡萄狀排列的球菌。甲型鏈球菌：條件致病菌，在一定條件下引起亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎。風(fēng)濕熱患者血清中抗O抗體比正常人顯著增高，大多在250單位左右；活動(dòng)性風(fēng)濕熱患者一般超過(guò)400單位。臨床意義:HLAR菌株，青霉素和氨基糖苷類藥物聯(lián)合治療無(wú)效，須使用萬(wàn)古霉素。對(duì)1μg苯唑西林抑菌圈直徑≤ 17mm，或MIC ≥ ／ml的凝固酶陰性葡萄球菌稱耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）。簡(jiǎn)述體外聯(lián)合藥物敏感試驗(yàn)的意義有