【正文】 日或5日無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)可發(fā)出報(bào)告涂片、染色耐氧試驗(yàn)儀器或手工細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)厭氧血平板生長(zhǎng)發(fā)出報(bào)告8. 結(jié)果報(bào)告 培養(yǎng)48h無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)，報(bào)告”培養(yǎng)2日無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)”。11. 危急值報(bào)告涂片發(fā)現(xiàn)細(xì)菌或培養(yǎng)陽(yáng)性均需要及時(shí)向臨床報(bào)告結(jié)果。培養(yǎng)沙門菌和志賀菌的標(biāo)本應(yīng)放置磷酸鹽甘油溶液中保存。 診斷血清。
　　 霍亂弧菌培養(yǎng)　參見(jiàn)《霍亂弧菌檢驗(yàn)操作規(guī)程》 。
　　 氣單胞菌和鄰單胞菌的培養(yǎng)　參見(jiàn)《氣單胞菌屬檢驗(yàn)操作規(guī)程》和《鄰單胞菌屬檢驗(yàn)操作規(guī)程》。②真菌性：念珠菌、毛霉菌等。
　 氣管鏡下采集法　在病灶附近用導(dǎo)管吸或用支氣管刷直接取得標(biāo)本。 未用指定的無(wú)菌容器留痰作細(xì)菌培養(yǎng)?！　?肉眼觀察　包括顏色、黏度、有無(wú)血絲或膿。萋尼染色弱陽(yáng)性則報(bào)告革蘭陽(yáng)性桿菌疑似諾卡菌。9. 注意事項(xiàng) 痰標(biāo)本一般不可采用肉湯或高選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行增菌培養(yǎng)。醫(yī)院獲得性肺炎的常見(jiàn)病原菌是革蘭陰性桿菌，主要有肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、沙雷菌屬和腸桿菌屬細(xì)菌等。 標(biāo)本采集由臨床醫(yī)師以無(wú)菌要求做腰椎穿刺，抽取腦脊液2～3ml，盛于無(wú)菌容器中送檢。革蘭陰性菌鑒定卡(GNI+)、革蘭陰性細(xì)菌藥敏卡(GNS)、革蘭陽(yáng)性菌鑒定卡(GPI)、革蘭陽(yáng)性細(xì)菌藥敏卡(GPS)、藥敏紙片、ATB板條等，有效期及儲(chǔ)存條件參見(jiàn)試劑說(shuō)明書。必要時(shí)可作生化反應(yīng)進(jìn)一步鑒定。10. 臨床意義正常人的腦脊液是無(wú)菌的，檢出細(xì)菌提示細(xì)菌性（急性化膿性或結(jié)核性等）腦膜炎。2. 適用范圍尿液。 尿標(biāo)本采集應(yīng)及時(shí)送檢，2h內(nèi)進(jìn)行接種。 接種針、接種環(huán)、電熱灼燒器、顯微鏡、孵育箱、CO2 培養(yǎng)箱等。 標(biāo)本保存采集標(biāo)本后立即送到實(shí)驗(yàn)室，不能及時(shí)送檢可置冰箱。 兒童、嬰兒　先以無(wú)菌生理鹽水棉球洗凈其外陰部或外生殖器，將無(wú)菌試管或瓶口對(duì)準(zhǔn)尿道口，以膠布固定于皮膚上，待尿排出后送檢。85%腦膿腫患者腦脊液培養(yǎng)可檢出厭氧菌，有時(shí)可為厭氧菌和需氧菌混合感染。查見(jiàn)細(xì)菌，報(bào)告菌名和藥敏結(jié)果。　　 涂片檢查
　　 一般細(xì)菌涂片檢查　外觀混濁或膿樣腦脊液可直接涂片，無(wú)色、透明的腦脊液，應(yīng)3000r／minl10～15min離心后取沉淀物涂片、革蘭染色、鏡檢。 標(biāo)本未用無(wú)菌試管留取。11. 危急值報(bào)告如查出抗酸桿菌陽(yáng)性，則應(yīng)及時(shí)向臨床報(bào)告并作報(bào)傳染病報(bào)告。下呼吸道的痰液應(yīng)是無(wú)細(xì)菌的，而經(jīng)口腔咳出的痰帶有多種上呼吸道的正常寄生菌（如草綠色鏈球菌）。，作出初步判斷，然后按各類細(xì)菌特征進(jìn)行生化鑒定，并同時(shí)作藥物敏感試驗(yàn)。
