【正文】 創(chuàng)傷感染標(biāo)本留取標(biāo)準(zhǔn)操作程序21生殖道分泌物標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序22糞便標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序23穿刺液標(biāo)本留取標(biāo)準(zhǔn)操作程序24腦脊液、膽汁標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序25組織標(biāo)本的采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序26靜脈導(dǎo)管標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序27眼耳及乳突分泌物標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序28樣本接收、核對、接種、培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序29菌株的純化、鑒定、藥敏流程 標(biāo)準(zhǔn)操作程序30苛養(yǎng)菌培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序31常見標(biāo)本培養(yǎng)結(jié)果解釋標(biāo)準(zhǔn)操作程序32微生物鑒定及藥物敏感試驗分析系統(tǒng)操作規(guī)程34KB法藥敏試驗標(biāo)準(zhǔn)操作程序42ESBL檢測標(biāo)準(zhǔn)操作程序43β內(nèi)酰胺酶檢測標(biāo)準(zhǔn)操作程序44耐甲氧西林葡萄球菌紙片擴散法篩選試驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程45MRSA紙片擴散法篩選試驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程46革蘭染色標(biāo)準(zhǔn)操作程序47抗酸染色標(biāo)準(zhǔn)操作程序48解脲/人型支原體培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序49沙眼衣原體抗原檢測標(biāo)準(zhǔn)操作程序50康泰真菌鑒定藥敏標(biāo)準(zhǔn)操作程序51觸酶試驗標(biāo)準(zhǔn)操作程序52氧化酶試驗標(biāo)準(zhǔn)操作程序53芽管試驗標(biāo)準(zhǔn)操作程序54臨床微生物實驗室安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序55微生物室試劑管理制度56微生物室試劑管理制度57分級報告程序57江西省新余市人民醫(yī)院檢驗科微生物實驗室版 本 號：文件標(biāo)題：檢驗科生物安全防范管理制度文件狀態(tài)：受控文件編號：修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編 制 者：王騰勇批 準(zhǔn) 者：賀愛民審 核 者：賀愛民發(fā) 放 號：檢驗科生物安全防范管理制度一、檢驗科在醫(yī)院感染管理工作中應(yīng)履行的職責(zé)：1. 負責(zé)醫(yī)院感染常規(guī)微生物監(jiān)測。3. 格執(zhí)行無菌技術(shù)操作規(guī)程，靜脈采血須一人一針一墊一帶；4. 微量采血應(yīng)做到一人一針一管一片；對病人操作前盡量保持手的清潔。在進行各種檢驗時，應(yīng)避免污染，在進行特殊傳染病檢驗后，應(yīng)及時進行消毒，遇有場地、工作服或體表污染時，應(yīng)立即處理，防止擴散，并視污染情況向上級報告。4. 如傳染物污染桌面或地面應(yīng)立即用1%（g/dl）84高效消毒劑溶液（或500mg/L含氯消毒劑溶液）覆蓋其上，經(jīng)30分鐘方可抹去，如工作服被病原微生物污染，應(yīng)立即脫下，進行高壓滅菌處理。職責(zé).、申購、驗收等管理工作。 試劑檔案 訂購試劑應(yīng)建立試劑檔案，以監(jiān)控試劑供應(yīng)狀況，保證實驗順利進行。 