【正文】 及必要的預(yù)防接種，以增強自身抵抗力。適用范圍微生物實驗室的所有試劑。程序 試劑 試劑的評估、申購、驗收 用于檢測標(biāo)本的試劑必須堅持高質(zhì)量、高安全性的標(biāo)準(zhǔn)，由實驗室負(fù)責(zé)人評估、訂購。驗收內(nèi)容包括：試劑的數(shù)量、外觀、有效期及運送條件。有損壞或降解的試劑應(yīng)拒收。試劑檔案內(nèi)容包括：試劑名稱、批號、數(shù)量、生產(chǎn)商、接收日期、失效日期、儲存條件、試劑說明書、相關(guān)質(zhì)控文件及接收人員簽字等。標(biāo)識內(nèi)容包括：試劑名稱、量、濃度、或滴度、儲存條件、配制日期、失效日期（如果開瓶改變試劑有效期，必須重新登記）。低溫保存的試劑須放置于冰箱內(nèi)。注意安全存放，危害品應(yīng)分開放置，并有明顯標(biāo)識。出現(xiàn)與上述情況不符時，應(yīng)立即通知實驗室負(fù)責(zé)人，并暫停使用。取用試劑應(yīng)按有效期先后取用，標(biāo)明開瓶日期、有效期、開瓶人簽名。 試劑質(zhì)量控制 參見《室內(nèi)質(zhì)量控制管理程序》。 要求生產(chǎn)商提供培養(yǎng)基質(zhì)控資料，包括培養(yǎng)基名稱、成分、有效期、保存條件及無菌試驗、生長試驗、生化試驗的合格證明等，質(zhì)控材料至少保留2年。不符合要求時應(yīng)拒收。 自制培養(yǎng)基 應(yīng)嚴(yán)格遵守SOP配制,由勤雜人員高壓滅菌。 培養(yǎng)基保存 常規(guī)28℃保存 不常用的培養(yǎng)基應(yīng)用塑料袋包好儲存,避免脫水致某些指示劑或抑制劑濃度相對增加,而使病原菌不能生長或生長不良。 試劑警戒線 微生物實驗室應(yīng)設(shè)置試劑警戒線，以防出現(xiàn)試劑短缺而導(dǎo)致試驗無法完成。 每月月底清點試劑，清除過期試劑，預(yù)購下月需要使用的試劑。鑒定卡：GNI+：定為剩盒時預(yù)定下一批；GPI：定為剩盒時預(yù)定下一批；GNS：定為剩盒時預(yù)定下一批；GPS：定為剩盒時預(yù)定下一批……血培養(yǎng)瓶：定為剩箱時預(yù)定下一批。常規(guī)微量生化管：定為剩盒時預(yù)定下一批。2． 紫外線燈管記錄使用時間，使用超過1000小時以上更換紫外線燈管，并記錄時間。江西省新余市人民醫(yī)院檢驗科微生物實驗室版 本 號：文件標(biāo)題：微生物實驗室安全工作制度文件狀態(tài)：受控文件編號：修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編 制 者：王騰勇批 準(zhǔn) 者：賀愛民審 核 者：賀愛民發(fā) 放 號：微生物實驗室安全工作制度。，不準(zhǔn)吸煙、吃東西及用手觸摸面部。，必要資料和書籍帶入后，應(yīng)遠(yuǎn)離操作臺。未發(fā)出報告前，請勿丟棄標(biāo)本。，應(yīng)立即用過氧乙酸消毒或浸于3%來蘇兒溶液中510分，再用肥皂洗手并沖洗干凈；如誤入口內(nèi)，應(yīng)立即吐出，并用1:1000高錳酸鉀溶液或3%雙氧水漱口，根據(jù)實際情況服用有關(guān)藥物。，應(yīng)沉著處理，切勿慌張，立即關(guān)閉電閘，積極滅火。、酒精燈等是否關(guān)閉，觀察記錄培養(yǎng)箱、冰箱溫度及工作情況，用浸有消毒液的抹布將操作臺擦拭干凈，并將試劑、用具等放回原處，清理臺面，未污染的廢棄物扔進污物桶，有菌廢棄物應(yīng)送高壓滅菌后處理。，經(jīng)常清潔，注意防塵和防潮。2． 一般藥敏實驗用的標(biāo)準(zhǔn)菌ATCC2592ATCC25923和ATCC27853,菌種保管應(yīng)有專人負(fù)責(zé)，保存于冰箱中，確保菌種安全。3． 