一般細(xì)菌涂片　挑取膿性或血性痰液制成薄而均勻的涂片，革蘭染色后鏡檢。革蘭陰性菌鑒定卡(GNI+)、革蘭陰性細(xì)菌藥敏卡(GNS)、革蘭陽(yáng)性菌鑒定卡(GPI)、革蘭陽(yáng)性細(xì)菌藥敏卡(GPS)、真菌鑒定卡(YBC)、藥敏紙片、ATB板條等，有效期及儲(chǔ)存條件參見(jiàn)試劑說(shuō)明書。 痰標(biāo)本呈水樣或唾液樣。2. 適用范圍呼吸道標(biāo)本培養(yǎng)和涂片檢查。 痢疾患者要采集大量膿血標(biāo)本另行培養(yǎng)。
　　 金黃色葡萄球菌培養(yǎng)　參見(jiàn)《葡萄球菌屬檢驗(yàn)操作規(guī)程》。因此，糞便標(biāo)本一般不作涂片檢查。 直腸拭子未置于運(yùn)送培養(yǎng)基中。 標(biāo)本采集 自然排便采集　自然排便后，挑取其膿血、黏液部分2～3g，液體糞便取絮狀物2～3ml，盛于滅菌容器內(nèi)，或置于保存液（運(yùn)送培養(yǎng)基）、增菌培養(yǎng)基中送檢。 體液均需做厭氧培養(yǎng)，故輸送過(guò)程嚴(yán)格厭氧環(huán)境。如發(fā)現(xiàn)有菌生長(zhǎng)，立即涂片鏡檢、生化鑒定和藥敏試驗(yàn)。 接種針、接種環(huán)、電熱灼燒器、顯微鏡、孵育箱、CO2 培養(yǎng)箱等。 標(biāo)本采集采用無(wú)菌方法采集體內(nèi)可疑感染部位的液體約2ml，注入無(wú)菌試管，或抽取穿刺液1～2ml注入多功能體液培養(yǎng)瓶，或抽取穿刺液2～5ml注入血培養(yǎng)瓶，混勻，立即送檢。伸入斜面培養(yǎng)管內(nèi)，先從斜面底部到頂端拖一條接種線，再自下而上地蜿蜒劃線，或直接自下而上地蜿蜒劃線。每劃一個(gè)區(qū)域，應(yīng)將接種環(huán)燒灼一次，待冷卻后再劃下一區(qū)域。腦脊液標(biāo)本需涂片檢查。江西省新余市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版 本 號(hào)：文件標(biāo)題：標(biāo)本處理標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件狀態(tài)：受控文件編號(hào)：修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編 制 者：王騰勇批 準(zhǔn) 者：賀愛(ài)民審 核 者：賀愛(ài)民發(fā) 放 號(hào)：標(biāo)本處理標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1. 目的規(guī)范標(biāo)本處理標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，2. 范圍臨床微生物標(biāo)本3. 職責(zé)微生物檢驗(yàn)人員嚴(yán)格執(zhí)行本程序4. 程序 血液標(biāo)本接收標(biāo)本后，立即對(duì)標(biāo)本進(jìn)行編號(hào)、登記。符合生長(zhǎng)、生化試驗(yàn)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)者方可使用。 自制培養(yǎng)基 每批號(hào)產(chǎn)品應(yīng)檢測(cè)相應(yīng)的性能，包括無(wú)菌試驗(yàn)、生長(zhǎng)試驗(yàn)或與舊批號(hào)平行試驗(yàn)、生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)（適用時(shí)）、生化試驗(yàn)（適用時(shí)）等。 分析中質(zhì)量管理 試劑的質(zhì)量控制 所有試劑用于檢測(cè)標(biāo)本前，必須做質(zhì)控以評(píng)估質(zhì)量并記錄質(zhì)控結(jié)果，只有質(zhì)控合格才可使用?？陬^申請(qǐng)追加樣本檢驗(yàn)項(xiàng)目，必須在樣本有效期內(nèi)申請(qǐng)，并補(bǔ)正式的檢驗(yàn)申請(qǐng)單。檢測(cè)結(jié)果須在截止日期前上報(bào)。 藥物敏感試驗(yàn) 根據(jù)分離菌種的生物學(xué)特性和感染部位，選擇恰當(dāng)?shù)乃幬镞M(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)（參見(jiàn)《室內(nèi)質(zhì)量控制管理程序》）。 