試劑使用 使用前，工作人員應(yīng)確認(rèn)：試劑處于有效期內(nèi)、質(zhì)控合格、標(biāo)識明確、儲存條件正確、存放合理。 驗收時應(yīng)注意培養(yǎng)基是否有標(biāo)識(包括培養(yǎng)基名稱、批號、生產(chǎn)日期、失效日期)，包裝是否完整，培養(yǎng)基是否破損、污染，外觀是否良好（良好培養(yǎng)基應(yīng)該是表面平滑，水分，顏色、厚度適宜，無污染）等。 設(shè)置試劑警戒線應(yīng)當(dāng)考慮到：試劑供貨周期的長短；試劑有效期長短；質(zhì)控試驗需要的時間（要保證新進試劑一旦失控時，實驗室仍有足夠試劑保證試驗的正常進行）。3． 紫外線燈管每月用無水酒精擦拭；每半年由院感科對紫外線燈管進行紫外線強度（消毒效果）測試，并標(biāo)明測試。，接種環(huán)用完后應(yīng)立即火焰滅菌，沾菌吸管、玻片等用后應(yīng)浸泡在消毒液內(nèi)。 江西省新余市人民醫(yī)院檢驗科微生物實驗室版 本 號：文件標(biāo)題：病原微生物保存制度文件狀態(tài)：受控文件編號：修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編 制 者：王騰勇批 準(zhǔn) 者：賀愛民審 核 者：賀愛民發(fā) 放 號：病原微生物保存制度1． 據(jù)《病原微生物安全條例》要求實驗室不能保存高致性病原微生物菌（毒）種。 江西省新余市人民醫(yī)院檢驗科微生物實驗室版 本 號：文件標(biāo)題：微生物實驗室消毒隔離措施制度文件狀態(tài)：受控文件編號：修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編 制 者：王騰勇批 準(zhǔn) 者：賀愛民審 核 者：賀愛民發(fā) 放 號：微生物實驗室消毒隔離措施制度，上班前、下班后開紫外燈（40分鐘）進行空氣消毒。如污染工作服，應(yīng)立即脫下，高壓滅菌。江西省新余市人民醫(yī)院檢驗科微生物實驗室版 本 號：文件標(biāo)題：尖銳器具安全使用制度文件狀態(tài)：受控文件編號：修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編 制 者：王騰勇批 準(zhǔn) 者：賀愛民審 核 者：賀愛民發(fā) 放 號：尖銳器具安全使用制度1． 除特殊情況下，禁止在實驗室使用針、注射器及其它利器，盡可能使用塑料器材代替玻璃器材。2． 進入實驗室要穿工作服，工作服要放在指定的地點，并經(jīng)常洗滌；生活用品不能帶入實驗室。9． 分離出甲類或乙類傳染病菌株，應(yīng)及時上報院感科，未經(jīng)上級同意不得帶出 實驗室，并由專人處理。 人員 包括學(xué)歷、職稱等要求，員工的培訓(xùn)和工作能力評估。參見《結(jié)果報告程序》。操作者應(yīng)可以方便取閱儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程以及儀器維護信息。 商品化培養(yǎng)基應(yīng)嚴(yán)格驗收，并保存質(zhì)控合格證明文件。3. 職責(zé) 微生物檢驗人員均須熟知并遵守本程序。 結(jié)果上報截止日期之前嚴(yán)禁將質(zhì)控標(biāo)本送至其他單位代做。 樣本采集和運輸 樣本采集人員應(yīng)按照〈〈采集前病人識別程序〉〉確認(rèn)病人，按照〈〈標(biāo)本采集、運送程序〉〉采集樣本，并在規(guī)定的時間和溫度范圍內(nèi)，使用指定的運輸培養(yǎng)基，安全運送到微生物室。 無廠商特別說明時，不同批號的試劑不可混用。 無菌試驗 抽檢培養(yǎng)基數(shù)量：100塊以內(nèi)，隨機抽檢5%；100塊以上可隨機取10塊平皿或10支試管培養(yǎng)基進行無菌試驗。2. 范圍 血液、骨髓標(biāo)本。 痰標(biāo)本、登記后的痰標(biāo)本，加入痰消化劑或無菌生理鹽水處理。參考文獻1 周庭銀編著，臨床微生物學(xué)診斷與圖解（第二版）.