菌種應(yīng)有嚴(yán)格的登記，包括形態(tài)，分離日期，鑒定日期，簽發(fā)者，主要鑒定性能（包括形態(tài)、染色、抗原結(jié)構(gòu)、動物致病力等），并注明使用、轉(zhuǎn)移、銷毀情況及原因。5. 菌種保存范圍及向外單位轉(zhuǎn)移，應(yīng)按國家衛(wèi)生部規(guī)定執(zhí)行。并做好記錄。，必要資料和書籍帶入后，應(yīng)遠(yuǎn)離操作臺。，所有用于試驗的反應(yīng)板、吸頭等用1000g/L含氯消毒劑浸泡消毒液浸泡（至少24小時以上）后清洗或丟棄。、最好采用一次性工具，不能采用一次性工具者，每次取材前均應(yīng)徹底消毒。，不要立即用水沖洗，應(yīng)先用紙巾、布等敷料加上消毒液500g/L含氯消毒劑浸泡消毒30分鐘以上，然后再清洗。，應(yīng)立即用肥皂洗手并沖洗干凈，再外用消毒藥水，如誤入口內(nèi)，應(yīng)立即吐出，并用1:1000高錳酸鉀溶液或3%雙氧水漱口，必要時根據(jù)實際情況服用有關(guān)藥物。2． 病原微生物的培養(yǎng)標(biāo)本必須在2小時內(nèi)由輸送中心送檢并立即按種。3． 實驗室標(biāo)本姓名、編號或者標(biāo)本采集不符合要求時要退回重留標(biāo)本。2． 微生物實驗室培養(yǎng)過的平板、菌株等必須滅毒（高壓）后才可廢棄。2． 盡可能應(yīng)用一次性注射器，用過的針頭，禁止折彎、剪斷、重新蓋帽、從注射器取下，禁止用手直接操作，用過的針頭必須直接放入防穿透的容器盒中。3． 盡可能使用無針注射器和其它安全裝置。江西省新余市人民醫(yī)院檢驗科微生物實驗室版 本 號：文件標(biāo)題：工作人員保護制度文件狀態(tài)：受控文件編號：修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編 制 者：王騰勇批 準(zhǔn) 者：賀愛民審 核 者：賀愛民發(fā) 放 號：工作人員保護制度1． 工作人員須穿工作服，戴工作帽，必要時穿隔離衣、戴口罩、手套。江西省新余市人民醫(yī)院檢驗科微生物實驗室版 本 號：文件標(biāo)題：臨床微生物實驗室消毒防護制度文件狀態(tài)：受控文件編號：修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編 制 者：王騰勇批 準(zhǔn) 者：賀愛民審 核 者：賀愛民發(fā) 放 號：臨床微生物實驗室消毒防護制度1． 加強學(xué)習(xí)，嚴(yán)格執(zhí)行生物安全制度，定期檢查。3． 實驗室內(nèi)不能高聲談笑，不準(zhǔn)吸煙、飲食，不要用手指觸摸頭、面等部位以免造成污染。4． 感染物污染桌面或地面應(yīng)立即用500g/L含氯消毒劑消毒劑溶液覆蓋其上，經(jīng)30分鐘方可抹去，如工作服被病原微生物污染，應(yīng)立即脫下，進行高壓滅菌處理。6． 培養(yǎng)過的平板、菌株或有感染性標(biāo)本必須滅毒（高壓）后才可廢棄。8． 易燃、易爆、劇毒化學(xué)物品要有專人保管。 10. 工作結(jié)束后，用500g/L含氯消毒劑溶液消毒工作臺面；工作人員雙手應(yīng)用肥皂、 流水清洗三遍以上，關(guān)好窗戶、檢查好電源后，方可離開實驗室。 江西省新余市人民醫(yī)院檢驗科微生物實驗室版 本 號：文件標(biāo)題：微生物實驗室質(zhì)量管理制度文件狀態(tài)：受控文件編號：修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編 制 者：王騰勇批 準(zhǔn) 者：賀愛民審 核 者：賀愛民發(fā) 放 號：微生物實驗室質(zhì)量管理制度 目的規(guī)范質(zhì)量管理程序，保證檢驗的質(zhì)量。 職責(zé)，并監(jiān)督質(zhì)量管理程序的實施。程序 質(zhì)量管理內(nèi)容 包括人員、操作規(guī)程、申請單、報告和記錄、標(biāo)本、儀器、培養(yǎng)基、試劑、檢驗方法、質(zhì)量控制等。 