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微生物實驗室病原微生物評估報告-在線瀏覽

2025-05-25 03:30本頁面
  

【正文】 設(shè)備。(6)操作過程中發(fā)生菌種污染物表時,應(yīng)馬上采取措施進行物表消毒。(8)對菌種的保存應(yīng)嚴格遵守菌種保存制度,嚴禁擅自保存各種國家法定傳染病菌株或毒株。(10)微生物、PCR實驗室要設(shè)置紗窗、擋鼠板。學(xué)士學(xué)位3名,5名曾經(jīng)從事微生物學(xué)實驗,3名曾經(jīng)從事無菌實驗室活動經(jīng)歷,5名技術(shù)人員學(xué)習(xí)過生物安全手冊并通過定期培訓(xùn)及考核成績合格,經(jīng)體檢無現(xiàn)患嚴重疾病,健康狀態(tài)良好。根據(jù)擬采取的預(yù)防控制措施后依然存在的殘留風(fēng)險為高度0項,中度0項,低度危害19項。因而,食品受其污染的機會很多。 金黃色葡萄球菌的流行病學(xué)一般有如下特點:季節(jié)分布,多見于春夏季;中毒食品種類多,如奶、肉、蛋、魚及其制品。 一般說,金黃色葡萄球菌可通過以下途徑污染食品:食品加工人員、炊事員或銷售人員帶菌,造成食品污染;食品在加工前本身帶菌,或在加工過程中受到了污染,產(chǎn)生了腸毒素,引起食物中毒;熟食制品包裝不嚴,運輸過程受到污染;奶牛患化膿性乳腺炎或禽畜局部化膿時,對肉體其他部位的污染。 金黃色葡萄球菌是人類化膿感染中最常見的病原菌,可引起局部化膿感染,也可引起肺炎、偽膜性腸炎、心包炎等,甚至敗血癥、膿毒癥等全身感染。持續(xù)性發(fā)熱常見,而且可伴有休克。突然出現(xiàn)心臟雜音,膿毒性栓子和其他經(jīng)典體征便可作出可疑診斷,確診需依據(jù)超聲心動圖和血培養(yǎng)。關(guān)節(jié)周圍感染常引起關(guān)節(jié)積液,提示為化膿性關(guān)節(jié)炎而不是骨髓炎。X線變化在10~14日內(nèi)不明顯,骨質(zhì)疏松和骨皮質(zhì)反應(yīng)甚至更長時間仍不能測出,而放射性核素骨掃描則常能較早出現(xiàn)異常。若糞便鏡檢發(fā)現(xiàn)大片的嗜中性白細胞和革蘭氏陽性球菌,則可能作出診斷,但必須排除產(chǎn)毒性艱難梭狀芽胞桿菌感染,這是抗生素相關(guān)性結(jié)腸炎最常見的原因。葡萄球菌形成的感染易局部化與此酶有關(guān);:金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的脫氧核糖核酸酶能耐受高溫,可用來作為依據(jù)鑒定金黃色葡萄球菌;:金黃色葡萄球菌能產(chǎn)生數(shù)種引起急性胃腸炎的蛋白質(zhì)性腸毒素,分為A、B、C、D、E及F五種血清型。C煮沸30分鐘而不被破壞。此外,金黃色葡萄球菌還產(chǎn)生溶表皮素、明膠酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。金黃色葡萄球菌屬于葡萄球菌屬,無芽胞、鞭毛,大多數(shù)無莢膜,革蘭氏染色陽性衰老、死亡和被白細胞吞噬后的菌體革蘭染色呈陰性。 金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性,可在1015%NaCl肉湯中生長。甲基紅反應(yīng)陽性,VP反應(yīng)弱陽性。 金黃色葡萄球菌具有較強的抵抗力,對磺胺類藥物敏感性低,但對青霉素、紅霉素等高度敏感。