上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,20072 葉應(yīng)嫵，王毓三，：東南大學(xué)出版社，2006 江西省新余市人民醫(yī)院檢驗科微生物實驗室版 本 號：文件標(biāo)題：標(biāo)本接種標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件狀態(tài)：受控文件編號：修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編 制 者：王騰勇批 準(zhǔn) 者：賀愛民審 核 者：賀愛民發(fā) 放 號：標(biāo)本接種標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1. 目的 規(guī)范標(biāo)本接種標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，確保檢驗結(jié)果準(zhǔn)確可靠。將滅菌生理鹽水適量稀釋（通常作10－1～10－5稀釋）的標(biāo)本1ml，置于滅菌平皿內(nèi)，注入已熔化并冷卻至50℃左右的培養(yǎng)基15ml，混勻，待冷卻后，倒置。以接種針挑取細菌培養(yǎng)物，插入半固體培養(yǎng)基的中央，穿刺至培養(yǎng)基底部，然后沿原穿刺線退出接種針。 標(biāo)本不是無菌留取，容器不符合要求。 涂片檢查　膿性標(biāo)本直接涂片。
結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)：參見《結(jié)核分枝桿菌檢驗操作規(guī)程》。胸腔感染的病原菌以結(jié)核分枝桿菌多見，其次是金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、大腸埃希菌和銅綠假單胞菌等；腹腔感染的病原菌以腸道細菌如大腸埃希菌、糞腸球菌，以及結(jié)核分枝桿菌多見；心包炎和關(guān)節(jié)腔液以金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、大腸埃希菌和銅綠假單胞菌等多見。培養(yǎng)艱難梭菌的標(biāo)本保存于20℃以下。 接種針、接種環(huán)、電熱灼燒器、顯微鏡、孵育箱、CO2 培養(yǎng)箱等。
　　 致病性大腸埃希菌培養(yǎng)　參見《致病性大腸埃希菌檢驗操作規(guī)程》。
　　 真菌培養(yǎng)　參見《結(jié)核分枝桿菌檢驗操作規(guī)程》。引起感染性腹瀉的病原微生物有：①細菌性：產(chǎn)毒素型腹瀉，包括霍亂弧菌、腸毒素型大腸埃希菌等；侵襲型腹瀉，包括志賀菌、腸致病型大腸埃希菌和腸侵襲型大腸埃希菌等；食物中毒，包括沙門菌、金黃色葡萄球菌、副溶血性弧菌、蠟樣芽胞桿菌和肉毒梭菌等；偽膜性腸炎，包括艱難梭菌或金黃色葡萄球菌；慢性腹瀉，可能由結(jié)核桿菌引起。
　 　在留取痰之前，用清水反復(fù)漱口，應(yīng)從氣管深部咳出痰，吐入無菌容器內(nèi)。 痰標(biāo)本留取放置時間太長，超過2h。6. 檢驗步驟接收標(biāo)本后，立即對標(biāo)本進行編號、登記。如查見中間部分的菌絲為革蘭陽性，而四周放射的末端為革蘭陰性，萋尼染色為非抗酸性者，可報告為”找到革蘭陽性桿菌疑似放線菌”。 未檢出致病菌時應(yīng)報告“正常菌群”。兒童細菌性肺炎多為流感嗜血桿菌所致。3. 標(biāo)本 標(biāo)本類型　腦脊液。 VITEK鑒定系統(tǒng)。 新生隱球菌涂片檢查　取腦脊液的離心沉淀物作墨汁負染色，或取腦脊液的離心沉淀物接種于沙氏培養(yǎng)基上，置于35℃培養(yǎng)2～5日，根據(jù)菌落特性，涂片染色鏡檢作出報告。 流感嗜血桿菌容易在外界環(huán)境中死亡，腦膜炎奈瑟菌對寒冷和干燥均很敏感，在體外容易自溶，故不論是涂片鏡檢還是進行培養(yǎng)均應(yīng)及時送檢。參考文獻1 CNASGL23《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床微生物學(xué)檢驗領(lǐng)域的應(yīng)用指南》, 20082周庭銀編著. 臨床微生物學(xué)診斷與圖解. 第二版. 上海: 上?？茖W(xué)技術(shù)出版社, 20073 葉應(yīng)嫵, 王毓三, . 第3版 .南京: 東南大學(xué)出版社, 20064 Murray PR. Manual of Clini