操作規(guī)程 規(guī)定檢驗申請、標(biāo)本采集開始到發(fā)出檢測結(jié)果報告為止的全過程的操作規(guī)程和管理程序。 申請單 申請單應(yīng)包含：病人信息、申請醫(yī)生姓名或工號、申請科室、申請項目、標(biāo)本種類、標(biāo)本采集和接收時間，必要時應(yīng)標(biāo)明臨床診斷、采樣部位、抗菌藥物的應(yīng)用情況、預(yù)期微生物的種類等。 記錄和報告，如標(biāo)本接收、細(xì)菌鑒定流程表、檢驗結(jié)果審核等。 結(jié)果報告應(yīng)包括檢驗結(jié)果、結(jié)果解釋等。 對標(biāo)本質(zhì)量進行評估。 儀器質(zhì)量管理 儀器在安裝時及常規(guī)使用中應(yīng)滿足檢驗所需的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并具有達(dá)標(biāo)的證明文件。 要求保留每件儀器影響檢驗性能的相關(guān)記錄。經(jīng)培訓(xùn)考核通過并經(jīng)實驗室授權(quán)的工作人員方可操作儀器。 按制造商的要求檢測并記錄儀器的運行情況，定期進行校準(zhǔn)。 一旦發(fā)現(xiàn)儀器故障，應(yīng)停止使用，清楚標(biāo)記后妥善存放至其被修復(fù)。 如果儀器脫離實驗室未被直接控制，或已被修理、維護過，該儀器在實驗室重新使用之前，應(yīng)經(jīng)校準(zhǔn)、驗證或檢測表明其達(dá)到規(guī)定的可接受標(biāo)準(zhǔn)后方可再使用。 試劑的質(zhì)量管理 嚴(yán)格監(jiān)督自配培養(yǎng)基的質(zhì)量并做好記錄。 所有試劑（包括染液和抗血清）應(yīng)有標(biāo)簽，用陰、陽對照質(zhì)控，合理保存，在有效期內(nèi)使用并做好記錄。 樣本的質(zhì)量控制，參見《樣本采集、運送程序》。 藥物敏感試驗 根據(jù)分離菌種的生物學(xué)特性和感染部位，選擇恰當(dāng)?shù)乃幬镞M行藥物敏感性試驗（參見《室內(nèi)質(zhì)量控制管理程序》）。2. 適用范圍 省臨床檢驗中心組織的微生物室間質(zhì)控。 4． 程序 微生物室所開設(shè)的檢測項目應(yīng)參加實驗室間比對計劃。 質(zhì)控標(biāo)本的接收和驗收 收到質(zhì)控物后由相關(guān)人員登記、簽字，根據(jù)質(zhì)控標(biāo)本的有關(guān)說明對質(zhì)控物的數(shù)量、批號、包裝進行驗收并將質(zhì)控標(biāo)本按要求保存。檢測結(jié)果須在截止日期前上報。 結(jié)果上報截止日期之前嚴(yán)禁與其他實驗室交流室間質(zhì)控的檢測結(jié)果。江西省新余市人民醫(yī)院檢驗科微生物實驗室版 本 號：文件標(biāo)題：室內(nèi)質(zhì)量控制管理程序文件狀態(tài)：受控文件編號：修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編 制 者：王騰勇批 準(zhǔn) 者：賀愛民審 核 者：賀愛民發(fā) 放 號：室內(nèi)質(zhì)量控制管理程序1． 目的規(guī)范微生物實驗室管理程序，確保臨床報告的質(zhì)量。3． 職責(zé)實驗室檢驗人員均須熟知并遵守本程序?？陬^申請追加樣本檢驗項目，必須在樣本有效期內(nèi)申請，并補正式的檢驗申請單。 樣本的采集手冊 實驗室應(yīng)制定樣本采集手冊，指導(dǎo)正確采集和處理樣本。 樣本的接收 樣本接收人員應(yīng)嚴(yán)格按照〈〈標(biāo)本接收、標(biāo)識程序〉〉、〈〈標(biāo)本拒收程序〉〉對樣本接收或拒收，并記錄。 