如果儀器脫離實(shí)驗(yàn)室未被直接控制，或已被修理、維護(hù)過(guò)，該儀器在實(shí)驗(yàn)室重新使用之前，應(yīng)經(jīng)校準(zhǔn)、驗(yàn)證或檢測(cè)表明其達(dá)到規(guī)定的可接受標(biāo)準(zhǔn)后方可再使用。 要求保留每件儀器影響檢驗(yàn)性能的相關(guān)記錄。 記錄和報(bào)告，如標(biāo)本接收、細(xì)菌鑒定流程表、檢驗(yàn)結(jié)果審核等。 職責(zé)，并監(jiān)督質(zhì)量管理程序的實(shí)施。6． 培養(yǎng)過(guò)的平板、菌株或有感染性標(biāo)本必須滅毒（高壓）后才可廢棄。江西省新余市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版 本 號(hào)：文件標(biāo)題：工作人員保護(hù)制度文件狀態(tài)：受控文件編號(hào)：修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編 制 者：王騰勇批 準(zhǔn) 者：賀愛(ài)民審 核 者：賀愛(ài)民發(fā) 放 號(hào)：工作人員保護(hù)制度1． 工作人員須穿工作服，戴工作帽，必要時(shí)穿隔離衣、戴口罩、手套。3． 實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本姓名、編號(hào)或者標(biāo)本采集不符合要求時(shí)要退回重留標(biāo)本。、最好采用一次性工具，不能采用一次性工具者，每次取材前均應(yīng)徹底消毒。5. 菌種保存范圍及向外單位轉(zhuǎn)移，應(yīng)按國(guó)家衛(wèi)生部規(guī)定執(zhí)行。、酒精燈等是否關(guān)閉，觀察記錄培養(yǎng)箱、冰箱溫度及工作情況，用浸有消毒液的抹布將操作臺(tái)擦拭干凈，并將試劑、用具等放回原處，清理臺(tái)面，未污染的廢棄物扔進(jìn)污物桶，有菌廢棄物應(yīng)送高壓滅菌后處理。，必要資料和書籍帶入后，應(yīng)遠(yuǎn)離操作臺(tái)。常規(guī)微量生化管：定為剩盒時(shí)預(yù)定下一批。 培養(yǎng)基保存 常規(guī)28℃保存 不常用的培養(yǎng)基應(yīng)用塑料袋包好儲(chǔ)存,避免脫水致某些指示劑或抑制劑濃度相對(duì)增加,而使病原菌不能生長(zhǎng)或生長(zhǎng)不良。 試劑質(zhì)量控制 參見(jiàn)《室內(nèi)質(zhì)量控制管理程序》。低溫保存的試劑須放置于冰箱內(nèi)。驗(yàn)收內(nèi)容包括：試劑的數(shù)量、外觀、有效期及運(yùn)送條件。9. 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員應(yīng)定期健康體檢及必要的預(yù)防接種，以增強(qiáng)自身抵抗力。2. 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室要穿工作服，工作服要放在指定的地點(diǎn)，并經(jīng)常洗滌；生活用品不能帶入實(shí)驗(yàn)室。7. 檢驗(yàn)人員結(jié)束操作后應(yīng)及時(shí)洗手，有必要時(shí)用消毒浸泡。6. 防止病人在檢驗(yàn)科交叉感染。3. 發(fā)生醫(yī)院感染流行或爆發(fā)時(shí)，承擔(dān)相關(guān)檢測(cè)工作。使用后的廢棄物品，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行無(wú)害化處理，不得隨意丟棄。，如紫外線江西省新余市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版 本 號(hào)：文件標(biāo)題：實(shí)驗(yàn)室安全管理制度文件狀態(tài)：受控文件編號(hào)：修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編 制 者：王騰勇批 準(zhǔn) 者：賀愛(ài)民審 核 者：賀愛(ài)民發(fā) 放 號(hào)：實(shí)驗(yàn)室安全管理制度【目的】保障個(gè)人安全，防止交叉感染。6. 