:直接涂片檢查在正常情況下呈無菌狀態(tài)的體液標本如血液、腦脊液、穿刺液等,若有檢出革蘭氏陽性,顯微鏡下呈葡萄狀排列、無芽胞、莢膜。:可以選用普通營養(yǎng)瓊脂平板、血平板和高鹽甘露醇平板,血平板用葡萄糖肉湯增菌培養(yǎng)基。若接種于血平板,菌落周圍可形成明顯的透明的β—溶血環(huán)。(1)血漿凝固酶試驗:血漿凝固酶是金黃色葡萄球菌所產(chǎn)生的,與其致病力有關(guān)的一種侵襲性酶,其作用是使血漿中的纖維蛋白在菌體表面沉積和凝固以阻礙吞噬細胞的吞噬。前者結(jié)合在細菌的細胞壁上,能直接作用于血漿中的纖維蛋白原,使之轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,環(huán)繞菌體而形成凝塊。具體的測量方法也因此分為玻片法和試管法兩種。試管法:,置37℃培養(yǎng),每隔半小時觀察一次,連續(xù)觀察6小時,出現(xiàn)凝固,即將小試管傾斜或倒置時,內(nèi)容物不流動,判為陽性。本試驗金黃色葡萄球菌為陽性。(4)Staphaurex 膠乳凝集實驗 是鑒定金黃色葡萄球菌的一種快速、簡便的商品化直接凝集試驗。 如上述,注意與其他凝固酶陽性的葡萄球菌的鑒別要點:PYR(吡咯烷酮β萘基酰胺試驗陰性;VP試驗陽性;鳥氨酸脫羧酶試驗陰性。 包括PFGE脈沖場凝膠電泳以及酶切圖譜分析等。防止金黃色葡萄球菌對奶及其制品的污染:如牛奶廠要定期檢查奶牛的乳房,不能擠用患化膿性乳腺炎的牛奶;奶擠出后,要迅速冷至10℃以下,以防毒素生成、細菌繁殖。對肉制品加工廠,患局部化膿感染的禽、畜尸體應(yīng)除去病變部位,經(jīng)高溫或其他適當(dāng)方式處理后進行加工生產(chǎn)。3)無菌措施(如檢查病人前后徹底洗手和消毒合用的器械)至關(guān)重要。無癥狀的鼻腔帶菌者,除非所帶菌株十分危險或被懷疑為暴發(fā)流行的傳染源,一般不必隔離。培養(yǎng)標本應(yīng)在開始治療前或更換抗生素之前獲取。 醫(yī)院獲得的葡萄球菌和大多數(shù)社區(qū)獲得的菌株,通常對青霉素G,氨芐青霉素和抗假單胞菌青霉素有耐藥性。雖然頭孢菌素和萬古霉素都有效,但通常首選一種耐青霉素酶的青霉素。 目前耐甲氧苯青霉素金黃色葡萄球菌(MRSA)菌株日益增多,這種細菌雖可從社區(qū)獲得感染的病人中分離得到,但多數(shù)是從感染的靜脈吸毒者和重癥監(jiān)護室的病人中分離獲得。這些細菌對氨基糖苷類和大環(huán)內(nèi)酯類(紅霉素,克拉霉素,阿齊霉素,林可霉素和氯林可霉素)的耐藥性也很普遍。腎功能正常成人的通用劑量是每6小時靜脈注射500mg 或每12小時靜滴注1000mg,至少在1小時內(nèi)滴完。某些嚴重的或有并發(fā)癥的感染,可能需要靜脈給藥治療6~8周,然后再口服治療1個月或更長時間。但利福平不要單獨應(yīng)用,因為細菌很易產(chǎn)生抗藥性。鄰氯青霉素,雙氯青霉素,TMPSMZ,環(huán)丙沙星及局部用莫匹羅星(mupirocin)可用于治療MRSA帶菌狀態(tài),但MRSA對這些藥物可產(chǎn)生抗藥性??墒沁@些葡萄球菌很容易對治療這類感染的其他藥物產(chǎn)生抗藥性。對這些病人應(yīng)嚴格隔離,以防他們的細菌傳播。相關(guān)的防護事宜包括:(1)操作要求實驗時,未經(jīng)實驗室主任同意,限制或禁止進入實驗室。食物應(yīng)存放在工作區(qū)域以外專用櫥柜或冰箱中。