【正文】
子 — α 碳原子,都有光學(xué)異構(gòu)體(鏡映 體)。 ? 比旋光度 [α] D25(單位濃度、單位長(zhǎng)度下的旋光度,= α/c*l) 是氨基酸的重要物理常數(shù)之一,是鑒別各種氨基酸的重要依據(jù) 。 AA是兩性電解質(zhì) COOH NH2 H+ COO R C H NH2 H+ R C H COO NH2 R C H 酸性環(huán)境 中性 環(huán)境 堿性環(huán)境 +1 1 0 pK1 ~ 2 pK2 ~ 等電點(diǎn) 等 電點(diǎn) pI:所帶凈電荷為零。 此 氨基酸 在 pH 2 或 9 附近,有 緩沖 作用 。 為兼性離子兩側(cè)解離基團(tuán)的算術(shù)平均值 。 補(bǔ)充:化學(xué)性質(zhì) C O O HC HH 2 NR亞硝酸反應(yīng) 烴基化反應(yīng) ?;磻?yīng) 脫氨基反應(yīng) 西佛堿反應(yīng) 成鹽成酯反應(yīng) 成酰氯反應(yīng) 脫羧基反應(yīng) 疊氮反應(yīng) 側(cè)鏈反應(yīng) 茚三酮反應(yīng) 成 肽 反 應(yīng) 除 Pro生成黃色化合物外 ,其它 AA生成 藍(lán)紫色化合物( 570nm) 。 CCCOOO茚三酮 CCCOOO HO HH 2 OH 2 O水合茚三酮 C O 2N H 2R C H O ++++CCCOOHO HH 2 N C H C O O HRCCCOOO HO H+2 N H 3CCCOOCCCOO N H 4 +N H 2 O2++CCCOOOCCCOOHH O補(bǔ)充:特征光吸收 ? 在近紫外區(qū) (200400nm)只有酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸有吸收光的能力。蛋白質(zhì)除含 C,H,O外,還含有 N。 ? 不同蛋白的含氮量皆在 16%左右。 ? ? 凱氏定氮法的理論基礎(chǔ) 第二節(jié)、氨基酸的分離分析 ? 根據(jù) R基的極性。 ? ① 濾紙層析 : ? ②薄層層析 : ? 根據(jù)氨基酸的凈電荷及 R基的極性: ? ③離子交換層析 : ? 陰離子交換樹脂 N(CH3)3OH, 陽(yáng)離子交換樹脂 SO3H ? 根據(jù)氨基酸的凈電荷及質(zhì)點(diǎn)大小: ? ④電泳 : 分配層析的一般原理 ? 層析法 ―― 色層分析法(色譜 ) 系統(tǒng)的組成 固定相(靜相) 流動(dòng)相(動(dòng)相) ? 分配定律 ―― 當(dāng)溶質(zhì)在兩種給定的 互不相溶 的溶劑中分配時(shí),在一定的溫度下達(dá)到平衡后,溶質(zhì)在兩相中的濃度比值為一常數(shù) .此比值即分配系數(shù)( kd)。 ? 極性強(qiáng)的 Rf值小,疏水性強(qiáng)的 Rf大。 ? 將下列每組混合物分別用正丁醇 醋酸 水進(jìn)行紙層析,指出每組的相對(duì)遷移率。 ? (2) Phe和 Ser。 一、肽、肽鍵與肽鏈 由兩個(gè)氨基酸組成的肽稱為二肽 , 由幾個(gè)到幾十個(gè)氨基酸組成的肽稱為寡肽 , 由更多個(gè)氨基酸組成的肽則稱為多肽 。 C C N C C N C C N C C N CC H 2 C H C H 2 C H 2 C H 2C O OO H C O 2 H C H 2C O N H 2O HC H 3H 3 N+O O O OH H H H HH H H HS e r V a l T y r A sp G l nC H 3N 端 C 端肽鍵? 在多肽鏈中, 氨基酸殘基按一定的順序排列,這種排列順序稱為氨基酸順序。 ? 氨基酸的順序: N端 → C端 ? 如上述五肽可表示為: SerValTyrAspGlu ? 絲氨 酰 纈氨 酰 酪氨 酰 天冬氨 酰 谷氨 酸 肽單位 主鏈: 側(cè)鏈 二、肽的理化性質(zhì) 1. 熔點(diǎn)高。 2. 具有酸堿兩性性質(zhì)和等電點(diǎn)。每一種肽都有其相應(yīng)的等電點(diǎn)。 3. 具有旋光性。 (三肽以上) 。 肽和蛋白特有,氨基酸無(wú)。 用途:測(cè)定肽或蛋白質(zhì)含量。 ? 但是,也有許多分子量比較小的多肽以游離狀態(tài)存在。 ? 如:腦啡肽;激素類多肽;抗生素類多肽; 谷胱甘肽 ;蛇毒多肽等。 ? CONHCHCONHCH2COOH CH2 CH2 CHNH2 COOH CH2 SH ? ? ? 保護(hù)巰基酶或含 Cys的蛋白質(zhì)中 SH的還原性 防止氧化物積累 GSH+GSHGSSG 第四節(jié)、蛋白的分離 根據(jù): 所要提取的蛋白(目的蛋白)與其它蛋白(雜蛋白)的不同進(jìn)行分離。且溶解度隨外界條件如鹽濃度, pH值,溫度等而變。 鹽溶 Aggregate 蛋白質(zhì) 分子表面的疏水性 區(qū)域 ,聚集許多水分子,當(dāng) 加入 鹽時(shí) ,這些水分子被抽出,暴露出來(lái)的疏水