各種電器設(shè)備，要有專人保管，并做好有關(guān)的記錄；易燃物品乙醇應(yīng)妥善保管，遠(yuǎn)離火源，若出現(xiàn)著火情況，應(yīng)立即用濕布將其覆蓋。、質(zhì)量控制工作。 試劑標(biāo)識(shí) 所有試劑須有標(biāo)識(shí),并張貼于試劑醒目處。使用抗血清時(shí)應(yīng)注意效價(jià)、透明度與色澤，如有渾濁或沉淀表示已污染，應(yīng)立即停用。 驗(yàn)收后應(yīng)記錄培養(yǎng)基總數(shù)、批號(hào)、生產(chǎn)日期、失效日期及接收人員簽名。藥敏紙片：常見(jiàn)葡萄球菌藥敏紙片定為剩支紙片時(shí)預(yù)定下一批；常見(jiàn)腸桿菌科藥敏紙片定剩紙片時(shí)預(yù)定下一批。，并做好實(shí)驗(yàn)前的各項(xiàng)準(zhǔn)備工作。，如污染了實(shí)驗(yàn)臺(tái)或地面，應(yīng)用3%來(lái)蘇兒覆蓋其上半小時(shí)，然后清洗；如污染工作服，應(yīng)立即脫下，高壓滅菌。保管人員變動(dòng)時(shí)，必須嚴(yán)格交接手續(xù)。、蓋片、平皿、試管等用1000g/L含氯消毒劑浸泡消毒液浸泡，經(jīng)煮沸后清洗或丟棄。江西省新余市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版 本 號(hào)：文件標(biāo)題：微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本采集運(yùn)輸制度文件狀態(tài)：受控文件編號(hào)：修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編 制 者：王騰勇批 準(zhǔn) 者：賀愛(ài)民審 核 者：賀愛(ài)民發(fā) 放 號(hào)：微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本采集運(yùn)輸制度1． 病原微生物的培養(yǎng)必須到微生物實(shí)驗(yàn)室領(lǐng)取無(wú)菌器皿、血培養(yǎng)增菌液瓶等留取標(biāo)本。非一次性的利器放入厚壁容器中并運(yùn)送特定區(qū)域消毒，最好高壓消毒。如傳染物污染手部，要立即用500g/L含氯消毒劑浸泡，再用肥皂水和流水沖洗干凈。 ，以增強(qiáng)自身抵 抗力。 培訓(xùn)員工熟悉和掌握操作規(guī)程的管理程序。參見(jiàn)《標(biāo)本接收、標(biāo)識(shí)程序》、《樣本拒收程序》。 要求制定定期維護(hù)、保養(yǎng)的計(jì)劃，維持儀器的安全工作狀態(tài)。參見(jiàn)《試劑管理程序》。實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)計(jì)劃的項(xiàng)目，應(yīng)至少每6個(gè)月進(jìn)行一次性能評(píng)估，方法包括：與參考實(shí)驗(yàn)室或其他實(shí)驗(yàn)室分割標(biāo)本檢測(cè)；與本實(shí)驗(yàn)室建立的方法分割標(biāo)本檢測(cè)；分析純物質(zhì)、地方數(shù)據(jù)庫(kù)或臨床證實(shí)資料；其他適宜的和規(guī)定的方法。2． 適用范圍微生物實(shí)驗(yàn)室的所有檢驗(yàn)項(xiàng)目。 微生物檢驗(yàn)標(biāo)本信息輸入 微生物實(shí)驗(yàn)室接種崗位檢驗(yàn)人員嚴(yán)格按照〈〈微生物標(biāo)本檢驗(yàn)信息輸入程序〉〉錄入、核對(duì)病人信息和標(biāo)本信息等資料。培訓(xùn)試劑應(yīng)明顯標(biāo)記“僅供培訓(xùn)使用”，并與檢驗(yàn)試劑分開(kāi)放置。 生長(zhǎng)試驗(yàn)及生化反應(yīng)試驗(yàn) 質(zhì)控菌株（表22，23）35`C培養(yǎng)24小時(shí)。4. 程序 一級(jí)報(bào)告 陽(yáng)性報(bào)警血培養(yǎng)瓶應(yīng)進(jìn)行涂片革蘭染色，將涂片結(jié)果電話（或其他方式）通知臨床。 3 同時(shí)做痰涂片鏡檢 咽拭子標(biāo)本 涂布于血瓊脂平板、巧克力瓊脂平板、麥康凱平板的第一區(qū)，然后用接種環(huán)劃第二、第三區(qū)...。