對于污染的銳器,必須時刻保持高度的警惕,包括針、注射器、玻片、加樣器等。用過的一次性針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉,或在丟棄前進行人工處理,要不將之小心放入不會被刺穿的、用于收集廢棄銳器的容器中。打碎的器皿不能直接用手處理,必須用其它工具處理,如刷子和簸箕、夾子或鑷子。所有的培養(yǎng)物、儲存物及其它規(guī)定的廢物在釋放前,均應(yīng)使用可行的消毒方法進行消毒,如高壓滅菌。離開該系統(tǒng)進行消毒的物料,在轉(zhuǎn)移前應(yīng)包裝,其包裝應(yīng)符合有關(guān)的法規(guī)。進行適當(dāng)?shù)尼t(yī)學(xué)評估、觀察、治療,保留書面記錄。污染的設(shè)備在送去修理、維護前,要按照相關(guān)的規(guī)定消毒;在離開設(shè)施轉(zhuǎn)移前,要按照相關(guān)的規(guī)定打包運輸。確定可能形成傳染性氣溶膠或濺出物的實驗過程,包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開啟裝有傳染源的容器、采集感染標本等。當(dāng)必須在生物安全柜外處理標本時,需采取面部保護措施(跟鏡、口罩、面罩、或其他防濺裝置),以免傳染源或其他有害物濺或灑到面上。人員到非實驗室區(qū)域時,防護服必須留在實驗室內(nèi)??赡芙佑|潛在傳染源、被污染的表面或設(shè)備時,要戴手套。要備有帶滑石粉的乳膠手套。淋病奈瑟菌的生物危害評估報告一、淋病奈瑟菌的傳播與致病 淋病奈瑟菌又稱淋球菌,是淋病的病原菌,人類是本菌的唯一天然宿主和傳染源。 淋病患者是主要傳染源,有癥狀或無癥狀的患者均可通過性接觸傳播,其中輕癥或無癥狀的淋病患者是重要的傳染源。 本病最初多侵犯尿道、宮頸內(nèi)膜,繼而可波及前列腺、精囊、副睪、子宮內(nèi)膜及輸卵管。尚可經(jīng)血行播散引起菌血癥、關(guān)節(jié)炎、心內(nèi)膜炎及腦膜炎,可引起死亡或不育、不孕、失明及尿道狹窄等后果。二、淋病奈瑟菌的生物學(xué)特性 淋病奈瑟菌屬奈瑟菌屬,鏡下呈腎形,常成雙排列,鄰近面扁平或稍凹,像兩瓣黃豆對在一起。急性炎癥期細菌多在患者分泌物的少部分中性粒細胞的胞漿中,慢性期則多在細胞外,且有些可呈單個球形或四聯(lián)狀。 淋球菌適于潮濕(相對溫度80%~85%)、溫暖(℃~℃)、中性偏堿(~)、含5%~10%二氧化碳的條件下生長。如在不完全干燥的衣褲、被褥、毛巾、玩具上則可存活18~24小時。 淋球菌較為嬌嫩,酶系統(tǒng)不完整,初代培養(yǎng)普通培養(yǎng)基不易成功,需在含有動物蛋白的培養(yǎng)基上,且含有二氧化碳的條件下才能生長。 淋球菌的生化反應(yīng)不發(fā)達,只分解葡萄糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,不分解麥芽糖及蔗糖。淋球菌能產(chǎn)生氧化酶和過氧化氫酶,在診斷上有一定意義。涂片對有大量膿性分泌物的單純淋菌性前尿道炎患者,此法陽性率在90%左右,可以初步診斷。慢性淋病由于分泌物中淋球菌較少,陽性率低,因此要取前列腺按摩液,以提高檢出率。另外對癥狀不典型的涂片陽性應(yīng)作進一步檢查。 目前國外推薦選擇培養(yǎng)基有改良的ThayerMartin(TM)培養(yǎng)基和New York City(NYC)培養(yǎng)基。