樣本儲存 微生物實驗室接種崗位檢驗人員按照〈〈微生物標(biāo)本檢驗前儲存程序〉〉正確儲存未能及時處理的標(biāo)本。 分析中質(zhì)量管理 試劑的質(zhì)量控制 所有試劑用于檢測標(biāo)本前，必須做質(zhì)控以評估質(zhì)量并記錄質(zhì)控結(jié)果，只有質(zhì)控合格才可使用。 觸酶、氧化酶、凝固酶、β內(nèi)酰胺酶、Optochin； VITEK32細(xì)菌鑒定系統(tǒng)使用的每一種鑒定卡及相關(guān)試劑； 表21 常用試驗試劑質(zhì)量控制試劑 陽性對照 陰性對照 監(jiān)測頻率氧化酶 銅綠假單胞菌ATCC27853 大腸埃希菌ATCC25922 每次新配制時及使用中每個工作日觸酶 金黃色葡萄球菌ATCC25923 A群鏈球菌ATCC19615 每次新配制時及使用中每個工作日靛基質(zhì) 大腸埃希菌ATCC25922 肺炎克雷伯菌ATCC13883 1%蛋白胨水及靛基質(zhì)試劑：每次新配制時及使用中每個工作日直接用于檢測病人標(biāo)本有內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)的抗原試驗如：金黃色葡萄球菌乳膠凝集試劑（每天或每次做質(zhì)控）；抗血清（至少每半年用陰、陽性質(zhì)控菌株做質(zhì)控）；革蘭染液（每周一次用陰、陽性質(zhì)控片做質(zhì)控）；抗酸染液（每次使用要求用陰、陽性質(zhì)控片做質(zhì)控）；自制試劑（每配制一批新試劑做質(zhì)控）； 平行試驗 新批號試劑使用前須用老試劑或參考材料平行試驗。 缺陷或失效試劑只能用于培訓(xùn)員工業(yè)務(wù)能力，否則報廢處理。 培養(yǎng)基的質(zhì)量控制 購買的有質(zhì)量保證標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)基 實驗室應(yīng)保存制造商所遵循的質(zhì)量保證標(biāo)準(zhǔn)，以及每批號產(chǎn)品完成無菌試驗、生長試驗、生化試驗及質(zhì)量控制性能的合格證明等文件；無質(zhì)量保證標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)基，每批號和（或）每次購買的產(chǎn)品應(yīng)檢測相應(yīng)的性能，包括生長試驗或與舊批號平行試驗、生長抑制試驗（適用時）、生化試驗（適用時）等。 自制培養(yǎng)基 每批號產(chǎn)品應(yīng)檢測相應(yīng)的性能，包括無菌試驗、生長試驗或與舊批號平行試驗、生長抑制試驗（適用時）、生化試驗（適用時）等。如發(fā)現(xiàn)與上述情況不符的培養(yǎng)基，應(yīng)不予使用。35`C培養(yǎng)24小時后觀察是否有細(xì)菌生長，無細(xì)菌生長為合格。無菌生理鹽水1：100稀釋，每塊平板接種10ul（濃度相當(dāng)于10~310~4CFU/平板）。符合生長、生化試驗質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)者方可使用。 表22 生化試驗用培養(yǎng)基的質(zhì)控 培養(yǎng)基 質(zhì)控菌株 鑒定標(biāo)準(zhǔn)克氏雙糖鐵培養(yǎng)基 大腸埃希菌ATCC49247 + / + 奇異變形桿菌ATCC49005 / +，H2S+ 福氏志賀菌 質(zhì)控菌株 / + 銅綠假單胞菌ATCC27853 / 1%蛋白胨水（靛基質(zhì)用） 大腸埃希菌ATCC25922 + 肺炎克雷伯菌ATCC13883 科瑪嘉念珠菌顯色平板 光滑念珠菌ATCC90030 紫色、光滑 白念珠菌ATCC90028 綠色 熱帶念珠菌ATCC981083 藍(lán)灰色 克柔念珠菌 質(zhì)控菌株 粉紅色、表面毛糙……. 表23 培養(yǎng)基的生長試驗質(zhì)控 培養(yǎng)基 質(zhì)控菌株