3. 職責(zé)微生物檢驗(yàn)人員嚴(yán)格執(zhí)行本程序。用左手握住菌種管和斜面培養(yǎng)管底部，右手持接種針（環(huán)）。在試管內(nèi)壁與液面交界處輕輕研磨，使細(xì)菌混勻在液體培養(yǎng)基中參考文獻(xiàn)1周庭銀編著，臨床微生物學(xué)診斷與圖解（第二版）.上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,20072葉應(yīng)嫵，王毓三，：東南大學(xué)出版社，2006 江西省新余市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版 本 號(hào)：文件標(biāo)題：穿刺液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件狀態(tài)：受控文件編號(hào)：修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編 制 者：王騰勇批 準(zhǔn) 者：賀愛(ài)民審 核 者：賀愛(ài)民發(fā) 放 號(hào)：穿刺液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1. 目的規(guī)范穿刺液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。4. 試劑、儀器 革蘭染液、氧化酶試劑、3%觸酶、血瓊脂平板、巧克力平板、麥康凱平板、相關(guān)生化試劑等。 分離培養(yǎng)
　　 一般細(xì)菌培養(yǎng)　接種血瓊脂平板、巧克力瓊脂平板和麥康凱瓊脂平板（或EMB及中國(guó)藍(lán)瓊脂平板），5％～10％CO2 條件下，35℃培養(yǎng)18～24 h，根據(jù)菌落及染色形態(tài)特點(diǎn)，作出初步判斷。 查見(jiàn)細(xì)菌，報(bào)告菌名和藥敏結(jié)果。參考文獻(xiàn)1 CNASGL23《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用指南》, 20082周庭銀編著. 臨床微生物學(xué)診斷與圖解. 第二版. 上海: 上?？茖W(xué)技術(shù)出版社, 20073 葉應(yīng)嫵, 王毓三, . 第3版 .南京: 東南大學(xué)出版社, 20064 Murray PR. Manual of Clinical Microbilogy. 9th ed. Washington: ASM Press, 20075 ISO15189:2007《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》, 2007江西省新余市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版 本 號(hào)：文件標(biāo)題：糞便標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件狀態(tài)：受控文件編號(hào)：修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編 制 者：王騰勇批 準(zhǔn) 者：賀愛(ài)民審 核 者：賀愛(ài)民發(fā) 放 號(hào)：糞便標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1. 目的規(guī)范糞便標(biāo)本細(xì)菌學(xué)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。保存彎曲桿菌和弧菌的標(biāo)本，需加CaCl2(100mg/L)試劑。5. 細(xì)菌鑒定和藥敏質(zhì)控參見(jiàn)質(zhì)量管理。
　　 副溶血弧菌培養(yǎng)　參見(jiàn)《副溶血弧菌檢驗(yàn)操作規(guī)程》。 結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)：參見(jiàn)《結(jié)核分枝桿菌檢驗(yàn)操作規(guī)程》。③病毒性：輪狀病毒等。
　 氣管穿刺法　在環(huán)甲膜下穿刺抽取痰液，收集標(biāo)本，適用于厭氧菌