在36℃,70%濕度,含 5%10%CO2(燭缸)環(huán)境中培養(yǎng),2448小時觀察結(jié)果。培養(yǎng)陽性率男性 80%95%,女性8090%。培養(yǎng)陽性率男性為80%~95%,女性為 80%~90%。2.直接免疫熒光試驗:通過檢測淋球菌外膜蛋白I的單克隆抗體作直接免疫熒光試驗。(4)基因診斷1.淋球菌的基因探針診斷:淋球菌的基因探針診斷,所用的探針有:質(zhì)粒DNA探針,染色體基因探針和rRNA基因探針。(5)藥敏試驗 對培養(yǎng)陽性者可進一步用紙片擴散法做藥敏試驗,或用瓊脂平皿稀釋法測定藥物最小抑菌濃度(MIC),以及用紙片酸度定量法檢測β-內(nèi)酰胺酶(使用 Whatman I號濾紙PPNG菌株能使其顏色由藍變黃,陽性為PPNG,陰性為NPPNG),以確定淋球菌對抗生素的敏感性,合理選擇用藥。,以防止淋球菌感染。,徹底消滅傳染源。,不與家人、小孩(尤其女孩)同床、共浴。,方可結(jié)婚、生育和安排工作。相關(guān)的防護事宜包括:(1)操作要求實驗時,未經(jīng)實驗室主任同意,限制或禁止進入實驗室。食物應(yīng)存放在工作區(qū)域以外專用櫥柜或冰箱中。注射和吸取感染材料時,只能使用針頭固定注射器或一次性注射器(即注射器和針頭是一體的)。非一次性銳器必須放置在堅壁容器中,轉(zhuǎn)移至處理區(qū)消毒,最好高壓殺菌。盛污染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在倒掉前,應(yīng)按照相關(guān)的規(guī)定進行消毒。轉(zhuǎn)移到就近實驗室消毒的物料應(yīng)置于耐用、防漏容器內(nèi),密封運出實驗室。濺出或偶然事件中,明顯暴露于傳染源時,要立即向?qū)嶒炇抑魅螆蟾?。按日常程序、在有關(guān)傳染源的工作結(jié)束后、尤其是傳染源濺出或灑出后、或受到其他傳染源污染后,實驗室設(shè)備和工作臺面應(yīng)當(dāng)使用有效的消毒劑消毒。(2)安全設(shè)備正確使用和保養(yǎng)生物安全柜、最好是二級生物安全柜、或其他合適的人員防護設(shè)施、或物理遏制裝置。涉及高濃度或大體積的傳染源時,若選用密封轉(zhuǎn)頭或帶安全罩的離心機,若轉(zhuǎn)頭或安全罩僅在生物安全柜中打開,則可在開放實驗室內(nèi)離心。在實驗室內(nèi),必須使用專用的防護性外衣、大褂、罩衫或制服。防護服可以在實驗室內(nèi)處理,也可以在洗衣房中洗滌,但不能帶回家中。一次性手套不用清洗、不能重復(fù)使用,不能用于接觸“潔凈”的表面(鍵盤、電話等),也不應(yīng)當(dāng)戴著到實驗室外。脫掉手套后,要洗手。 結(jié)核分枝桿菌的主要傳染途徑是經(jīng)呼吸道傳播,由排菌的肺結(jié)核病人在咳嗽、噴嚏或大聲說話時隨呼吸道分泌物排出到空氣中,或排菌的肺結(jié)核病人隨地吐痰通過再生氣溶膠(塵埃),攜帶結(jié)核桿菌,飛揚在空氣中,被健康的人吸入后發(fā)生感染和發(fā)病,因此排菌的肺結(jié)核患者(尤其是痰涂片陽性未經(jīng)治療者)是結(jié)核病的主要傳染源?;颊吲懦龅娘w沫在110微米者,在空氣中漂浮時間長,傳染性越大。周圍人群與患者接觸越密切者,受感染的機會越多。未受結(jié)核感染的人是結(jié)核病易感人群,由于結(jié)核病是人畜共患病,哺乳類動物如牛、鹿、猴、豬、貓、狗等也都可以患結(jié)核病。典型肺結(jié)核起病緩慢,病程較長,有低熱、倦怠、食欲不振、咳嗽及少量咯血。