谷氨酰胺轉氨酶ppt課件-在線瀏覽
2025-02-22 19:45本頁面
【正文】 胺轉氨酶粗酶的工藝流程為： 分別測定香菇、平菇、金針菇、杏鮑菇的谷氨酰胺轉氨酶粗提液的谷氨酰胺轉氨酶酶活性，結果分別為 、 、 、 U/mL。 超濾方法 采用 WB3 型的中空纖維膜， 截留分子量為 30 000 u，在加冰冷卻的條件下，保持泵出水壓為 ，對粗酶濾液進行超濾循環(huán)，直到達到相應的濃縮倍數(shù)，收集濃縮液。 （酶活收率分別為 40 ％、 38． 7 ％、 40． 8 ％） 丙酮沉淀法 實驗方法與乙醇相同。（在 60%時酶活最高，達到 %） 不同沉淀法對酶收率的影響 分別采用 60 %飽和硫酸銨沉淀、 95 %乙醇與丙酮沉淀法對粗酶進行沉淀分離， 3 種沉淀法的酶活收率分別為56． 9 %、 43． 6 %、 %。但是飽和硫酸銨沉淀法在酶液中引入了水溶性無機鹽， 需要進行脫鹽等步驟，較繁瑣。而考慮到作為食品用酶，最好不用丙酮沉淀法，所以最終采用乙醇沉淀。 溫度對粗酶穩(wěn)定性的影響 冷凍干燥后的粗酶制成酶液， 分別在 50、 60 ℃ 的水浴中保留 10 min，用冰浴快速冷卻，然后在 37℃ 下測定酶活，以未經(jīng)處理的酶液酶活為 100%。計算相對酶活，得出曲線。 金屬離子對酶活的影響 在酶反應體系中分別加入相同濃度（ 1 mg/L）的各種金屬離子（ Ca2+、 Na+、 K+、 Mg2+、 Cu2+）， 37 ℃ 保溫 10 min測定谷氨酰胺轉氨酶粗酶酶活。 底物濃度對反應速度影響 分別加入底物（ mol/L） 、 、 、 、 mL，每支試管各加入 mL 濃縮酶液， 37 ℃反應 10 min，各管加 mol/L TrisHCl 緩沖液至 mL，分別測定酶活性，求出反應速率，采用 LineweaverBurk 雙倒數(shù)法求得米氏常數(shù) Km 和最大
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