(1)癥狀 ①全身癥狀 表現(xiàn)為午后低熱、乏力、食欲不振、消瘦、盜汗等。約1/3患者有不同程度咯血,咯血后常有低熱。病灶炎癥累及壁層胸膜時,相應(yīng)胸壁有刺痛,一般多不劇烈,隨呼吸及咳嗽而加重。(2)體征 早期病灶小或位于肺組織深部,多無異常體征。因肺結(jié)核好發(fā)于肺上葉尖后段及下葉背段,故鎖骨上下、肩胛區(qū)叩診略濁,咳嗽后偶可聞及濕啰音,對診斷有參考意義。二、結(jié)核桿菌的生物學(xué)特性從分類學(xué)上看結(jié)核桿菌屬于裂殖菌綱、放線菌目、分枝桿菌科、分枝桿菌屬。鏡下常呈單個散在或呈“人、V、T、Y”形排列,菌體多時細菌扭集一起呈繩索狀、束狀或叢狀。 分枝桿菌生長緩慢,在人工培養(yǎng)基內(nèi)繁殖一代約需1520小時,一般需24周或更長時間始見菌落生長,甚至有極少數(shù)生長極為緩慢者需8周以上才開始有菌落生長。培養(yǎng)營養(yǎng)要求較高且特殊,培養(yǎng)基需含雞蛋、血清、氨基酸、甘油等營養(yǎng)豐富的復(fù)雜有機物及少量無機鹽類。涂片抗酸染色鏡檢快速簡便。痰菌陽性表明其病灶是開放性的,具有傳染性。但結(jié)核菌生長緩慢,培養(yǎng)較為費時,但精確可靠,特異性高。PCR技術(shù)檢測結(jié)核菌 DNA快速、簡便,并可鑒定菌型,不足之處是可能出現(xiàn)假陽性或假陰性。X線對各類結(jié)核病的透過度不同,通過X線檢查能大致估計結(jié)核病灶的病理性質(zhì),并能早期發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核,以及判斷病情發(fā)展及治療效果,有助于決定治療方案。胸部CT檢查對于發(fā)現(xiàn)微小或隱蔽性病變,了解病變范圍及病變鑒別等方面均有幫助。使用的變應(yīng)原有舊結(jié)核菌素(old tuberculin, OT)和結(jié)核菌素的純化蛋白衍化物(purified protein derivative, PPD),現(xiàn)臨床多用PPD。結(jié)核菌素試驗有助于判斷有無結(jié)核菌感染。結(jié)核菌素試驗陽性反應(yīng)僅表示曾有結(jié)核感染,并不一定現(xiàn)在患病。④ 其它檢查 結(jié)核病患者血像通常無改變,嚴重病例常有繼發(fā)性貧血,急性粟粒型肺結(jié)核時白細胞總數(shù)減低或出現(xiàn)類白血病反應(yīng)。用ELISA法檢測患者血清中特異性抗體,可對無痰或痰菌陰性者和肺外結(jié)核的診斷提供參考。淺表淋巴結(jié)活檢,有助于結(jié)核的鑒別診斷。X線檢查是診斷肺結(jié)核的必要手段,對早期診斷、確定病變部位、范圍、性質(zhì)、了解其演變及選擇治療等均具有重要價值。肺結(jié)核分為五型:Ⅰ型為原發(fā)型肺結(jié)核;Ⅱ型為血行播散型肺結(jié)核;Ⅲ型為浸潤型肺結(jié)核;Ⅳ型為慢性纖維空洞型肺結(jié)核;Ⅴ型為結(jié)核性胸膜炎。四、結(jié)核桿菌的防治及生物安全防護細菌的防治 根據(jù)《中華人民共和國傳染病防治法》和《實驗室生物安全通用要求》中的有關(guān)規(guī)定,結(jié)核病屬于乙類傳染病,按照乙類傳染病進行預(yù)防控制。臨床上肺結(jié)核化學(xué)治療的原則是早期、規(guī)律、全
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